Tese de mestrado integrado. Engenharia Civil (especialização em Construções Civis). Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto. 2008

Submitted by Inácio de Oliveira Lima Neto (inacio.neto@inpa.gov.br) on 2018-05-18T19:52:56Z No. of bitstreams: 2 Gabriel Stefanelli.pdf: 634762 bytes, checksum: 752dfdcce1803083a137f048c2bcb0af (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-18T19:52:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Gabriel Stefanelli.pdf: 634762 bytes, checksum: 752dfdcce1803083a137f048c2bcb0af (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-04-12 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Following Alfred Russel Wallace, Amazonian freshwaters have been classified into three main types: black, white and clear. Adaptation to water types has been demonstrated to affect gene flow, making it an important source for diversification of the Amazonian fish fauna. However, this classification focuses on large rivers and fails to acknowledge the importance of small forest streams that flow through non-flooded forest, known as igarapés. As compared to large river channels, igarapés cover a much greater area than the Amazon River and have a distinct hydrochemistry, mostly due to soil and vegetation. We assessed the importance of water type on habitat choice and spawning in Crenuchus spilurus, a small fish that inhabits igarapés inserted within blackwater and whitewater river basins. Lineages from the Rio Negro (blackwater) and Amazon River (whitewater) basins showed active selection of igarapé water in habitat choice trials and had greater spawning success in igarapé water when compared to water from their respective flooded forest basin. Due to the hydrochemical conditions of igarapés acting to shape reproduction and behavior of C. spilurus, our results expand Wallace’s intuition that water types influence diversity by providing evidence that igarapés represent an important habitat driving adaptation in Amazonian fishes. / Alfred Russel Wallace classificou as águas amazônicas em três: preta, branca e clara. Tem sido demonstrado que a adaptação a esses tipos d’água afeta o fluxo gênico, gerando uma importante fonte de diversificação para os peixes da Amazônia. Contudo, essa classificação é focada em grandes rios e não leva em consideração os pequenos cursos de água que permeiam a floresta de terra firme, conhecidos como igarapés. Comparados aos canais dos grandes rios, os igarapés cobrem uma área muito maior que a do Rio Amazonas e apresentam sua própria hidroquímica, principalmente devido à sua distinta composição florística. Nós avaliamos a importância da hidroquímica na escolha de habitat e na desova em Crenuchus spilurus, um pequeno peixe que habita igarapés inseridos em bacias de água preta e branca. Linhagens do Rio Negro (água preta) e Rio Amazonas (água branca) mostraram seleção ativa de água de igarapé e apresentaram sucesso de desova maior em água de igarapé quando comparado à água de floresta inundada. Devido ao papel das condições hidroquímicas de igarapé em moldar reprodução e comportamento, nossos resultados expandem as ideias de Wallace de que os tipos de água influenciam a diversidade, fornecendo evidência que igarapés representam um importante habitat mediando adaptação em peixes amazônicos.

Tese de mestrado. Construção de edifícios. 2006. Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto

Dissertação apresentada para obtenção do grau de Mestre em Construção de Edifícios, na Faculdade de Engenharia da Universidade do Porto, sob a orientação do Prof. Doutor Eduardo Maldonado

Dissertação apresentada para obtenção do grau de Doutora em "Doctorado Europeu", no Departamento de Física Fundamental y Experimental, Electrónica y Sistemas da Universidad de La Laguna, sob a orientação na FEUP do Doutor Armando Carlos Figueiredo Coelho de Oliveira, e na Universidad de La Laguna da Doutora Lourdes Garcia Rodriguez

O CD-ROM acompanhante de 1 dos exemplares, encontra-se no armário do piso -1 / Tese de doutoramento. Doutoramento em Engenharia Civil. Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto. 2007

Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. / Made available in DSpace on 2012-10-17T14:11:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-25T17:04:02Z : No. of bitstreams: 1 161343.pdf: 2642397 bytes, checksum: ed9ef0c641ab8aeaac57a86d68655cea (MD5) / Através de desenvolvimento analítico baseado nas equações de Maxwell, propõe-se critérios

Moreira, C. G. Isolamento, purificação e caracterização físico-química parcial de uma lectina presente em sementes de Andira sp. 2013. 56 f. Dissertação (mestrado em Biotecnologia)Campus de Sobral, Universidade Federal do Ceará, Sobral, 2013. / Submitted by Djeanne Costa (djeannecosta@gmail.com) on 2016-06-15T15:45:56Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_cgmoreira.pdf: 1843502 bytes, checksum: ab574e3231ba9a51db6e77eb9462d755 (MD5) / Approved for entry into archive by Djeanne Costa (djeannecosta@gmail.com) on 2016-06-15T15:47:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_cgmoreira.pdf: 1843502 bytes, checksum: ab574e3231ba9a51db6e77eb9462d755 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-15T15:47:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_cgmoreira.pdf: 1843502 bytes, checksum: ab574e3231ba9a51db6e77eb9462d755 (MD5) Previous issue date: 2013 / Lectins are ubiquitous proteins in nature, of non-immune origin, which have at least one non-catalytic domain that binds carbohydrates specifically and reversibly. They can be found in vegetables leaves, stems and seeds. The Dalbergieae tribe has lectins which have specificity for different carbohydrates and also have several biological activities such as induction of rat paw edema, release of chemotactic mediators by macrophages, vasorelaxant effect in rat aortas, and others. This study aimed to isolate, purify and physiochemically characterize a lectin found in seeds of Andira pisonis (Dalbergieae tribe). Andira pisonis seeds were ground into a fine powder and subjected to total protein extraction in 1 M ammonium sulfate. Soluble proteins were subjected to hemagglutination activity, quantification by the Bradford method and essays of hemagglutination inibition activity by sugar. The lectin from Andira pisonis (APL) was purified by affinity chromatography on Sepharose- Mannose matrix eluted in 0.1 M glycine buffer pH 2.6 with 0.15 M NaCl. The eluted fraction was dialyzed against distilled water, lyophilized and subjected to ion exchange chromatography on HiTrap SP XL 01. APL was eluted on 20 mM sodium acetate buffer pH 4.5 gradient of 0-1M NaCl. APL hemagglutinated rabbit erythrocytes (enzymatically treated) and other lectins from the tribe Dalbergieae and showed specificity for mannose (25 mM). SDS-PAGE analysis showed that APL is composed of a major 34 kDa double band and a minor 8 and 9 kDa double band. APL showed thermostability at 60° C. Further studies are required in order to better physicochemically characterize this protein. / Lectinas são proteínas ubíquas na natureza, de origem não imune, que possuem ao menos um domínio não catalítico que se liga de forma específica e reversível a carboidratos. Em vegetais estão distribuídas em folhas, caules e sementes. A tribo Dalbergieae apresenta lectinas que mostram especificidade por diferentes carboidratos e apresentam atividades biológicas diversas como indução de edema em pata de rato, liberação de mediadores quimiotáticos por macrófagos, atividade vasorelaxante em aortas de ratos, dentre outras. Este trabalho teve como objetivo isolar, purificar e caracterizar físico-quimicamente uma lectina presente em sementes de Andira pisonis (tribo Dalbergieae). Sementes de Andira pisonis foram trituradas até obtenção de fino pó e as proteínas totais foram extraídas em sulfato de amônio 1M. As proteínas solúveis foram submetidas a atividade hemaglutinante, quantificação pelo método de Bradford e ensaios de inibição da atividade hemaglutinante. A lectina de sementes de Andira pisonis (APL) foi purificada através de cromatografia de afinidade em matriz de Sepharose-Manose, eluída em tampão glicina 0,1M pH 2,6 com NaCl 0,15M. A fração eluída foi dialisada contra água destilada, liofilizada e submetida a cromatografia de troca iônica em HiTrap SP XL 01. APL foi eluída com tampão acetato de sódio 20mM pH 4,5 em gradiente de NaCl 0-1M. APL hemaglutinou eritrócitos de coelho (tratados enzimaticamente), assim como outras lectinas da tribo Dalbergieae e apresentou especificidade por manose (25mM). Análise em PAGE-SDS mostrou que APL é composta por uma banda de 34 kDA e uma dupla banda de 8 e 9 kDA. APL apresentou termoestabilidade até 60°C. São necessários mais estudos de caracterização físico-química para melhor caracterizar esta proteína.

Made available in DSpace on 2016-08-29T15:34:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_5885_.pdf: 3244352 bytes, checksum: e5fafdb73fe28c45324cf21dd7acb640 (MD5) Previous issue date: 2012-08-28 / O gênero Acanthamoeba compreende protozoários anfizóicos que estão presentes nos mais diversos ambientes, podendo causar no homem doenças graves, como a ceratite amebiana e a encefalite amebiana granulomatosa. A sua patogenicidade não é inteiramente conhecida, assim como os fatores que determinam a infecção. Para isso, marcadores vêm sendo investigados na tentativa de mensurar a virulência de linhagens dessa ameba. Com o objetivo de esclarecer alguns aspectos biológicos e moleculares de Acanthamoeba, isolados clínicos e ambientais foram obtidos e caracterizados por análise morfológica, molecular e testes de patogenicidade. Foram coletadas amostras de raspado de córnea de pacientes com suspeita de ceratite amebiana e amostras ambientais provenientes de poeira, solo, piscina, água tratada, água do mar e água de inundação, em Vitória e região metropolitana (ES). Todas as amostras foram cultivadas em meio ágar soja. Além da cultura, as amostras de raspado de córnea também foram coletadas em salina de Page e submetidas a uma reação de semi-nested PCR. Culturas positivas para Acanthamoeba, identificadas com base na morfologia dos cistos e trofozoítos, foram selecionadas, clonadas e classificadas nos grupos morfológicos I, II ou III. Para a confirmação do gênero Acanthamoeba dos clones foi realizada PCR com iniciadores gênero-específicos do gene 18S rDNA. A genotipagem dos isolados foi realizada a partir do sequenciamento parcial deste mesmo gene e o potencial patogênico dos isolados clonados foi avaliado por meio de testes de termotolerância e de osmotolerância. Foram coletadas em ágar 90 amostras ambientais, 16 de raspado de córnea e 9 de lentes de contato (LC). Destas, 37 (32 ambientais, 4 clínicas e 1 de LC) foram positivas para Acanthamoeba, sendo obtidos 28 clones (24 ambientais, 3 clínicos e 1 de LC). Desses, 26 apresentaram características morfológicas do grupo II, um do grupo I (solo) e um não foi classificado de acordo com os parâmetros morfológicas de classificação. A PCR confirmou a identificação genérica de todos os isolados obtidos, sendo que os clínicos, o de LC e a maioria dos ambientais sequenciados foram classificados como pertencentes ao genótipo T4. Dentre os isolados ambientais, dois foram agrupados no genótipo T11 (piscina) e um no T1 (poeira). A partir dos testes de termotolerância e de osmotolerância, todos os isolados clonados, clínicos e ambientais, foram considerados potencialmente patogênicos, pois, embora o crescimento à concentração de 1M de manitol não tenha sido observado em todos os isolados, todos cresceram a 37°C. Os resultados deste estudo pioneiro no Espírito Santo confirmam a predominância do grupo morfológico II e do genótipo T4 em isolados clínicos e ambientais de Acanthamoeba e relata no Brasil o isolamento de Acanthamoeba pertencente ao genótipo T1. Este trabalho demonstra também a presença de isolados potencialmente patogênicos no ambiente, inclusive em amostras de água do mar e de água de inundação, o que pode representar um fator de risco para o desenvolvimento de infecções causadas por Acanthamoeba. Além disso, a metodologia utilizada neste estudo poderá ser utilizada para um diagnóstico mais rápido, sensível e específico de ceratite por Acanthamoeba. PALAVRAS CHAVES: Acanthamoeba, isolamento, genotipagem, termotolerância, osmotolerância.

Resumo: Estudou-se a ocorrência do protozoário Toxoplasma gondii em 70 amostras de linguiças suínas tipo frescal, comercializadas no município de Botucatu-SP, a fim de avaliar a participação deste alimento na cadeia epidemiológica da toxoplasmose. Para tanto, utilizou-se a técnica de isolamento do agente em camundongos e a amplificação do material genético pela reação em cadeia pela polimerase (PCR). Esta última foi realizada com amostras digeridas e não digeridas pela pepsina. Não se isolou o parasita de nenhuma amostra estudada, entretanto, 33 amostras (47,14%) apresentaram resultado positivo à PCR. Para as amostras submetidas à digestão péptica, 21 (30,0%) mostraram-se positivas e para aquelas que não sofreram este tratamento, 25 (35,71%) reagiram positivamente. Não houve diferença significativa entre os dois tratamentos. Os resultados obtidos indicam que a linguiça suína frescal provavelmente tem pouca importância como fonte de infecção para a toxoplasmose humana, na região estudada. No entanto, o elevado índice de amostras positivas na reação de PCR demonstra que o parasita pode estar presente, porém é inviabilizado pela ação do sal adicionado ao tempero das linguiças. Palavras-chave: Toxoplasma, linguiça, PCR, isolamento. / Abstract: Occurrence of the protozoan Toxoplasma gondii was studied in 70 samples of fresh swine sausages commercialized in the city of Botucatu-SP, to evaluate the importance of this kind of food in toxoplasmosis epidemiology. For that, it was proceeded the agent isolation in mice and the polymerase chain reaction (PCR) to amplify the genetic material. The PCR was made with digested samples and no digested by pepsin. The parasite wasn't isolated from any sample, however, 33 (47.14%) samples were positive to the PCR. From digested samples, 21 (30.00%) were positives and from no digested samples 25 (35.71%) showed positives. There wasn't significant difference between the two treatments. Results indicate that swine sausages probably have a little importance as infection source of human toxoplasmosis in the studied region. Nevertheless, the high amount of PCR positives samples show that the parasite may be present, but it is inactivated by the salt added to sausages seasoning. Key words: Toxoplasma, sausage, PCR, isolation. / Orientador: Paulo Francisco Domingues / Coorientador: Helio Langoni / Mestre