Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-09-09T20:13:58Z No. of bitstreams: 2 LUANA MARCHI QUADROS.pdf: 486273 bytes, checksum: 3aba5f2bff1f008819318201078a6c61 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-09-09T20:14:14Z (GMT) No. of bitstreams: 2 LUANA MARCHI QUADROS.pdf: 486273 bytes, checksum: 3aba5f2bff1f008819318201078a6c61 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-09T20:14:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 LUANA MARCHI QUADROS.pdf: 486273 bytes, checksum: 3aba5f2bff1f008819318201078a6c61 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2015-10-16 / O vírus da diarreia viral bovina (BVDV) é considerado um importante patógeno de bovinos e está amplamente disseminado no rebanho brasileiro. A transmissão do vírus ocorre por contato direto e indireto entre animais infectados e animais susceptíveis, sendo que os animais persistentemente infectados são fundamentais na manutenção do vírus no rebanho. A reprodução experimental da infecção possibilita o estudo dos parâmetros clínicos e virais, bem como o estabelecimento de parâmetros para testes de diagnóstico, de vacinas e a determinação de medidas de controle. Com o objetivo de estudar a patogenicidade de uma amostra brasileira de BVDV-1a 241.10, quatro bovinos foram inoculados pela via intranasal com uma suspensão viral contendo 107,2 TCID50/ml. Um animal não inoculado foi mantido em contato para avaliar a transmissibilidade. Após a inoculação, os animais foram monitorados diariamente para observação de sinais clínicos. Amostras de secreções nasais foram coletadas nos dias -3 ao 15 dias pós-inoculação (pi) e sangue nos dias -2, 0, 2, 4, 6, 8, 10, 12 e 14 pi para detecção da presença viral por isolamento em cultivo celular. A contagem dos leucócitos totais foi realizada em diferentes momentos nos dias -3, 0, 3, 6, 9, 12 e 15 pi. A detecção de anticorpos foi realizada no soro em intervalos de 7 dias até o dia 42 pi. Após a inoculação não foram observados sinais clínicos evidentes, apenas secreção nasal e ocular serosa entre os dias 1 e 5 pi e tosse discreta entre os dias 2 e 4 pi. A temperatura corporal teve um leve aumento entre os dias 4 e 6 pi. O animal controle não desenvolveu nenhum dos sinais observados no grupo infectado. A detecção viral no sangue revelou a presença de viremia entre os dias 4 e 8 pi e nas secreções nasais entre os dias 1 até 10 pi. O vírus não foi isolado no sangue e secreção nasal do animal contato, demonstrando ausência da transmissão. Nos animais inoculados observou-se uma redução na contagem total de leucócitos entre os dias 3 e 12 dpi. Anticorpos neutralizantes foram detectados inicialmente no dia 14 pi em todos os animais inoculados e permaneceram até o dia 42 pi. A detecção de anticorpos anti-p80 não-estrutural ocorreu em dois animais no dia 14 pi e no dia 42 pi todos os animais soroconverteram. O animal controle não desenvolveu anticorpos em nenhum momento. Assim sendo, conclui-se que a amostra de BVDV utilizada na infecção experimental possui baixa patogenicidade e reduzida capacidade de transmissibilidade para os animais em contato. Desta forma, a disseminação da infecção pode ocorrer na população bovina de forma discreta e de difícil percepção. / The bovine viral diarrhea virus (BVDV) is considered an important pathogen of cattle and are widespread in the Brazilian herd. Transmission of the virus occurs by direct and indirect contact between infected and susceptible animals, and the persistently infected animals are essential in the maintenance of virus in the herd. The experimental reproduction of infection allows the study of clinical and viral parameters as well as setting parameters for diagnostic testing of vaccines and the determination of control measures. In order to study the pathogenicity of a sample of Brazilian BVDV-1a 241.10 four cattle were inoculated intranasally with a viral suspension containing 107.2 TCID50 / ml. One non-inoculated cattle was kept in contact with the inoculated cattle to assess the transmissibility. After inoculation, the animals were monitored daily to observe clinical signs. Samples of nasal secretions were collected on days -3 to 15 post-inoculation (pi) and blood on days -2, 0, 2, 4, 6, 8, 10, 12 and 14 pi for detection of viral presence by isolation in cell culture. The total leukocyte count was performed at different moments on days -3, 0, 3, 6, 9, 12, and 15 pi. The detection of antibodies was performed in serum at 7 day intervals until the 42 day post-inoculation. After inoculation no clinical signs were observed, only nasal and ocular serous secretion between days 1 and 5 pi and discreet cough between day 2 and 4 pi. Body temperature increased slightly between day 4 and 6 pi. Animal Control did not develop any of the signs observed in the infected group. The viral detection in the blood showed the presence of viremia between 4 and 8 days pi and nasal secretions between day 1 up to 10 pi. Virus was not isolated in the blood and nasal secretions of the animal contact, demonstrating the absence of transmission. In animals inoculated it was observed there was a reduction in total leukocyte count between day 3 up to 12 dpi. Neutralizing antibodies initially were detected on day 14 pi in all inoculated animals and remained until day 42 post-inoculation. The detection of anti-p80 antibodies occurred in two animals on day 14 post-inoculation and on day 42 post-inoculation all animals seroconverted. Animal Control did not develop antibodies at any moment. Therefore, it is concluded that the BVDV sample used for infection has low pathogenicity and reduced capacity of transmissibility for animal contact. Thus, the spread of infection can occur in the cattle population in a discreetly way and difficult perception.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:07:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carla_Yoko.pdf: 407649 bytes, checksum: 0233373b055e117aa382c307194d5d0e (MD5) Previous issue date: 2008-08-28 / This study was divided into two experiments, referring to incubation and early phase. The incubation experiment had as principal aims evaluated incubation yield, the capacity to penetrate through the eggshell and the ability to colonize the gastrointestinal tract. Four hundred fertilized turkey eggs for BUT9 strain were distributed in four treatments: CCS and CCM (inoculation of placebo in eggshell and air cell, respectively); ICS and ICM (inoculation with 4,2 X 104 UFC/mL of Salmonella enterica subspecies enterica sorovar Enteritidis in eggshell and air cell, respectively). Incubation parameters calculated were: fertility, total hatchability, hatchability of fertile eggs and poult yield. Salmonella was examined in eggshell, inner and outer membranes, albumen/yolk, embryo and, after hatched, in meconium in all poult. Qualitative results were analyzed by qui-square test. It was verified that the agent maintained feasible in eggshell during the hole incubation and migrated to egg components. Incubation parameters were not affected by the pathogen inoculated in eggshell. It was also observed that Salmonella Enteritidis inoculated in air cell determined early embryo mortality, while the control treatment influenced the mortality periods in relation with CCS. The intestinal colonization of Salmonella occurred in poults derived from eggshell experimental inoculation. In the second experiment, 135 poults derived from inoculation through eggshell and drinking water were evaluated by the effects of Salmonella Enteritidis to colonize the gastrointestinal tract, determine systemic infection, hurt the intestinal integrity and change the performance variables. At 10, 20 and 28 days, turkeys and feed were weighted to constitute calculation of performance variables. After weighage, five turkeys from each treatment were necropsied to obtain datas of weight and bacterial isolation of intestine, liver, spleen and heart. Qui-square test was employed to qualitative variables and the Anova procedure to quantitative variables and average compared by Tukey test (5%). The intestinal colonization increase significantly during early phase in treatment inoculate through eggshell, but none in treatment inoculated in drinking water. The intestine showed maximum development at 10 days and higher weight at first, 10th and 28th when Salmonella was present. The digestive and absorptive capacity was impaired in infected birds. Salmonella was capable of colonized gastrointestinal tract and established systemic infection. Mortality rate was high during first week of age, with less clinical signs or anatomopathological lesions / O presente estudo foi dividido em dois experimentos, referentes ao período de incubação e fase inicial. O estudo de incubação teve como objetivo avaliar o rendimento de incubação, a capacidade de penetração de Salmonella Enteritidis através da casca do ovo e a habilidade de colonização do trato gastrintestinal. Foram incubados 400 ovos embrionados de perus da linhagem BUT9, distribuídos em quatro tratamentos: CCS e CCM (inoculação com placebo na casca e na câmara de ar, respectivamente); ICS e ICM (inoculação com 4,2 X 104 UFC/mL de Salmonella enterica subespécie enterica sorovar Enteritidis na casca e na câmara de ar, respectivamente). Os parâmetros de incubação calculados foram: fertilidade, eclodibilidade total e de ovos férteis, rendimento de peruzinhos. Salmonella foi pesquisada na casca, membrana, albume/gema, embrião e ao nascimento no mecônio de todas as aves. As respostas qualitativas foram analisadas pelo teste do qui-quadrado (2). Constatou-se que o agente manteve-se viável na casca durante todo o período de incubação e migrou para o interior dos ovos nos tratamentos inoculados. Os parâmetros de incubação não foram afetados quando o patógeno foi inoculado na casca. Constatou-se também que a Salmonella Enteritidis inoculada na câmara de ar determinou mortalidade embrionária precoce, enquanto o tratamento controle (CCM) influenciou os períodos de mortalidade em relação ao CCS. A colonização intestinal pelo patógeno ocorreu em peruzinhos oriundos da inoculação experimental na casca. No segundo experimento, 135 perus de corte de um dia oriundos de inoculação via casca e via água de bebida foram avaliados quanto aos efeitos de Salmonella Enteritidis de colonizar o trato gastrintestinal, determinar infecção sistêmica, lesionar a integridade intestinal e alterar as variáveis de desempenho. Aos 10, 20 e 28 dias, as aves e a ração foram pesadas para constituir o cálculo das variáveis de desempenho. Após a pesagem, cinco aves de cada tratamento foram necropsiadas para obter os dados de peso e isolamento bacteriano do intestino, fígado, baço e coração. Foi empregado o teste do qui-quadrado para as variáveis qualitativas e o procedimento Anova Geral para as quantitativas, sendo as médias comparadas pelo teste de Tukey (5%). A colonização intestinal aumentou significativamente no tratamento inoculado na casca, mas não no tratamento inoculado na água de bebida. O intestino apresentou máximo desenvolvimento aos 10 dias e maior peso ao primeiro, décimo e 28º dias quando Salmonella esteve presente. Salmonella foi capaz de colonizar o trato gastrintestinal e estabelecer infecção sistêmica. A taxa de mortalidade esteve alta durante a primeira semana de idade, com discretos sinais clínicos ou lesões anatomopatológicas