Thèse (M.Sc.)--Université Laval, 2009. / Bibliogr.: f. 80-85. Publié aussi en version électronique dans la Collection Mémoires et thèses électroniques.

La réaction inflammatoire est un processus étroitement régulé qui assure, en partie, la défense de l'hôte contre les pathogènes. Le neutrophile y joue un rôle crucial puisqu'il participe activement à l'élimination des pathogènes par la phagocytose et la libération de médiateurs antimicrobiens. De plus, le neutrophile produit des médiateurs lipidiques dérivés de l'acide arachidonique (AA) comme le leucotriène (LT) B4, qui recrute et active d'autres leucocytes. Des études ont suggéré que les endocannabinoïdes modulent l'activation des neutrophiles sans toutefois identifier les mécanismes impliqués. Le système des endocannabinoïdes est complexe. L'activation de trois récepteurs induit leurs effets immunomodulateurs. Également, le métabolisme des endocannabinoïdes peut mener à la formation d'autres lipides bioactifs. Ils peuvent être directement transformés ou hydrolyses en AA, qui est le précurseur des éicosanoïdes, une importante famille de médiateurs lipidiques bioactifs. Conséquemment, les travaux effectués dans cette thèse avaient pour but de définir les effets des endocannabinoïdes et de leurs metabolites sur l'activation des neutrophiles. Nous avons déterminé que l'endocannabinoïde 2-arachidonoyl-glycérol (2-AG) active plusieurs fonctions des neutrophiles comme la biosynthèse de LTB4 et la dégranulation. Ces effets ne dépendent pas de l'activation des récepteurs des cannabinoïdes, mais de l'activation du récepteur du LTB4. En effet, nous avons démontré que le neutrophile transforme l'AA provenant du métabolisme du 2-AG en LTB4. Ce dernier active par la suite le neutrophile par une boucle d'amplification autocrine. Afin d'identifier des fonctions susceptibles d'avoir une incidence physiologique, nous avons ensuite investigué les effets du 2-AG sur les fonctions des neutrophiles reliées à la défense de l'hôte. Nous avons démontré que le 2-AG, à des concentrations physiologiques, induit la libération de protéines antimicrobiennes par le neutrophile. Le mécanisme impliqué dans cet effet est similaire à celui rapporté auparavant. Ces travaux contribuent ainsi significativement à augmenter les connaissances concernant le rôle des endocannabinoïdes dans l'activation des neutrophiles. Puisque nous avons identifié des effets survenant à des concentrations physiologiques, nos données pourraient refléter un rôle in vivo des endocannabinoïdes dans la défense de l'hôte.

L'adénosine, la PGE2 ou l'AMP cyclique intracellulaire mènent toutes à des actions antiinflammatoires chez le neutrophile en inhibant par exemple la phagocytose, la production d'ions superoxydes, l'adhésion et la libération de cytokines. Par contre, les mécanismes moléculaires régulant ces actions anti-inflammatoires ne sont pas bien connus. Dans cette étude, nous avons étudié l'impact que ces agents ont sur le profil d'expression des gènes du neutrophile. L'expression génique a été étudiée par Genechip puis les résultats obtenus ont été validés par la technique du peR en temps réel. Avec cette approche, une quinzaine de gènes dont l'expression était altérée par ces agents ont été identifiés. Remarquablement, les trois agents utilisés ont eu un impact fort similaire sur le profil d'expression, suggérant un mécanisme commun permettant de limiter l'activation cellulaire. Nous avons donc identifié lors de ce projet un ensemble de gènes qui peuvent constituer d'importants signaux d'arrêt de l'activation du neutrophile.

Le rôle des neutrophiles dans la réponse immunitaire innée est bien connu. Ils résident dans le sang et ont une durée de vie limitée à quelques heures. Suite à une infection, ils quittent le flux sanguin et se dirigent vers les sites inflammatoires en réponse à des chimiokines produites par des cellules endothéliales et des fibroblastes. Au niveau du site d’inflammation, les neutrophiles phagocytent et éliminent les pathogènes extracellulaires, et produisent des cytokines inflammatoires. Des travaux récents montrent que les neutrophiles peuvent également jouer un rôle dans l’immunité adaptative. En effet, ils ont la capacité de transporter des antigènes vers les ganglions lymphatiques, d’induire la différenciation des lymphocytes et d’influencer la réponse immune adaptative par la production de cytokines. La fonction des neutrophiles dans l’induction et/ou la régulation de la réponse adaptative requiert l’interaction entre ceux-ci et d’autres populations cellulaires, telles que les cellules dendritiques et les lymphocytes. Nous avons donc examiné la localisation des neutrophiles au niveau de la rate dans des conditions basales ou inflammatoires. D’une manière générale, nos résultats montrent que, en cas d’infection, les neutrophiles migrent vers la pulpe blanche de la rate et se localisent en contact étroit avec les lymphocytes T. Ce phénomène de migration est dépendant des molécules CD14 et MyD88 et corrèle avec l’augmentation de l’expression des chimiokines CXCL1 et 2, ainsi qu’avec la diminution de l’expression du récepteur CXCR2 à la surface des neutrophiles. Cependant, au niveau de la cavité péritonéale, le recrutement des neutrophiles est augmenté en absence de la molécule CD14. Nos résultats montrent que la migration des neutrophiles, dans les organes lymphoïdes et non lymphoïdes, est dirigée par des mécanismes différents.

Thèse--Méd.--Paris 7, C.H.U. Bichat-Beaujon, 1974. N°: 54. / Bibliogr. p. 101-106.

Thèse (M.Sc)--Université Laval, 2008. / Bibliogr.: f. [80]-88. Publié aussi en version électronique dans la Collection Mémoires et thèses électroniques.

Thèse (Ph. D.)--Université Laval, 2003. / Bibliogr.: f. [241]-283. Publié aussi en version électronique.

Thèse (M.Sc.) -- Université Laval, 1997. / Bibliogr.: f. 54-64. Publié aussi en version électronique.

Thèse (M.Sc.)--Université Laval, 2001. / Bibliogr.: f. 68-103. Publié aussi en version électronique.

Le chitosan est un polysaccharide linéaire dérivé de la chitine formé de monomères de glucosamine et de N-acétyl-D-glucosamine. Utilisé comme implant dans un nouveau modèle de régénération du cartilage qui est basé sur la technique de la microfracture, ce biopolymère induit un recrutement massif des neutrophiles humains (PMN) en plus d'améliorer significativement la réparation du cartilage hyalin par rapport aux autres techniques actuellement utilisées en médecine régénérative. Ce projet de maîtrise avait pour objectif premier de définir le phénotype des PMN en présence de chitosan 80M. une préparation déacétylée à 80% qui est utilisée dans le modèle de régénération présenté. Puisque le degré de déacétylation est une caractéristique structurelle importante qui confère en partie au chitosan ses effets biologiques, deux préparations de chitosan ont été utilisées afin de comparer les phénotypes obtenus (80M et 95M). L'étude a démontré que le chitosan 80M est chimiotactique pour les PMN contrairement au chitosan 95M. De plus, les PMN ne produisent pas de réactifs toxiques de l'oxygène et ne libèrent pas le contenu de leurs granules en présence de chitosan, contrairement aux agonistes classiques tels que le fMLP ou le LPS. Ces résultats suggèrent que le chitosan aurait un effet positif sur les PMN en empêchant ces cellules d'être néfastes suite à l'utilisation de leurs armes antimicrobiennes, ce qui permettrait ainsi d'avoir une meilleure réparation du cartilage.