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Identificación de formas meleculares de NGAL en condiciones desnaturalizantes/reductoras, en saliva parotídea de pacientes afectados por parotiditis crónica recurrente infantilSurot Madrid, Lorena Francisca January 2012 (has links)
Trabajo de Investigación
Requisito para optar al Título de
Cirujano Dentista / La Parotiditis Crónica Recurrente Infantil (PCRI) es una inflamación
recurrente y dolorosa, de etiología desconocida. Generalmente, se inicia alrededor
de los 3 años de edad y se mantiene hasta la adolescencia. Estudios anteriores
han demostrado, mediante zimografía, la presencia de metaloproteasas de matriz
(MMPs) 2 y 9 en la saliva parotídea de pacientes con PCRI. Mediante la técnica de
western-blot, se ha detectado con mayor frecuencia la presencia de formas
moleculares de MMP-9 de 169 kDa y 139 kDa. Así mismo, mediante zimografía se
detectó una metaloproteasa de 141 kDa. En ambos casos las bandas fueron más
frecuentes en saliva proveniente de glándulas comprometidas clínicamente en
relación a las no afectadas de pacientes con PCRI. En estudios posteriores se
observó que en la saliva parotídea proveniente de glándulas afectadas
clínicamente por PCRI, en relación a saliva proveniente de glándulas no afectadas
clínicamente de los mismos pacientes, se presentó mayoritariamente el complejo
molecular de MMP-9 de 141 kDa. Tanto la banda de 141 kDa como la de 139 kDa
podrían corresponder a la unión MMP-9/NGAL (Lipocalina de Neutrófilo asociada
a Gelatinasa B) ya que se encuentran cercanas al rango de 125-130 kDa con el
que se ha descrito a ese complejo en diversos estudios.
En este estudio se propuso analizar, la presencia de bandas de NGAL en la
saliva parotídea bilateral de pacientes con PCRI.
En 33 pacientes con PCRI unilateral o bilateral, de entre 6 a 14 años de
edad, se recolectó saliva parotídea bilateral y se determinó la presencia de NGAL
mediante la técnica de western-blot. Se registró el compromiso clínico de ambas
glándulas parótidas como: glándulas clínicamente afectadas y no afectadas. Se
determinó la frecuencia de NGAL salival, en relación al compromiso clínico de la
glándula.
La saliva parotídea de pacientes con PCRI, analizada en condiciones no
reductoras presentó 7 bandas correspondientes a NGAL, en tanto que, en
condiciones reductoras se encontraron 5 bandas correspondientes a NGAL.
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La saliva parotídea proveniente de glándulas clínicamente comprometidas y
de glándulas sin compromiso clínico de pacientes con PCRI, analizada en
condiciones no reductoras, no presentó diferencias en la frecuencia de las bandas
encontradas en estas condiciones.
La saliva parotídea proveniente de glándulas clínicamente comprometidas
de pacientes con PCRI, analizada en condiciones reductoras, presentó con mayor
frecuencia las bandas correspondientes a NGAL de los tamaños moleculares: 75,
37 y 25 kDa, al compararla con la saliva parotídea proveniente de glándulas no
comprometidas clínicamente.
Los resultados de este estudio, sugieren que NGAL podría estar
involucrada en la etiopatogénesis de PCRI y pueden contribuir al esclarecimiento
de este proceso patológico. Así mismo, la presencia de NGAL en la saliva
parotídea de glándulas sin compromiso clínico de aumento de volumen, sugiere un
cuadro glandular subclínico de la enfermedad.
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Identificación de complejos meleculares de MMP9/NGAL en saliva parotídea de pacientes afectados por parotiditis crónica recurrente infantilPacheco Oñate, Nicolás Alejandro January 2012 (has links)
Trabajo de Investigación
Requisito para optar al Título de
Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto complete de su tesis en el programa de tesis Electrónicas / La parotiditis crónica recurrente infantil (PCRI) es una enfermedad inflamatoria de origen desconocido definida como la inflamación de la glándula parótida asociada a dilatación de los ductos interlobulares no obstructiva, caracterizada por períodos recurrentes de parotidomegalia inflamatoria dolorosa de días, semanas o meses de duración, usualmente con compromiso del estado general. Se inicia en la infancia y se mantiene hasta la adolescencia. Después de la pubertad los síntomas se atenúan pudiendo desaparecer sin causa aparente, aunque en algunos casos persiste hasta la edad adulta. Actualmente no existe consenso para el tratamiento de esta enfermedad, enfocándose principalmente al tratamiento sintomático.
El diagnóstico de PCRI es clínico-sialográfico y el estudio de su patogénesis se ve dificultada por el alto riesgo que implica la biopsia del tejido parotídeo por su relación anatómica con el nervio facial.
Se han descrito alteraciones en la composición del contenido proteico de la saliva parotídea en PCRI, dentro de las cuales llaman la atención las metaloproteinasas de la matriz extracelular (MMP’s), en particular MMP-9 de tamaño molecular de 140 kDa que pudiese corresponder un complejo con la lipocalina de neutrófilo asociada a gelatinasa 2 (NGAL)
En este estudio se analizó el producto de secreción glandular, la saliva parotídea, mediante la técnica de Western blot en busca de complejos moleculares MMP-9/NGAL y su relación con la condición clínica de la glándula en pacientes con PCRI.
Se encontraron 16 formas moleculares de MMP-9, 14 formas de NGAL y 9 bandas de complejos MMP-9/NGALque co-migraron a distintos tamaños moleculares, de los cuales la forma de MMP-9 de 97 kDa y la forma de NGAL de 64 kDa se encontraron con mayor frecuencia en las glándulas clínicamente comprometidas que en las no comprometidas por la enfermedad.
No hubo diferencia significativa en la frecuencia de bandas de complejos moleculares de MMP-9/NGAL entre el grupo de glándulas afectadas y no afectadas clínicamente por PCRI, sugiriendo un compromiso bilateral en todos los pacientes incluidos en el estudio.
La presencia de complejos moleculares de MMP-9/NGAL en saliva parotídea de pacientes con PCRI sugiere la participación de neutrófilos en el proceso inflamatorio de esta patología.
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Análisis de la composición protéica de la saliva de pacientes afectados por parotiditis crónica recurrente infantil y su correlación con el compromiso glandularMontalbán Martínez, Raúl January 2006 (has links)
Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / La Parotiditis Crónica Recurrente Infantil (PCRI), es una enfermedad
insidiosa cuya etiopatogénesis continúa siendo un enigma. Numerosos estudios
han reportado alteraciones físicas de la saliva parotídea en pacientes con PCRI;
sin embargo, los estudios sialoquímicos son escasos.
El propósito de este estudio fue determinar si la saliva de pacientes con
PCRI presenta alteraciones de su composición proteica al compararla con la
saliva de sujetos controles sanos.
Se recolectó saliva parotídea, submandibular/sublingual y total, de 33
pacientes con PCRI (5-16 años de edad, ambos sexos), en la etapa
asintomática de la enfermedad y de 33 individuos controles sanos pareados por
edad y género.
Se analizó: a) el modo de difusión de proteínas sobre membranas de
celulosa; b) la concentración de proteínas por el método de Bramhall; y c) el
patrón polipeptídico unidimensional en geles de poliacrilamida-SDS.
La saliva parotídea de los pacientes con PCRI presenta en relación a los
individuos controles sanos: a) alteraciones en el modo de difusión de proteínas;
b) un aumento en la concentración de proteínas; c) una mayor frecuencia de los
polipéptidos de 43, 37, 33, 29, 26, 16 y 10 kDa; y d) una mayor asimetría entre
los perfiles polipeptídicos de ambas salivas parotídeas. En los casos de PCRI
unilaterales, estas alteraciones salivales fueron observadas también en la saliva
proveniente de glándulas clínicamente asintomáticas.
En conclusión, la composición proteica de la saliva parotídea de los
pacientes con PCRI se encuentra alterada en relación a la de los controles
sanos. Las glándulas asintomáticas en los casos unilaterales, serían portadoras
de una patología subclínica detectable por la metodología experimental
utilizada.
Una posterior identificación de los polipéptidos presentes con mayor
frecuencia en la saliva de los pacientes con PCRI permitiría relacionarlos con la
etiopatogénesis de la enfermedad.
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Parotiditis crónica recurrente infantil y Síndrome de Sjögren primario en pacientes de 2 a 16 años de edad atendidos entre el año 2008 y septiembre de 2016 en el Hospital San Juan de DiosOsorio Herrera, Gustavo Alberto January 2017 (has links)
Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción: La parotiditis crónica recurrente infantil (PCRI) es una enfermedad
benigna que afecta a las glándulas parótidas. La escasa literatura respecto al tema
evidencia que en algunos pacientes diagnosticados previamente con PCRI se
pueden encontrar valores alterados de ANA, anticuerpos Ro/SSA y La/SSB. El
objetivo de la investigación es caracterizar clínica y epidemiológicamente a
pacientes diagnosticados con parotiditis crónica recurrente infantil en la población
pediátrica del Hospital San Juan de Dios y determinar la existencia de pruebas
alteradas de factor reumatoide, ANA y ENA screening.
Materiales y métodos: Se realizó un estudio observacional descriptivo
exploratorio ambispectivo. La muestra estuvo constituida por 53 pacientes con
diagnóstico de parotiditis crónica recurrente infantil, en control y tratamiento en el
servicio de cirugía maxilofacial del hospital San Juan de Dios, entre los años 2008
a septiembre de 2016.
Resultados: Existe una proporción de 2,1:1 entre hombres y mujeres
diagnosticados con esta condición. El promedio de inicio de los síntomas fue de
3,86 años. El promedio de la edad de la primera consulta fue de 5,49 años. Se
muestra una estacionalidad (en otoño) para el diagnóstico de PCRI. El 66,04% de
los pacientes presentaron entre una y cuatro recurrencias. La mayor frecuencia de
recurrencias elevadas (≥ 10) se presenta cuando hay una edad de inicio menor a
cinco años. Existe una alta frecuencia (73,58 % de los pacientes) de patologías
respiratorias del tracto superior (amigdalitis y otitis) asociadas a la PCRI. El 11,32
% de los pacientes diagnosticados con PCRI mostraron alteración de ANA, ENA
screening y factor reumatoide.
Conclusiones: Respecto a la distribución por sexo, promedio de edad de inicio de
los síntomas, promedio de recurrencias, e inicio de los síntomas menor –
recurrencias mayores, observados por el estudio actual se condicen con lo hallado
en la literatura. Existe una alta frecuencia de patologías respiratorias del tracto
superior asociadas a los pacientes con PCRI. Se observó una estacionalidad de la
condición (otoño). El 11,32 % de los pacientes diagnosticados con PCRI
mostraron alteración en los exámenes en autoinmunidad, siendo sugerente
realizar un estudio más acabado para confirmar o descartar el diagnóstico de SS
primario infantil. / Adscrito a proyecto PRIO-ODO 014/2016
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Identificación de formas moleculares de MMP-9 en condiciones desnaturalizantes/reductoras, en saliva parotídea de pacientes afectados por parotiditis crónica recurrente infantilToloza Cerón, Nadia Cristel January 2011 (has links)
Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / La Parotiditis Crónica Recurrente Infantil (PCRI) es una enfermedad de
etiología desconocida, que afecta a niños y adolescentes, caracterizándose por
un aumento de volumen y sensibilidad, uni o bilateral de las glándulas
parótidas, asociada generalmente a una sialectasia no obstructiva, sin signos
de infección aguda. Usualmente se acompaña de fiebre leve y malestar
general, lo que compromete la calidad de vida del paciente, quienes son
tratados por distintos especialistas sintomáticamente; ya que sin causa
aparente tiende a remitir.
En este estudio, se propuso analizar saliva parotídea de 33 pacientes
entre 4 y 14 años, con presentación clínica uni o bilateral de PCRI, en periodo
de latencia de la enfermedad. Se utilizó la técnica de inmuno-western-blot con
anticuerpo anti-metaloproteasa-9 (anti-MMP-9), para identificar formas
moleculares de MMP-9 tanto en glándulas afectadas y no afectadas
clínicamente por PCRI, en condiciones desnaturalizantes y
desnaturalizantes/reductoras. Se utilizó como agente reductor βmercaptoetanol
para
reducir
las
muestras
salivales
y
dilucidar
de
esta
forma
la
separación
de
formas
acomplejadas
de
MMP-9.
La muestra de saliva parotídea de pacientes con PCRI presentó un total
de 11 bandas de distinto peso molecular (>250, 250, 141, 100, 75, 60, 50, 47,
37, 29 y 25 kDa). Las formas moleculares de >250, 250, 141, 100, 50 y 47 kDa,
corresponden a complejos moleculares de MMP-9 que son susceptibles de ser
disociados en condiciones desnaturalizantes/reductoras. En presencia del
agente reductor, se produce un aumento de las formas de MMP-9 de tamaños
moleculares correspondientes a 75, 60, 29 y 25 kDa.
La saliva parotídea proveniente de glándulas afectadas clínicamente por
PCRI, presenta mayoritariamente el complejo molecular de MMP-9 de 141 kDa,
lo que sugiere que se encuentra involucrado en la patogénesis de la
enfermedad.
La saliva parotídea proveniente de glándulas no afectadas clínicamente
por PCRI, también presenta formas de MMP-9 de distintos tamaños
moleculares, lo que sugiere que están afectadas subclínicamente por la
enfermedad.
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Identificación de formas moleculares de MMP-9 en saliva parotídea de pacientes afectados por parotiditis crónica recurrente infantilValverde Moreno, Gustavo January 2010 (has links)
Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / La Parotiditis Crónica Recurrente Infantil (PCRI) es una inflamación
recurrente y dolorosa, de etiología desconocida. Generalmente, se inicia alrededor
de los 2 años de edad y se mantiene hasta la adolescencia. Estudios anteriores
han demostrado, mediante zimografía, la presencia de metaloproteasas 2 y 9 en la
saliva parotídea de pacientes con PCRI. En este estudio se propuso analizar,
mediante zimografía, la actividad gelatinasa en saliva parotídea de dichos
pacientes e identificar, mediante inmuno-western-blot, las formas moleculares de
metaloproteasa 9.
En 34 pacientes con PCRI de 4 a 13 años de edad, se recolectó saliva
parotídea bilateral, se midió concentración de proteínas mediante el método de
Bramhall, para posteriormente determinar la actividad gelatinasa mediante
zimografía. Se registró el compromiso clínico-sialográfico de ambas glándulas
parótidas y se les correlacionó con la actividad enzimática de las gelatinasas en
cuestión. Además se realizó inmuno-western-blot con anticuerpo antiMMP-9 y se
comparó la frecuencia de las distintas formas moleculares de metaloproteasa 9 en
saliva proveniente de parótidas clínicamente afectadas y clínicamente sanas.
La saliva parotídea de pacientes con PCRI presentó actividad gelatinasa en
ambas glándulas, independiente de si están o no afectadas clínicamente. Sólo se
observó diferencia estadísticamente significativa en la actividad enzimática de la
metaloproteasa de 141kDa, donde hubo una mayor actividad en glándulas
clínicamente afectadas.
La saliva de individuos con PCRI no presento un patrón uniforme de formas
moleculares de MMP-9. La frecuencia de las formas moleculares de las MMP-9
analizadas en saliva parotídea de pacientes PCRI, no presentó diferencias
estadísticamente significativas entre aquellas muestras tomadas de glándulas
clínicamente sanas y clínicamente afectadas, salvo en las formas moleculares de
169kDa y 139kDa, que fueron más frecuentes en saliva proveniente de glándulas
comprometidas clínicamente.
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Identificación de formas moleculares de MMP-2 en saliva parotídea de pacientes afectados por parotiditis crónica recurrente infantilSurot Madrid, Romina Soledad January 2010 (has links)
Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / La Parotiditis Crónica Recurrente Infantil (PCRI) es una inflamación
recurrente y dolorosa, de etiología desconocida. Generalmente, se inicia alrededor
de los 2 años de edad y se mantiene hasta la adolescencia. Estudios anteriores
han demostrado, mediante zimografía, la presencia de metaloproteasas 2 y 9 en la
saliva parotídea de pacientes con PCRI. Mediante western-blot, se ha detectado
con mayor frecuencia la presencia de MMP-9 en la saliva proveniente de
glándulas afectadas clínicamente en relación a las no afectadas. No existen
estudios que analicen la presencia de MMP-2 en PCRI, mediante anticuerpos. En
este estudio se propuso analizar, la presencia de formas moleculares de MMP-2
con actividad gelatinasa en la saliva parotídea bilateral de pacientes con PCRI.
En 36 pacientes con PCRI uni o bilateral, de 4 a 14 años de edad, se
recolectó saliva parotídea bilateral, se cuantificó la concentración de proteínas
mediante el método de Bramhall, se determinó la actividad gelatinasa mediante
zimografía y la presencia de MMP-2 mediante Western blot. Se registró el
compromiso clínico-sialográfico de ambas glándulas parótidas como: glándulas
clínicamente afectadas y no afectadas. Se determinó la frecuencia de MMP-2
salival con actividad gelatinolítica, en relación al compromiso clínico de la
glándula.
En la totalidad de los pacientes se detectaron 5 bandas con actividad
gelatinasa y 17 formas moleculares de MMP-2, no encontrándose patrones de
bandeo para estas moléculas en la enfermedad. Las formas moleculares de MMP2
de
>250
kDa
y
62
kDa,
presentaron
actividad
gelatinasa.
No
hubo
diferencias
en
la
frecuencia
de
estas
formas
de
MMP-2,
tanto
en
la
saliva
parotídea
proveniente
de
glándulas
afectadas
como
en
las
no
afectadas
clínicamente
por
PCRI.
Los resultados sugieren que tanto en la PCRI bilateral como en la unilateral,
ambas glándulas parótidas se encuentran comprometidas en la enfermedad,
aunque algunas glándulas no se vean afectadas por el aumento de volumen
clínico.
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Análisis de la composición molecular de la saliva parotídea de pacientes con parotiditis crónica recurrente infantil, después de un determinado tiempo de mantención terapéuticaContardo Lagos, Denisse Eldy January 2008 (has links)
Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / La Parotiditis Crónica Recurrente Infantil (PCRI) es una inflamación
recurrente y dolorosa, de etiología desconocida. Se inicia a los 2 años de edad
y se mantiene hasta la adolescencia, comprometiendo la calidad de vida.
Estudios recientes relacionan alteraciones de la composición molecular salival
parotídea de pacientes con PCRI, con el grado de alteración sialográfico
parotídeo. El propósito de este estudio fue realizar un seguimiento de la
composición molecular de la saliva parotídea de pacientes con PCRI sometidos
a mantención terapéutica.
Se incluyeron 28 pacientes con PCRI tratados en el Servicio Máxilofacial
Infantil del Hospital San Juan de Dios. Se tomó muestra de saliva parotídea
bilateral para determinar: a) Concentración de proteínas, b) Perfiles
electroforéticos unidimensionales y c) Frecuencia de actividad metaloproteinasa
MMP9 y MMP2; antes y después de un periodo de mantención terapéutica.
La saliva parotídea de los pacientes con PCRI luego de la mantención
terapéutica no presenta variaciones en la concentración de proteínas y en la
frecuencia de individuos que presentan actividad MMP-9 y MMP-2. Los perfiles
electroforéticos se mantienen relativamente estables a excepción de dos
bandas: la banda I que se presentó en una menor cantidad de pacientes que
recibieron el tratamiento, y la banda J que se presenta en una mayor cantidad
de pacientes luego de que estos recibieran tratamiento.
El conjunto de observaciones realizadas, ha permitido determinar que
después de un largo periodo de tiempo de mantención terapéutica, la saliva
parotídea de pacientes con PCRI presenta una mantención de las alteraciones
en la composición molecular. Se requiere de estudios adicionales que permitan
identificar y caracterizar las proteínas que variaron después del tratamiento en
la saliva de estos pacientes.
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Identificación de péptidos salivales parótideos asociados a la condición de parotiditis crónica recurrente infantilWerner Lillo, Andrea January 2008 (has links)
Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / Parotiditis crónica recurrente infantil (PCRI), inflamación recurrente de etiología
desconocida se manifiesta alrededor de los 3 años y se mantiene hasta la adolescencia,
comprometiendo la calidad de vida. Estudios recientes reportan un aumento en la
frecuencia de algunos polipéptidos en la saliva parotídea proveniente de pacientes con
PCRI al compararla con la de sujetos controles sanos. El propósito de este estudio fue
identificar polipéptidos variantes asociados a la condición de PCRI.
Se incluyeron 37 pacientes con PCRI que estaban siendo tratados en el Servicio
Maxilofacial Infantil del Hospital San Juan de Dios y 8 individuos controles sanos. Se
tomó muestra de saliva parotídea bilateral para determinar: concentración de
proteínas, perfiles electroforéticos unidimensionales, frecuencias de polipéptidos
variantes e identificación de ellos mediante espectrometría de masas MALDI TOF.
La saliva parotídea de los pacientes con PCRI, en relación a los controles,
presenta con mayor frecuencia los polipéptidos de 87, 43, 37, 33, 29 y 26 kDa. La banda
de 26 kDa presente en el 100% de los pacientes con PCRI, corresponde a la región C de
la cadena liviana kappa de inmunoglobulina. Un péptido de 144 kDa, exclusivo para los
pacientes con PCRI se presentó en 6 muestras.
Los pacientes con PCRI presentan en su saliva parotídea alteraciones en la
frecuencia de varias proteínas en relación a los individuos controles sanos. El aumento
de la frecuencia de la banda correspondiente a la región C de la cadena liviana kappa
de la inmunoglobulina sugiere un mecanismo de respuesta glandular asociado a esta
condición patológica.
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Determinación de la frecuencia y actividad enzimática de las formas activas y latentes de las metaloproteinasas 2 y 9 en la saliva parotídea de pacientes afectados por parotiditis crónica recurrente infantilPinochet Mondaca, Alvaro Nicolás January 2008 (has links)
Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / La Parotiditis Crónica Recurrente Infantil (PCRI) es una inflamación recurrente y
dolorosa, de etiología aún no dilucidada de la glándula parótida asociada a sialectasia
no obstructiva. Generalmente, se inicia alrededor de los 2 años de edad y se mantiene hasta la adolescencia. Estudios anteriores han demostrado la presencia de
metaloproteinasas 2 y 9 en la saliva parotídea de pacientes con PCRI. En este estudio,
trabajo se propuso analizar la frecuencia y actividad enzimática de las formas activas y
latentes de dichas metaloproteinasas.
En 32 pacientes con PCRI de 4 a 13 años, se recolectó saliva parotídea y se analizó mediante cuantificación de proteínas por el método de Bramhall para posteriormente determinar la actividad metaloproteinasa 2 y 9 mediante zimografía en
presencia de gelatina. Se registró el compromiso clínico y sialográfico de ambas glándulas parótidas y se les correlacionó con la frecuencia y actividad nzimática de las formas activas y latentes de las metaloproteinasas en cuestión.
La saliva parotídea de los pacientes con PCRI, presentó una tendencia a una mayor frecuencia y actividad enzimática de las metaloproteinasas 2 y 9 de la saliva
proveniente de glándulas comprometidas clínica y sialográficamente respecto de la
saliva proveniente de glándulas asintomáticas. Sin embargo, no hubo diferencia
estadística entre estos dos tipos de saliva para ninguno de los parámetros medidos.
La presencia de las formas activas y latentes de las metaloproteinasas 2 y 9 en saliva proveniente de glándulas asintomáticas de los pacientes PCRI unilateral,
sugiere que existe una modalidad subclínica de esta patología afectando a dichas parótidas.
Estudios osteriores con un número mayor de muestras, realizados en pacientes con distintos esquemas terapéuticos, al inicio y durante el tratamiento, serían
interesantes para poder determinar de manera mas clara la diferencia entre la
frecuencia y actividad enzimática metaloproteasa en la saliva proveniente de glándulas
comprometidas versus glándulas clínicamente sanas.
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