Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / La Parotiditis Crónica Recurrente Infantil (PCRI) es una inflamación recurrente y dolorosa, de etiología desconocida. Generalmente, se inicia alrededor de los 3 años de edad y se mantiene hasta la adolescencia. Estudios anteriores han demostrado, mediante zimografía, la presencia de metaloproteasas de matriz (MMPs) 2 y 9 en la saliva parotídea de pacientes con PCRI. Mediante la técnica de western-blot, se ha detectado con mayor frecuencia la presencia de formas moleculares de MMP-9 de 169 kDa y 139 kDa. Así mismo, mediante zimografía se detectó una metaloproteasa de 141 kDa. En ambos casos las bandas fueron más frecuentes en saliva proveniente de glándulas comprometidas clínicamente en relación a las no afectadas de pacientes con PCRI. En estudios posteriores se observó que en la saliva parotídea proveniente de glándulas afectadas clínicamente por PCRI, en relación a saliva proveniente de glándulas no afectadas clínicamente de los mismos pacientes, se presentó mayoritariamente el complejo molecular de MMP-9 de 141 kDa. Tanto la banda de 141 kDa como la de 139 kDa podrían corresponder a la unión MMP-9/NGAL (Lipocalina de Neutrófilo asociada a Gelatinasa B) ya que se encuentran cercanas al rango de 125-130 kDa con el que se ha descrito a ese complejo en diversos estudios. En este estudio se propuso analizar, la presencia de bandas de NGAL en la saliva parotídea bilateral de pacientes con PCRI. En 33 pacientes con PCRI unilateral o bilateral, de entre 6 a 14 años de edad, se recolectó saliva parotídea bilateral y se determinó la presencia de NGAL mediante la técnica de western-blot. Se registró el compromiso clínico de ambas glándulas parótidas como: glándulas clínicamente afectadas y no afectadas. Se determinó la frecuencia de NGAL salival, en relación al compromiso clínico de la glándula. La saliva parotídea de pacientes con PCRI, analizada en condiciones no reductoras presentó 7 bandas correspondientes a NGAL, en tanto que, en condiciones reductoras se encontraron 5 bandas correspondientes a NGAL. 2 La saliva parotídea proveniente de glándulas clínicamente comprometidas y de glándulas sin compromiso clínico de pacientes con PCRI, analizada en condiciones no reductoras, no presentó diferencias en la frecuencia de las bandas encontradas en estas condiciones. La saliva parotídea proveniente de glándulas clínicamente comprometidas de pacientes con PCRI, analizada en condiciones reductoras, presentó con mayor frecuencia las bandas correspondientes a NGAL de los tamaños moleculares: 75, 37 y 25 kDa, al compararla con la saliva parotídea proveniente de glándulas no comprometidas clínicamente. Los resultados de este estudio, sugieren que NGAL podría estar involucrada en la etiopatogénesis de PCRI y pueden contribuir al esclarecimiento de este proceso patológico. Así mismo, la presencia de NGAL en la saliva parotídea de glándulas sin compromiso clínico de aumento de volumen, sugiere un cuadro glandular subclínico de la enfermedad.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto complete de su tesis en el programa de tesis Electrónicas / La parotiditis crónica recurrente infantil (PCRI) es una enfermedad inflamatoria de origen desconocido definida como la inflamación de la glándula parótida asociada a dilatación de los ductos interlobulares no obstructiva, caracterizada por períodos recurrentes de parotidomegalia inflamatoria dolorosa de días, semanas o meses de duración, usualmente con compromiso del estado general. Se inicia en la infancia y se mantiene hasta la adolescencia. Después de la pubertad los síntomas se atenúan pudiendo desaparecer sin causa aparente, aunque en algunos casos persiste hasta la edad adulta. Actualmente no existe consenso para el tratamiento de esta enfermedad, enfocándose principalmente al tratamiento sintomático. El diagnóstico de PCRI es clínico-sialográfico y el estudio de su patogénesis se ve dificultada por el alto riesgo que implica la biopsia del tejido parotídeo por su relación anatómica con el nervio facial. Se han descrito alteraciones en la composición del contenido proteico de la saliva parotídea en PCRI, dentro de las cuales llaman la atención las metaloproteinasas de la matriz extracelular (MMP’s), en particular MMP-9 de tamaño molecular de 140 kDa que pudiese corresponder un complejo con la lipocalina de neutrófilo asociada a gelatinasa 2 (NGAL) En este estudio se analizó el producto de secreción glandular, la saliva parotídea, mediante la técnica de Western blot en busca de complejos moleculares MMP-9/NGAL y su relación con la condición clínica de la glándula en pacientes con PCRI. Se encontraron 16 formas moleculares de MMP-9, 14 formas de NGAL y 9 bandas de complejos MMP-9/NGALque co-migraron a distintos tamaños moleculares, de los cuales la forma de MMP-9 de 97 kDa y la forma de NGAL de 64 kDa se encontraron con mayor frecuencia en las glándulas clínicamente comprometidas que en las no comprometidas por la enfermedad. No hubo diferencia significativa en la frecuencia de bandas de complejos moleculares de MMP-9/NGAL entre el grupo de glándulas afectadas y no afectadas clínicamente por PCRI, sugiriendo un compromiso bilateral en todos los pacientes incluidos en el estudio. La presencia de complejos moleculares de MMP-9/NGAL en saliva parotídea de pacientes con PCRI sugiere la participación de neutrófilos en el proceso inflamatorio de esta patología.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / La Parotiditis Crónica Recurrente Infantil (PCRI), es una enfermedad insidiosa cuya etiopatogénesis continúa siendo un enigma. Numerosos estudios han reportado alteraciones físicas de la saliva parotídea en pacientes con PCRI; sin embargo, los estudios sialoquímicos son escasos. El propósito de este estudio fue determinar si la saliva de pacientes con PCRI presenta alteraciones de su composición proteica al compararla con la saliva de sujetos controles sanos. Se recolectó saliva parotídea, submandibular/sublingual y total, de 33 pacientes con PCRI (5-16 años de edad, ambos sexos), en la etapa asintomática de la enfermedad y de 33 individuos controles sanos pareados por edad y género. Se analizó: a) el modo de difusión de proteínas sobre membranas de celulosa; b) la concentración de proteínas por el método de Bramhall; y c) el patrón polipeptídico unidimensional en geles de poliacrilamida-SDS. La saliva parotídea de los pacientes con PCRI presenta en relación a los individuos controles sanos: a) alteraciones en el modo de difusión de proteínas; b) un aumento en la concentración de proteínas; c) una mayor frecuencia de los polipéptidos de 43, 37, 33, 29, 26, 16 y 10 kDa; y d) una mayor asimetría entre los perfiles polipeptídicos de ambas salivas parotídeas. En los casos de PCRI unilaterales, estas alteraciones salivales fueron observadas también en la saliva proveniente de glándulas clínicamente asintomáticas. En conclusión, la composición proteica de la saliva parotídea de los pacientes con PCRI se encuentra alterada en relación a la de los controles sanos. Las glándulas asintomáticas en los casos unilaterales, serían portadoras de una patología subclínica detectable por la metodología experimental utilizada. Una posterior identificación de los polipéptidos presentes con mayor frecuencia en la saliva de los pacientes con PCRI permitiría relacionarlos con la etiopatogénesis de la enfermedad.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción: La parotiditis crónica recurrente infantil (PCRI) es una enfermedad benigna que afecta a las glándulas parótidas. La escasa literatura respecto al tema evidencia que en algunos pacientes diagnosticados previamente con PCRI se pueden encontrar valores alterados de ANA, anticuerpos Ro/SSA y La/SSB. El objetivo de la investigación es caracterizar clínica y epidemiológicamente a pacientes diagnosticados con parotiditis crónica recurrente infantil en la población pediátrica del Hospital San Juan de Dios y determinar la existencia de pruebas alteradas de factor reumatoide, ANA y ENA screening. Materiales y métodos: Se realizó un estudio observacional descriptivo exploratorio ambispectivo. La muestra estuvo constituida por 53 pacientes con diagnóstico de parotiditis crónica recurrente infantil, en control y tratamiento en el servicio de cirugía maxilofacial del hospital San Juan de Dios, entre los años 2008 a septiembre de 2016. Resultados: Existe una proporción de 2,1:1 entre hombres y mujeres diagnosticados con esta condición. El promedio de inicio de los síntomas fue de 3,86 años. El promedio de la edad de la primera consulta fue de 5,49 años. Se muestra una estacionalidad (en otoño) para el diagnóstico de PCRI. El 66,04% de los pacientes presentaron entre una y cuatro recurrencias. La mayor frecuencia de recurrencias elevadas (≥ 10) se presenta cuando hay una edad de inicio menor a cinco años. Existe una alta frecuencia (73,58 % de los pacientes) de patologías respiratorias del tracto superior (amigdalitis y otitis) asociadas a la PCRI. El 11,32 % de los pacientes diagnosticados con PCRI mostraron alteración de ANA, ENA screening y factor reumatoide. Conclusiones: Respecto a la distribución por sexo, promedio de edad de inicio de los síntomas, promedio de recurrencias, e inicio de los síntomas menor – recurrencias mayores, observados por el estudio actual se condicen con lo hallado en la literatura. Existe una alta frecuencia de patologías respiratorias del tracto superior asociadas a los pacientes con PCRI. Se observó una estacionalidad de la condición (otoño). El 11,32 % de los pacientes diagnosticados con PCRI mostraron alteración en los exámenes en autoinmunidad, siendo sugerente realizar un estudio más acabado para confirmar o descartar el diagnóstico de SS primario infantil. / Adscrito a proyecto PRIO-ODO 014/2016

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / La Parotiditis Crónica Recurrente Infantil (PCRI) es una enfermedad de etiología desconocida, que afecta a niños y adolescentes, caracterizándose por un aumento de volumen y sensibilidad, uni o bilateral de las glándulas parótidas, asociada generalmente a una sialectasia no obstructiva, sin signos de infección aguda. Usualmente se acompaña de fiebre leve y malestar general, lo que compromete la calidad de vida del paciente, quienes son tratados por distintos especialistas sintomáticamente; ya que sin causa aparente tiende a remitir. En este estudio, se propuso analizar saliva parotídea de 33 pacientes entre 4 y 14 años, con presentación clínica uni o bilateral de PCRI, en periodo de latencia de la enfermedad. Se utilizó la técnica de inmuno-western-blot con anticuerpo anti-metaloproteasa-9 (anti-MMP-9), para identificar formas moleculares de MMP-9 tanto en glándulas afectadas y no afectadas clínicamente por PCRI, en condiciones desnaturalizantes y desnaturalizantes/reductoras. Se utilizó como agente reductor βmercaptoetanol para reducir las muestras salivales y dilucidar de esta forma la separación de formas acomplejadas de MMP-9. La muestra de saliva parotídea de pacientes con PCRI presentó un total de 11 bandas de distinto peso molecular (>250, 250, 141, 100, 75, 60, 50, 47, 37, 29 y 25 kDa). Las formas moleculares de >250, 250, 141, 100, 50 y 47 kDa, corresponden a complejos moleculares de MMP-9 que son susceptibles de ser disociados en condiciones desnaturalizantes/reductoras. En presencia del agente reductor, se produce un aumento de las formas de MMP-9 de tamaños moleculares correspondientes a 75, 60, 29 y 25 kDa. La saliva parotídea proveniente de glándulas afectadas clínicamente por PCRI, presenta mayoritariamente el complejo molecular de MMP-9 de 141 kDa, lo que sugiere que se encuentra involucrado en la patogénesis de la enfermedad. La saliva parotídea proveniente de glándulas no afectadas clínicamente por PCRI, también presenta formas de MMP-9 de distintos tamaños moleculares, lo que sugiere que están afectadas subclínicamente por la enfermedad.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / La Parotiditis Crónica Recurrente Infantil (PCRI) es una inflamación recurrente y dolorosa, de etiología desconocida. Generalmente, se inicia alrededor de los 2 años de edad y se mantiene hasta la adolescencia. Estudios anteriores han demostrado, mediante zimografía, la presencia de metaloproteasas 2 y 9 en la saliva parotídea de pacientes con PCRI. En este estudio se propuso analizar, mediante zimografía, la actividad gelatinasa en saliva parotídea de dichos pacientes e identificar, mediante inmuno-western-blot, las formas moleculares de metaloproteasa 9. En 34 pacientes con PCRI de 4 a 13 años de edad, se recolectó saliva parotídea bilateral, se midió concentración de proteínas mediante el método de Bramhall, para posteriormente determinar la actividad gelatinasa mediante zimografía. Se registró el compromiso clínico-sialográfico de ambas glándulas parótidas y se les correlacionó con la actividad enzimática de las gelatinasas en cuestión. Además se realizó inmuno-western-blot con anticuerpo antiMMP-9 y se comparó la frecuencia de las distintas formas moleculares de metaloproteasa 9 en saliva proveniente de parótidas clínicamente afectadas y clínicamente sanas. La saliva parotídea de pacientes con PCRI presentó actividad gelatinasa en ambas glándulas, independiente de si están o no afectadas clínicamente. Sólo se observó diferencia estadísticamente significativa en la actividad enzimática de la metaloproteasa de 141kDa, donde hubo una mayor actividad en glándulas clínicamente afectadas. La saliva de individuos con PCRI no presento un patrón uniforme de formas moleculares de MMP-9. La frecuencia de las formas moleculares de las MMP-9 analizadas en saliva parotídea de pacientes PCRI, no presentó diferencias estadísticamente significativas entre aquellas muestras tomadas de glándulas clínicamente sanas y clínicamente afectadas, salvo en las formas moleculares de 169kDa y 139kDa, que fueron más frecuentes en saliva proveniente de glándulas comprometidas clínicamente.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / La Parotiditis Crónica Recurrente Infantil (PCRI) es una inflamación recurrente y dolorosa, de etiología desconocida. Generalmente, se inicia alrededor de los 2 años de edad y se mantiene hasta la adolescencia. Estudios anteriores han demostrado, mediante zimografía, la presencia de metaloproteasas 2 y 9 en la saliva parotídea de pacientes con PCRI. Mediante western-blot, se ha detectado con mayor frecuencia la presencia de MMP-9 en la saliva proveniente de glándulas afectadas clínicamente en relación a las no afectadas. No existen estudios que analicen la presencia de MMP-2 en PCRI, mediante anticuerpos. En este estudio se propuso analizar, la presencia de formas moleculares de MMP-2 con actividad gelatinasa en la saliva parotídea bilateral de pacientes con PCRI. En 36 pacientes con PCRI uni o bilateral, de 4 a 14 años de edad, se recolectó saliva parotídea bilateral, se cuantificó la concentración de proteínas mediante el método de Bramhall, se determinó la actividad gelatinasa mediante zimografía y la presencia de MMP-2 mediante Western blot. Se registró el compromiso clínico-sialográfico de ambas glándulas parótidas como: glándulas clínicamente afectadas y no afectadas. Se determinó la frecuencia de MMP-2 salival con actividad gelatinolítica, en relación al compromiso clínico de la glándula. En la totalidad de los pacientes se detectaron 5 bandas con actividad gelatinasa y 17 formas moleculares de MMP-2, no encontrándose patrones de bandeo para estas moléculas en la enfermedad. Las formas moleculares de MMP2 de >250 kDa y 62 kDa, presentaron actividad gelatinasa. No hubo diferencias en la frecuencia de estas formas de MMP-2, tanto en la saliva parotídea proveniente de glándulas afectadas como en las no afectadas clínicamente por PCRI. Los resultados sugieren que tanto en la PCRI bilateral como en la unilateral, ambas glándulas parótidas se encuentran comprometidas en la enfermedad, aunque algunas glándulas no se vean afectadas por el aumento de volumen clínico.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / La Parotiditis Crónica Recurrente Infantil (PCRI) es una inflamación recurrente y dolorosa, de etiología desconocida. Se inicia a los 2 años de edad y se mantiene hasta la adolescencia, comprometiendo la calidad de vida. Estudios recientes relacionan alteraciones de la composición molecular salival parotídea de pacientes con PCRI, con el grado de alteración sialográfico parotídeo. El propósito de este estudio fue realizar un seguimiento de la composición molecular de la saliva parotídea de pacientes con PCRI sometidos a mantención terapéutica. Se incluyeron 28 pacientes con PCRI tratados en el Servicio Máxilofacial Infantil del Hospital San Juan de Dios. Se tomó muestra de saliva parotídea bilateral para determinar: a) Concentración de proteínas, b) Perfiles electroforéticos unidimensionales y c) Frecuencia de actividad metaloproteinasa MMP9 y MMP2; antes y después de un periodo de mantención terapéutica. La saliva parotídea de los pacientes con PCRI luego de la mantención terapéutica no presenta variaciones en la concentración de proteínas y en la frecuencia de individuos que presentan actividad MMP-9 y MMP-2. Los perfiles electroforéticos se mantienen relativamente estables a excepción de dos bandas: la banda I que se presentó en una menor cantidad de pacientes que recibieron el tratamiento, y la banda J que se presenta en una mayor cantidad de pacientes luego de que estos recibieran tratamiento. El conjunto de observaciones realizadas, ha permitido determinar que después de un largo periodo de tiempo de mantención terapéutica, la saliva parotídea de pacientes con PCRI presenta una mantención de las alteraciones en la composición molecular. Se requiere de estudios adicionales que permitan identificar y caracterizar las proteínas que variaron después del tratamiento en la saliva de estos pacientes.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / Parotiditis crónica recurrente infantil (PCRI), inflamación recurrente de etiología desconocida se manifiesta alrededor de los 3 años y se mantiene hasta la adolescencia, comprometiendo la calidad de vida. Estudios recientes reportan un aumento en la frecuencia de algunos polipéptidos en la saliva parotídea proveniente de pacientes con PCRI al compararla con la de sujetos controles sanos. El propósito de este estudio fue identificar polipéptidos variantes asociados a la condición de PCRI. Se incluyeron 37 pacientes con PCRI que estaban siendo tratados en el Servicio Maxilofacial Infantil del Hospital San Juan de Dios y 8 individuos controles sanos. Se tomó muestra de saliva parotídea bilateral para determinar: concentración de proteínas, perfiles electroforéticos unidimensionales, frecuencias de polipéptidos variantes e identificación de ellos mediante espectrometría de masas MALDI TOF. La saliva parotídea de los pacientes con PCRI, en relación a los controles, presenta con mayor frecuencia los polipéptidos de 87, 43, 37, 33, 29 y 26 kDa. La banda de 26 kDa presente en el 100% de los pacientes con PCRI, corresponde a la región C de la cadena liviana kappa de inmunoglobulina. Un péptido de 144 kDa, exclusivo para los pacientes con PCRI se presentó en 6 muestras. Los pacientes con PCRI presentan en su saliva parotídea alteraciones en la frecuencia de varias proteínas en relación a los individuos controles sanos. El aumento de la frecuencia de la banda correspondiente a la región C de la cadena liviana kappa de la inmunoglobulina sugiere un mecanismo de respuesta glandular asociado a esta condición patológica.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / La Parotiditis Crónica Recurrente Infantil (PCRI) es una inflamación recurrente y dolorosa, de etiología aún no dilucidada de la glándula parótida asociada a sialectasia no obstructiva. Generalmente, se inicia alrededor de los 2 años de edad y se mantiene hasta la adolescencia. Estudios anteriores han demostrado la presencia de metaloproteinasas 2 y 9 en la saliva parotídea de pacientes con PCRI. En este estudio, trabajo se propuso analizar la frecuencia y actividad enzimática de las formas activas y latentes de dichas metaloproteinasas. En 32 pacientes con PCRI de 4 a 13 años, se recolectó saliva parotídea y se analizó mediante cuantificación de proteínas por el método de Bramhall para posteriormente determinar la actividad metaloproteinasa 2 y 9 mediante zimografía en presencia de gelatina. Se registró el compromiso clínico y sialográfico de ambas glándulas parótidas y se les correlacionó con la frecuencia y actividad nzimática de las formas activas y latentes de las metaloproteinasas en cuestión. La saliva parotídea de los pacientes con PCRI, presentó una tendencia a una mayor frecuencia y actividad enzimática de las metaloproteinasas 2 y 9 de la saliva proveniente de glándulas comprometidas clínica y sialográficamente respecto de la saliva proveniente de glándulas asintomáticas. Sin embargo, no hubo diferencia estadística entre estos dos tipos de saliva para ninguno de los parámetros medidos. La presencia de las formas activas y latentes de las metaloproteinasas 2 y 9 en saliva proveniente de glándulas asintomáticas de los pacientes PCRI unilateral, sugiere que existe una modalidad subclínica de esta patología afectando a dichas parótidas. Estudios osteriores con un número mayor de muestras, realizados en pacientes con distintos esquemas terapéuticos, al inicio y durante el tratamiento, serían interesantes para poder determinar de manera mas clara la diferencia entre la frecuencia y actividad enzimática metaloproteasa en la saliva proveniente de glándulas comprometidas versus glándulas clínicamente sanas.