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Frequência de anticorpos contra toxoplasma gondii em rebanhos ovinos com aptidão leiteira e detecção do agente em amostras de leite da mesorregião oeste de Santa Catarina / Frequency of antibodies against Toxoplasma gondii in sheep herds with milk aptitude and detection of the agent in milk samples from west mesoregion of Santa catarina

Ossani, Renata Arruda 07 November 2014 (has links)
Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCA14MA154.pdf: 1313169 bytes, checksum: 4095d82961e0759ed84999755c5e444b (MD5) Previous issue date: 2014-11-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Ovine toxoplasmosis has important implications by causing reproductive disorders in this species and for being a zoonosis. This study aimed to determine the occurrence of antibodies against Toxoplasma gondii and to detect the agent in the dairy sheep flocks in western of state of Santa Catarina. From March to July 2013, 298 blood samples were collected from dairy sheep on two farms in Chapecó, SC. Samples were processed by IFI (≥1: 64). From the total, 37 (12.4%) were positive for T. gondii with titers of 1:64 (32) and 1: 256 (five). For the animals selection, which were studied looking for the presence of the agent in the milk, 128 blood samples from sheep in lactation period were collected, which were processed by IFI (≥1: 64) of which 42 (32.8%) were positive, with titers 1:64, (26) 1 256 (12), 1: 1024 (three) and 1: 4096 (one). For the detection of parasites in milk, techniques of mouse bioassay were employed (22 milk samples from eight sheep with antibody titers against T. gondii ≥256) and PCR, for the detection of T. gondii in the brains of mice inoculated bioassay and also directly from milk (108 samples from 42 seropositive sheep (≥64) in different lactation periods - 40, 90 and 120 days). SAG2R4 SAG2F4 primers were used. In 42 ewes in lactation period and seropositive for T. gondii it was possible to detect DNA of the parasite in the milk of 30.95% (13/42) of the animals. The isolation was impossible in bioassay, however the agent DNA was detected in mice brains inoculated with milk from eight sheep (a sample of the 45th day of lactation and seven in the collection of 90th day). The parasite DNA was detected directly from the milk in samples of the second collection (90 days of lactation) in five animals. Positive PCR samples were sequenced and the results confirmed ≥97% identity with the membrane antigen P22 gene of T. gondii. The results showed that the occurrence of antibodies against T. gondii in dairy sheep in western of state of Santa Catarina is lower when compared with that observed in steak sheep in the state and that the DNA of T. gondii is present in the milk of sheep, representing a possible source of infection to humans through the consumption of milk "in natura" and / or derivatives, besides the possibility of lactogenic transmission to lambs / A toxoplasmose ovina apresenta implicações sanitárias importantes por causar desordens reprodutivas nesta espécie e por ser uma zoonose. Os objetivos do presente trabalho foram determinar a ocorrência de anticorpos contra Toxoplasma gondii e detectar o agente no leite de rebanhos ovinos leiteiros na região Oeste de Santa Catarina. De março a julho de 2013, foram colhidas 298 amostras de sangue de ovinos leiteiros em duas propriedades em Chapecó, SC. As amostras foram processadas pela RIFI (≥1:64). Do total, 37 (12,4%) foram positivas para T. gondii com títulos de 1:64 (32) e 1:256 (cinco). Para a pesquisa da presença do agente no leite, foram coletadas 128 amostras de sangue das ovelhas em período de lactação, que foram processadas pela RIFI (≥1:64) das quais 42 (32,8%) foram positivas, com títulos 1:64 (26), 1:256 (12), 1:1024 (três) e 1:4096 (um). Para a pesquisa do parasito no leite foram empregadas as técnicas do bioensaio em camundongos (22 amostras de leite de oito ovelhas com títulos de anticorpos contra T. gondii ≥256) e da PCR, para a 12 13 pesquisa de T. gondii nos cérebros dos camundongos inoculados no bioensaio e também diretamente do leite (108 amostras obtidas de 42 ovelhas soropositivas (≥64) em diferentes períodos de lactação - 40, 90 e 120 dias). Foram utilizados os primers SAG2R4 e SAG2F4. Das 42 ovelhas lactantes e soropositivas para T. gondii foi possível detectar DNA do parasito no leite de 30,95% (13/42) dos animais. No bioensaio não foi possível o isolamento, entretanto DNA do agente foi detectado no cérebro dos camundongos inoculados com leite de oito ovelhas (uma amostra do 45º dia de lactação e sete na coleta do dia 90). Diretamente do leite, DNA do parasito foi detectado em amostras da segunda coleta (90 dias de lactação) em cinco animais. As amostras positivas na PCR foram sequenciadas e os resultados confirmaram identidade ≥97% com o antígeno de membrana gene P22 de T. gondii. Verificou-se que a ocorrência de anticorpos contra T. gondii em ovinos com aptidão leiteira, do Oeste de Santa Catarina é menor quando comparada com a observada em ovinos de corte no Estado e que o DNA de T. gondii está presente no leite de ovelhas, representando uma possível via de transmissão para o ser humano, por meio do consumo do leite in natura e/ou derivados, além da possibilidade da transmissão via lactogênica para cordeiros

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