Uveal melanoma (UM) is the most common intraocular tumor in adults. Despite the increase in diagnostic accuracy over the past several decades and the development of eye saving treatments such as plaque radiotherapy and photon beam therapy, there was no significant change in the prognosis in uveal melanoma due to metastatic disease. Therefore, we started to search for novel therapeutic targets in UM, such as heat shock protein 90 (Hsp90). This protein is a chaperone for several proteins (clients) involved in signal transduction and cell cycle control like kinases and transcription factors and plays a key role in regulating their stability and function. Hsp90 is expressed by a variety of tumor types and its inhibition results in the down regulation and proteasomal degradation of its client proteins. / The objective of this study was to examine the immunohistochemical profile of Hsp90 and its association with prognostic features in uveal melanoma. In addition, we studied the role of Hsp90 in promoting growth and survival of uveal melanoma and the molecular consequences of inhibiting Hsp90 function by the small-molecule 17-allylamino-17-demethoxy-geldanamycin (17-AAG). / Hsp90 expression was studied in five primary human uveal melanoma cell lines by Western blot analysis and immunofluorescence methods in 44 specimens of human UM, 14 specimens from an animal model of UM and also in metastatic specimens. / In addition we determined the cytotoxicity profile of five primary UM cell lines and one metastatic derived cell line (OMM-1.5) after exposure to Hsp90 inhibitor 17-AAG. Sulfurhodamine-B based proliferation assay was used to compare UM cell growth with a range of concentrations of 17-AAG. Changes in cell migration and invasion and apoptosis and cell cycle assays were evaluated by flow cytometry. The expression of intracellular proteins was determined using Western blot analysis. / Hsp90 was identified in 68 % of cases of primary uveal melanoma and was expressed in 87% of metastatic specimens. The expression of the Hsp90 in primary tumor was significantly associated with largest tumor dimension. / Inhibition of Hsp90 function by 17-AAG caused a dose-dependent growth inhibition of primary and metastatic UM cell lines. 17-AAG induced cytostasis which was associated with a decrease in cyclin-dependent kinase CDK4. Also, 17-AAG induced apoptosis with a significant increase in caspase 3-protease activity after drug exposure. The cytotoxic effect of 17-AAG was associated with decreased levels of Akt and phospho-Akt after 24 h exposure to the drug. 17-AAG significantly reduced the migratory and invasive capabilities of all 5 uveal melanoma cell lines. 17-AAG down regulated c-Met and IGF-1R receptor transmembrane tyrosine kinases and also inhibited activation of focal adhesion kinase (FAK). / For the first time in UM, we demonstrate that over expression of Hsp90 in patients is linked to an indicator of poor prognosis. To the best of our knowledge, this is the first report showing the effect of Hsp90 inhibitor 17-AAG, on proliferation of UM cells which induced cell cycle arrest and apoptosis. Downregulation of p-Akt in response to Hsp90 inhibition could represent one possible mechanism of mod-ulation of the phosphatidylinositol 3'-kinase (PI3K)-Akt pathway in uveal melanoma. Also, we demonstrated for the first time that inhibition of Hsp90 function had an effect on UM cells motility and invasive potential and in cellular processes involved in metastasis in uveal melanoma. This data indicates that UM is a suitable target for modulation of Hsp90 activity and that Hsp90 inhibitors are possible therapeutic modalities for UM patients. Prospective studies are needed to confirm the prognostic role of Hsp90 in UM and further trials in uveal melanoma models should be undertaken to study the effect of inhibition of Hsp90 in vivo. / Le mélanome uvéal (UM) est la tumeur intraoculaire primitive la plus fréquente chez les adultes. Par conséquent, nous avons commencé à la recherche de nouvelles cibles thérapeutiques dans l'UM, tels que les protéines de choc thermique 90 (Hsp90). Hsp90 est une protéine chaperon indispensable à l'activation et la régulation d'un ensemble important de protéines de la signalisation et de la régulation cellulaire. L'utilisation d'inhibiteur spécifique de Hsp90 entraîne une baisse de l'activité des protéines clientes. / L'objectif de cette étude était d'examiner le profil des Hsp90 et son association avec les caractéristiques pronostiques dans mélanome de l'uvée. En outre, nous avons étudié le rôle qu'elle joue dans les mécanismes cellulaires de prolifération de mélanome de l'uvée et les conséquences de l'inhibition de la fonction de Hsp90 par 17-allylamino-17-demethoxy-geldanamycin (17-AAG). / L'expression immunohistochimique des Hsp90 a été étudiée dans cinq lignées de cellules tumorales in-vitro par Western blot et méthodes d'immunofluorescence. L'expression de Hsp90 a été évaluée dans 44 spécimens l'UM humaine et 14 spécimens d'un modèle animal de l'UM et dans des spécimens provenant de lésions métastatiques humaines et animales. En outre, notre étude a visé à comparer les effets antiprolifératifs du 17-AAG sur les lignées cellulaire cancéreuse d'UM humaine et dans une lignée de cellules tumorales dérivées d'une lésion métastatique (OMM-1,5). La prolifération cellulaire a été évaluée par le test à la sulforhodamine B sur les cellules exposées à une gamme de concentrations de 17-AAG. / Les changements dans la migration et l'invasion cellulaire en présence ou l'absence de la 17-AAG. Le processus apoptotique et les fractions de cycle cellulaire ont été déterminés par cytométrie en flux. Analyse de l'expression de Hsp90 et l'expression de protéines intracellulaires a été déterminée par l'analyse Western blot. / L'expression des Hsp90 a été identifiée dans 68% des spécimens et a été exprimée dans 87 % des spécimens métastatique. L'expression de l'Hsp90 dans la tumeur primaire a été significativement associée à la plus grande dimension de la tumeur. / L'inhibition de la fonction Hsp90 par 17-AAG a entraîné une inhibition de croissance dose-dépendante avec une réduction statistiquement significative. 17-AAG induit arrêt du cycle cellulaire qui a été associée à une diminution de la kinase CDK4. En outre, 17-AAG induisent l'apoptose dans les cellules d'UM et une augmentation de l'activité de la caspase-3. L'effet cytotoxique de la 17-AAG a été associé à une baisse des niveaux d'Akt et phospho-Akt, 24 h après l'exposition à la drogue. / L'exposition à la 17-AAG a considérablement réduit les capacités migratoires et invasives des les cinq lignées de cellules d'UM et provoquent une baisse des niveaux de récepteurs tyrosine kinases transmembranaires c-Met et IGF-1R et aussi a également réduit l'expression de la kinase d'adhérence focale (FAK). / Pour la première fois en UM nous démontrer que l'expression de Hsp90 chez des patients est liée à un indicateur de pronostic défavorable. Nos résultats apportent des informations originales sur les effets cytotoxiques de 17-AAG sur la prolifération des cellules d'UM qui induit un arrêt du cycle cellulaire et l'apoptose. Le diminution de p-Akt en réponse à Hsp90 inhibition pourrait constituer un mécanisme possible de la modulation de la phosphatidylinositol 3'-kinase (PI3K) - Akt signalisation de mélanome de l'uvée. / L'expression de Hsp90 dans métastases et l'évaluation des processus cellulaires impliqués dans l'invasion après l'inhibition de la fonction de Hsp90 suggéré l'utilité des inhibiteurs de Hsp90 dans la prévention de la progression tumorale et les métastases. L'ensemble de nos résultats montre que le ciblage Hsp90 mai constituer une nouvelle approche thérapeutique pour les patients avec le mélanome de l'uvée.

Inflammation and airway remodelling are hallmarks of severe asthma pathology. Although severe asthma represents 10% of the asthmatic population, this subset of patients has greater morbidity, mortality and a disproportionate need for health care services. Severe asthma appears to have a different inflammatory pattern compared to mild and moderate asthma. There is an increase in neutrophil infiltration, upregulation of IL-8 and disregulation of Th-2 cytokines. IL-17A and F are two proinflammatory and profibrotic cytokines produced primarily by Th-17 cells. These cytokines can act on a broad range of cell types to induce cytokines, chemokines and metalloproteinases as well as have important roles in neutrophil activity. We hypothesize that IL-17A and F are expressed in asthmatic airways and are increased in severe disease. The objective of our study is to investigate the expression of IL-17A and F in biopsies of severe asthmatics, and compare them with moderate and mild asthmatics as well as control subjects and relate this expression to that of IL-8 and neutrophilia. The expression of IL-17A and F mRNA and protein was evaluated in bronchial biopsies using immunocytochemistry and real-time PCR. The expression of both IL-17A and F were shown to be increased in severe asthmatic airways compared to mild asthmatics and control subjects. IL-17A was mostly expressed in mononuclear cells present in the subepithelial tissue within clusters of inflammatory cells, whereas IL-17F was expressed not only in inflammatory cells but also in epithelial cells. This observation was confirmed using laser capture microdissection. Our results are consistent with the possible role of IL-17 family in steroid hyperresponsive disorders, including rheumatoid arthritis, psoriasis and refractory asthma. We suggest that both IL-17A and F contribute to severe asthma inflammatory and airway remodelling pathology. Our findings further the knowledge on severe asthma disease and open new options to / Le processus inflammatoire et le remodelage des voies respiratoires sont typiquement liés à la pathologie de l'asthme réfractaire. Bien que l'asthme réfractaire n'affecte que 10% des asthmatiques, ce sous-groupe de patients est caractérisé par une plus grande morbidité, mortalité ainsi qu'un besoin disproportionné des services des soins de santé. Il semble que l'asthme réfractaire utilise un mécanisme d'inflammation distinct de celui associé à l'asthme léger et modéré. Il y a une augmentation de l'infiltration des neutrophiles, une régulation positive de l'IL-8 ainsi qu'une dérégulation des cytokines Th-2. Les cytokines IL-17A et F sont pro-inflammatoires, pro-fibrotiques et sont principalement produites par les cellules Th-17. Ces cytokines peuvent agir sur plusieurs types de cellules afin d'induire la production de cytokines, chémokines et métalloprotéinases. De plus, ces deux cytokines jouent un rôle prédominant dans l'activité des neutrophiles. Nous faisons l'hypothèse que l'IL-17A et F sont exprimées dans les voies respiratoires des asthmatiques et qu'elles sont augmentées dans l'asthme réfractaire. Cette étude a pour but d'investiguer l'expression de l'IL-17A et F sur biopsies provenant d'asthmatiques réfractaires et d'en faire la comparaison à celles provenant d'asthmatiques légers, modérés ainsi que de sujets sains et de relier cette expression à celle de l'IL-8 et de la neutrophilie. L'expression des ARNm et des protéines de l'IL-17A et F a été évaluée sur biopsies par immunocytochimie et ‘real-time PCR'. Il a été démontré que l'expression de l'IL-17A et F est augmentée dans les voies aériennes des asthmatiques réfractaires en comparaison aux asthmatiques légers et sujets sains. L'IL-17A est principalement exprimée par les cellules mononucléaires des tissus des régions sous-épithéliales parmi les grappes de cellules inflammatoires. L'IL-17F n'est pas uniquement exprimée par les cellules inflammatoi

Fusarium head blight (FHB), caused by Fusarium graminearum is a devastating disease of barley (Hordeum vulgare L.). Resistance in barley to FHB is quantitatively inherited and breeding for resistance is the most viable option to manage this disease. Though several FHB resistance quantitative trait loci (QTL) have been identified, the mechanism(s) of resistance is still unclear. A technology to uncover the mechanisms of resistance to FHB to aid in breeding for resistance is of immediate need for barley breeders. Metabolic profiling was applied to distinguish resistance in barley to FHB. This investigation reports three progressive studies. The first study explored the metabolic phenotyping of resistance in two barley recombinant inbred lines (RIL), H106-4 (resistant) and H106-371 (susceptible) against FHB. This study identified several resistance related (RR) metabolites. The second study was conducted to validate the RR metabolites identified in study-I, and also to identify novel RR metabolites. In study-II, five very resistant two-row genotypes, 'CIho4196', 'Zhedar-1', 'Zhedar-2', 'Fredrickson', 'Harbin-2r' and a susceptible CH9520-30 were phenotyped based on metabolic profiling. RR metabolites occurring in more than one genotype were considered potential biomarkers. In study-III, four RILs, two each of black and yellow barley, varying in resistance to FHB were phenotyped for resistance against trichothecene-producing and nonproducing (tri5-) isolates of F. graminearum based on metabolic profiling. The metabolites were extracted from mock-inoculated or F. graminearum-inoculated spikelets using aqueous methanol and analyzed using LC-ESI-LTQ-Orbitrap. Data was analyzed through XCMS and CAMERA bioinformatics tools. Compounds were identified based on accurate mass, fragmentation pattern and carbon-isotopic ratio. Thousands of peaks were detected, of which hundreds of treatment significant peaks were selected based on t-tests. These treatment significant metabolites were classified into resistance related constitutive (RRC) or induced (RRI). Barley resists FHB, through jasmonate-signaling and phenylpropanoids. Jasmonate was induced against trichothecene producing but not against the nonproducing isolate, tri5- mutant. All barley genotypes detoxified Deoxynivalenol DON to DON-3-O-glucoside. Potential biomarkers were selected based on their significant abundance, common occurrence and plant defense properties. The potential biomarker metabolites included mainly phenylpropanoids: phenylalanine, p-coumaric acid, cinnamic acid, sinapaldehyde, sinapoyl alcohol, coniferaldehyde, caffeyl aldehyde and coumarin; Flavonoids: catechin and naringenin; fatty acids: jasmonic acid and linolenic acid; resistance indicator (RI) metabolites: total DON produced (TDP) and proportion of DON converted to DON-3-O-glucoside (PDC). / La fusariose de l'épi (FHB), causée par Fusarium graminearum, est une maladie dévastatrice de l'orge. La résistance à la fusariose est héritée de façon quantitative. La résistance à la fusariose est très variable rendant son évaluation difficile. Quoique plusieurs locus de résistance à caractère quantitatif (QTL) ont été identifiés pour la FHB, le(s) mécanisme(s) de résistance demeurent obscur(s). Les sélectionneurs d'orge se doivent de développer une technologie permettant d'identifier le(s) mécanisme(s) de résistance à la fusariose et d'en tirer un outil de sélection. Le profilage métabolomique servit au dépistage de la résistance à la FHB. Cette enquête consista en trois volets successifs. Le premier explora la résistance métabolique à la fusariose dans deux lignées d'orge autofécondées et recombinantes (RIL), soit H106-4 (résistante) et H106-371 (sensible). Cette étude identifia plusieurs métabolites liés à la résistance (MLR). Visant à valider l'importance de ces MLR et d'en identifier de nouveaux, le second volet se pencha sur cinq génotypes d'orge distique très résistants ('CIho4196', 'Zhedar-1', 'Zhedar-2', 'Fredrickson' et 'Harbin-2r') ainsi qu'un génotype sensible (CH9520-30). Les MLR présents dans plus d'un génotype résistant furent considérés comme biomarqueurs potentiels. La résistance métabolique de quatre RIL (deux d'orge jaune et deux d'orge noire) différant en leur résistance à la FHB, envers des isolats de F. graminearum producteurs ou non-producteurs de trichothécènes (tri5+/tri5) fut évaluée. Les métabolites d'épillets non-inoculés ou inoculés avec F. graminearum, extraits dans un mélange méthanol-eau, furent analysés grâce à un système LC-ESI-LTQ-Orbitrap. Les outils de bioinformatique XCMS et CAMERA analysèrent des données et identifièrent les composés par leur spectrogramme de masse. Parmi les milliers de pics détectés, les centaines s'avérant liés de manière significative (t-test) aux traitements furent classés selon qu'ils soient liés à une résistance constitutive (RRC) ou induite (RRI). L'orge résiste à la fusariose grâce à une signalisation par le jasmonate et la production de phénylpropanoïdes. Les trichothécènes induirent le jasmonate, mais aucune induction n'eut lieu avec le mutant tri5-. Les génotypes d'orge dégradèrent tous le DON en DON-3-O-glucoside. Parmi ces métabolites biomarqueurs se trouvent des phénylpropanoïdes: la phénylalanine, l'acide p-coumarique, l'acide cinnamique, la sinapaldéhyde, l'alcool sinapylique, la coniféraldéhyde, l'aldéhyde caffeyl et de la coumarine; les flavonoïdes: la catéchine et la naringénine; des acides gras: l'acide jasmonique et l'acide linolénique; des métabolites de résistance induite: production globale de DON (TDP) et proportion de DON convertie en DON-3-O-glucoside (PDC).

The genus Anoplonyx Marlatt belongs to the more generalized of the Nematinae and is clearly defined taxonomically (Ross, 1937). This genus is comprised of very few known species, four in North America and four in Europe; all are associated with Larix. The species are closely similar and difficult to distinguish, especially in the adult stage.

The genus Cinara Curtis comprises approximately 175 described species, all of which feed exclusively on coniferous trees and shrubs. The majority of these species occur in the North Temperate Zone, being found in North America, Europe, Asia, the British Isles, North Africa, Japan, Korea and Formosa. A few species occur in the South Temperate Zone of Soutih Africa and Australia. [...]

Age Related Macular Degeneration (AMD) is the most common cause of vision loss among the elderly in developed countries. It occurs primarily in individuals over the age of 50. Currently, 1.75 million people in the US suffer from the advanced form of AMD. AMD is characterised as an abnormality of retinal pigment epithelium (RPE) and/or choroid leading to photoreceptor degeneration of central retina (macula). There are two forms of AMD: Dry AMD (characterized by the build-up of drusen between the choroid and RPE layer resulting in RPE and photoreceptor cell death) and Wet AMD (characterized by abnormal blood vessel growth from the choroid into the retinal pigment epithelium). Current pharmacotherapies in AMD include anti-angiogenics (anti-VEGF) such as Macugen, Avastin, and Lucentis. Thus current research is focusing on trying to form combination therapies (such as anti-VEGF and other agents) to achieve better clinical efficacy. We will be investigating the compound 3,4 dihydroxyphenyl ethanol (DPE), which is a polyphenol present in virgin olive oil known to have antioxidant, anti-angiogenic, anti-inflammatory, and antithrombotic properties. Previous studies have investigated DPE and its ability to prevent cardiovascular diseases and treat different types of cancer. We believe that DPE can reduce angiogenic signalling in the macula. Our objective is to assess the potential utility of DPE as a therapeutic agent in combination with anti-VEGF drugs. ARPE-19 cells were treated with 0.25 mg/ml bevacizumab to study the effects of bevacizumab on the secretion of pro-angiogenic cytokines. The cells were then treated with 100M DPE for 24 hours in culture in both normoxic and CoCl₂-simulated hypoxic conditions. RPE cells were also treated with the combination of DPE and bevacizumab in order to determine the effectiveness of the combination therapy on RPE cells. Media was then harvested after 24 hours for sandwich ELISA-based angiogenesis arrays. The secretion of the following 10 pro-angiogenic cytokines was measured: Angiogenin, ANG-2, EGF, bFGF, HB-EGF, PDGF-BB, Leptin, PlGF, HGF, and VEGF-A. The secretion of three (Angiogenin, ANG-2, and EGF) was increased following treatment with bevacizumab, however only Angiogenin was significant. Angiogenin and VEGF-A were secreted under normoxia, and significantly increased under CoCl₂-simulated hypoxia, whereas ANG-2, HB-EGF, and PlGF were increased under hypoxia. Following treatment with DPE, levels of Angiogenin and VEGF-A were significantly reduced under normoxia, whereas secretion of all 5 secreted cytokines were significantly decreased under hypoxia. The combination of DPE and bevacizumab significantly reduced the secretion of Angiogenin under both normoxic and hypoxic conditions compared to bevacizumab alone. Considering the implications of angiogenesis in AMD, these studies could provide the framework for future studies to further investigate a potential therapeutic role for DPE. DPE may reduce the secretion of pro-angiogenic cytokines, such as Angiogenin, that are up-regulated following treatment with bevacizumab as a possible compensatory mechanism. Therefore, the combination of DPE and bevacizumab may represent a valuable therapeutic option for the wet form of AMD. / La dégénérescence maculaire liée à l'âge (DMLA) est la cause la plus fréquente de la perte de la vision chez les personnes âgées dans les pays développés. Il survient principalement chez les personnes âgées de plus de 50 ans. Actuellement, 1,75 millions de personnes aux États-Unis souffrent de la forme avancée de la DMLA. La DMLA se caractérise par une anomalie de l'épithélium pigmentaire rétinien (EPR) et / ou de la choroïde, conduisant à la dégénérescence des photorécepteurs de la rétine centrale (macula). Il existe deux formes de DMLA: la DMLA de type sèche (caractérisée par l'accumulation de petites taches blanches sous la rétine (drusen) entre la choroïde et l'EPR résultant en la mort des cellules photoréceptrices) et la DMLA de type humide (caractérisée par une croissance anormale de néovaisseaux choroïdiens (NVC) sous l'épithélium pigmentaire de la rétine). Les pharmacothérapies actuelles pour traiter la DMLA comprennent les anti-angiogéniques (anti-VEGF), tels que Macugen, Avastin et Lucentis. Ainsi la recherche actuelle se concentre à essayer de former des combinaisons thérapeutiques (tels que des agents anti-VEGF et d'autres) pour parvenir à une meilleure efficacité clinique. Nous examinerons le 3,4 dihydroxyphenyl ethanol (DPE), qui est un polyphénol présent dans l'huile d'olive vierge connu pour avoir des propriétés antioxydantes, anti-angiogéniques, anti-inflammatoire, et des propriétés antithrombotiques. Des études antérieures sur le DPE ont démontré sa capacité à prévenir les maladies cardio-vasculaires et traiter les différents types de cancer. Nous croyons que le DPE peut réduire la signalisation angiogénique dans la macula. Notre objectif est d'évaluer la potentielle utilité de DPE comme agent thérapeutique en combinaison avec des médicaments anti-VEGF. Les cellules ARPE-19 ont été traitées avec 0,25 mg/ml de bevacizumab pour étudier les effets du bevacizumab sur la sécrétion de cytokines pro-angiogéniques. Ces cellules ont ensuite été traitées avec 100µM de DPE en culture pendant 24 heures à la fois dans des conditions normoxiques et des conditions simulé hypoxiques (CoCl₂). Les cellules de l'EPR ont également été traitées avec la combinaison de DPE et de bevacizumab en vue de déterminer l'efficacité de la thérapie avec cette combinaison sur les cellules de l'EPR. Le milieu de culture a ensuite été récolté après 24 heures pour proceder au sandwich ELISA pour tester l'angiogenèse. La sécrétion des 10 suivants cytokines pro-angiogéniques a été mesurée: Angiogenin, ANG-2, EGF, bFGF, HB-EGF, PDGF-BB, Leptin, PlGF, HGF, and VEGF-A. La sécrétion de trois d'entre eux (Angiogenin, ANG-2, et EGF) a été augmentée à la suite du traitement par bevacizumab, mais seulement celle de l'Angiogenin a été significative. L'Angiogenin et le VEGF-A ont été sécrétés sous normoxie, et ont considérablement augmenté en vertu de l'hypoxie simulée par CoCl₂, alors que le ANG-2, le HB-EGF et le PlGF ont été augmentée en vertu de l'hypoxie. Après le traitement avec DPE, les niveaux de Angiogenin et le VEGF-A ont été considérablement réduits en normoxie, tandis que la sécrétion de toutes les 5 cytokines sécrétées a été significativement diminuée sous l'hypoxie. La combinaison de la DPE et du bevacizumab a considérablement réduit la sécrétion de l'Angiogenin dans des conditions à la fois normoxiques et hypoxiques en comparaison avec le bevacizumab utilisé seul. Considérant les implications de l'angiogenèse dans la DMLA, ces études pourraient servir de base pour de futures études pour pousuivre les recherches sur le rôle thérapeutique potentiel du DPE. Le DPE peut réduire la sécrétion de cytokines pro-angiogéniques, comme celle de l'Angiogenin, qui augmentent après un traitement par le bevacizumab comme un possible mécanisme compensatoire. Par conséquent, la combinaison du DPE et du bevacizumab peut représenter une option thérapeutique valable pour la forme humide de la DMLA.

Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is a slow, progressive disorder which results in a gradual loss of lung function. Cigarette smoke is a major risk factor for COPD, although biomass fuel, outdoor air pollution, bacteria and childhood respiratory viruses have all been proposed to play a role in the disease. The sustained inflammation typical of COPD is characterized by inflammatory cytokine production and the recruitment of several cell types to the lungs, most specifically CD8+ T cells. These cytotoxic cells are increased in both the central and peripheral airways of COPD patients, and are normally located within the submucosa and invading the epithelium. Toll-like receptors (TLR) are transmembrane receptors which respond to foreign microbes through specific pathogen-associated molecular patterns. Once a pathogen breaches the epithelium, the first line of defense of the airways, these receptors are activated and elicit an appropriate inflammatory response. Consequently, there has been growing interest in the role of TLRs in COPD as a site for potential therapy. We hypothesized that TLR expression is increased in COPD patients compared to control subjects and that this increase is mediated by cigarette smoke exposure. Bronchial biopsies, peripheral blood, and primary cells were used to investigate the expression and regulation of TLRs in response to cigarette smoke exposure. The bronchial biopsies from COPD patients and healthy control subjects had similar TLR4 and TLR9 expression in the submucosa as well as in the epithelial layer. Interestingly, patients with COPD had 90% of lung CD8+ T cells express TLR4 and TLR9 compared to less than 20% in control subjects. In contrast, peripheral blood CD8+ T cells lacked significant TLR expression in both groups. This suggests that cigarette smoke may be causing the increased TLR expression locally in the lungs of COPD patients, as this was not observed in control subjects or peripheral blood. CD8+ T cells isolated from COPD patients and exposed to cigarette smoke increased the protein expression of TLR4 and TLR9, as well as several inflammatory cytokines including, IL-1β, IL-6, TNF-α, and IFN-γ. Normal human bronchial epithelial cells (NHBE) exposed to cigarette smoke were able to produce more IL-8 than COPD-diseased human bronchial epithelial cells (DHBE) indicating a potential failure in immune function in the diseased cells. Finally, with the use of signaling pathway inhibitors, it was demonstrated that the IL-8 induction was both TLR4- and extracellular regulated kinase (ERK) 1/2- dependent in epithelial cells.Collectively, the data of this thesis demonstrates the complex role of TLRs in COPD pathogenesis. Our study reveals that there are cell-specific mechanisms by which cigarette smoke induces TLR-dependent inflammatory cytokine production. Furthermore, it seems that TLRs play a dual role in COPD, by initiating inflammation following cigarette smoke exposure, as was seen with the epithelial cells, as well as perpetuating the inflammation in diseased patients, as was demonstrated with the CD8+ T cells. This research is a first step towards understanding the complex relationship between specific lung cell types in COPD pathogenesis in response to cigarette smoking and suggests that the use of anti-TLR therapy may be beneficial in alleviating inflammation. / La maladie pulmonaire obstructive chronique (MPOC) est un trouble évoluant lentement et progressivement qui est caractérisé par une perte graduelle de la fonction pulmonaire. La fumée de cigarette est un facteur de risque majeur de la MPOC, mais il a été proposé que les combustibles à base de biomasse, la pollution de l'air, les bactéries, et les virus respiratoires infantiles jouent aussi un rôle dans la maladie. L'inflammation typique de la MPOC est caractérisée par la production de cytokines inflammatoires et le recrutement pulmonaire de plusieurs types de cellules, mais principalement de cellules T CD8+. Ces cellules cytotoxiques augmentent en nombre dans les voies respiratoires centrales et périphériques, et sont généralement situées à l'intérieur des sous-muqueuses et de l'épithélium. Les récepteurs de type Toll (TLR) sont des récepteurs transmembranaires qui utilisent des voies moléculaires spécifiques pour répondre à des microbes. Lorsqu'un pathogène passe à travers la première ligne de défense des voies respiratoires, soit l'épithélium, ces récepteurs sont activés et provoquent une réponse inflammatoire. Le rôle des TLRs dans la MPOC suscite un intérêt grandissant, vu leur utilisation potentielle dans le traitement de la maladie. Notre hypothèse est que l'expression des TLR est plus élevée chez les patients souffrant de la MPOC que chez les sujets contrôles, et que l'exposition à la fumée de cigarette joue un rôle dans cette augmentation. Nous avons utilisé des biopsies de bronches, du sang périphérique, et des cellules primaires pour étudier l'expression des TLRs suite à une exposition à la fumée de cigarette. Les biopsies bronchiales des patients souffrant de MPOC et les sujets contrôles avaient une expression similaire de TLR4 and TLR9 dans les sous-muqueuses, ainsi que dans la couche épithéliale. Dans les poumons, 90% des cellules T CD8+ des patients souffrant de MPOC expriment TLR4 et TLR9, comparé à 20% chez les contrôles. Par contre, dans le sang périphérique, les cellules T CD8+ n'expriment pas les TLRs de façon significative, et ce dans les deux groupes. Ceci suggère que la fumée de cigarette pourrait être la cause de l'augmentation des TLR spécifiquement dans les poumons de patients souffrant de la MPOC, puisque cette augmentation n'a pas été observée chez les contrôles, ni dans le sang périphérique. Les cellules T CD8+ isolées de patients souffrant de la MPOC et exposées à de la fumée de cigarette augmentent non seulement l'expression de TLR4 et TLR9, mais aussi l'expression de diverses cytokines inflammatoires telles que IL-1β, IL-6, TNF-α, et IFN-γ. Suite à une exposition à la fumée de cigarette, les cellules épithéliales bronchiales humaines normales (EBHN) ont été capable de produire plus d'IL-8 que les cellules épithéliales bronchiales humaines malades de MPOC (EBHM), ce qui indique un échec potentiel de la fonction immunitaire des cellules malades. En dernier lieu, avec l'aide d'inhibiteurs de voies métaboliques, nous avons montré que l'induction d'IL-8 est dépendante de TLR4 et de la kinase régulée de façon extracellulaire (ERK) 1/2 dans les cellules épithéliales.Mises ensemble, les données de cette thèse montrent un rôle complexe des TLRs dans la MPOC. Notre étude révèle qu'il existe des mécanismes spécifiques à certaines cellules par lesquels la fumée de cigarette induit une production de cytokines inflammatoires en passant par les TLRs. Il semble d'ailleurs que les TLRs jouent un double rôle dans la MPOC, en initiant l'inflammation suite à l'exposition à la fumée de cigarette, tel que montré avec les cellules EBHN, et en perpétuant l'inflammation chez les patients malades, tel que montré avec les cellules T CD8+. Cette recherche est un premier pas vers la compréhension de la relation entre les différents types cellulaires pulmonaires dans la MPOC en réponse à la fumée de cigarette, et suggère que l'utilisation d'un traitement anti-TLR pourrait être bénéfique pour diminuer l'inflammation.

Infant vocalization undergoes dramatic changes during the transition from newborn cooing and infant babbling toward the production of meaningful speech. However, the processes underlying these changes are not fully understood, particularly at the age at which ambient language input begins to influence infant babbling. The aim of this study was to describe the babbling produced by Arabic infants―using acoustic and phonetic metrics―and then examine the effects of linguistic environmental input on babbling by comparing the babble produced by Arabic infants to that produced by English and French infants. Speech samples were collected from infants learning Arabic (N = 31; age: 281-591 days), English (N = 20; age: 303-553 days) or French (N = 23; age: 311-566 days). Each utterance was transcribed according to the International Phonetic Alphabet and then coded according to infraphonological categories. Two studies were conducted. Study one aimed to describe the vowel space of Arabic infants and then compare it to the vowel space of English and French infants. First (F1) and second (F2) formant frequencies were identified in all vowels produced with full resonance, normal phonation, and speech-like duration. These F1 and F2 frequencies were used to calculate the compact-diffuse (F2 - F1) and grave-acute ([F2+F1]/2) values for each vowel so that the extreme corners of each infant's vowel space could be identified. Multiple regression and analysis of variance analyses were used to examine the effects of language and age on the infant vowel space (centre, corners, and area of the space). Developmental changes in the expansion of the vowel space toward the grave corner were observed in all language groups. In addition, a language-specific pattern of changes on the vowel space were observed with age: Arabic infants showed unchanged F1 and F2 values at the centre of the space, expansion toward the compact corner, a larger vowel space than infants in the other language groups at all ages studied; French infants showed a decreased F1 and unchanged F2 values at the centre, an expansion toward the diffuse corner, and a shrinking from the acute corner toward the center of the vowel space; and English infants showed decreased F2 values but unchanged F1 values at the centre of the vowel space. Study two aimed to describe the consonantal repertoires of Arabic infants and then compare these consonantal repertoires across three infant language groups. Infants were organized into three age groups (10-12, 12-15 and 15-18 months), and the consonants produced in canonical (CS) and marginal (MS) syllables with normal phonation were grouped into manner and place categories. Analysis of variance revealed no significant crosslinguistic differences in the frequency of production of any manner or place categories.This study showed developmental and language-specific changes in the infant vowel space when vowels were submitted to acoustic analysis. However, early crosslinguistic differences in vowel space were not accompanied by crosslinguistic differences in the consonantal repertoires based on phonetic transcription analyses. The overall findings from the current study provide evidence for the interactional hypothesis and suggest that the development of infant babbling is influenced by a complex interaction of endogenous and exogenous processes including biological development of the vocal tract and language input from the ambient environment. / La vocalisation du nourrisson subit des changements importants, du gazouillis du nouveau-né et du babillage du bébé vers la production de la parole significative. Cependant, on ne comprend pas entièrement les processus sous-jacents à ces changements, en particulier l'âge auquel l'acquisition de la langue ambiante commence à influencer le babillage. L'objectif principal de cette étude était de décrire le babillage des tout-petits apprenant l'arabe à l'aide de mesures acoustiques et phonétiques et d'examiner les effets de l'apport de l'environnement linguistique sur le babillage infantile en comparant le babil produit par les jeunes enfants arabes à celui d'enfants apprenant l'anglais ou le français. Des échantillons de parole ont été recueillis auprès de jeunes enfants apprenant l'arabe (N=31; tranche d'âge: 281-591 jours), l'anglais (N=20; tranche d'âge: 303-553 jours) ou le français N=23; tranche d'âge: 311 à 566 jours). Chaque énoncé a été transcrit conformément à l'API, puis codé selon les catégories infraphonologiques.Deux expériences ont été menées. La première visait à décrire l'espace vocalique acoustique des jeunes enfants arabes, et de le comparer à celui de jeunes enfants anglais et français. Les 1res (F1) et 2es (F2) fréquences de formants ont été identifiées dans toutes les voyelles produites avec pleine résonance, phonation normale et durée comme celle de la parole. F1 et F2 ont été utilisées pour calculer les valeurs compact-diffus (F2 - F1) et grave-aigu ([F2 + F1] / 2) pour chaque voyelle, pour identifier les coins extrêmes de l'espace vocalique de chaque enfant. La régression multiple et l'observation des analyses de variance ont été utilisées pour examiner les effets de la langue et de l'âge sur l'espace vocalique infantile (centre, coins, et zone de l'espace). Des changements développementaux dans l'expansion de l'espace vocalique vers le coin grave ont été observés dans tous les groupes linguistiques. De plus, un modèle de changements spécifique au langage de l'espace vocalique a été observé avec l'âge: les enfants arabes ont montré des valeurs F1 et F2 inchangées au centre de l'espace, une expansion vers le coin compact, un espace vocalique plus grand que les enfants des autres groupes de tous les âges étudiés. Les enfants français ont montré une diminution de F1 et des valeurs F2 inchangées au centre, une expansion vers le coin diffus, et un rétrécissement du coin aigu vers le centre de l'espace vocalique et les enfants anglais ont montré une diminution des valeurs F2 et des valeurs F1 inchangées au centre de l'espace vocalique. La deuxième expérience visait à décrire les répertoires consonantiques des enfants arabes et de comparer ces répertoires consonantiques dans trois groupes linguistiques de jeunes enfants. Les consonnes qui ont été produites dans les syllabes canoniques (CS) et marginales (MS) avec la phonation normale ont été incluses dans l'analyse. Les enfants ont été divisés en trois groupes (10-12, 12-15 et 15-18 mois), et les consonnes, regroupées en catégories phonétiques en fonction de la manière et du lieu de production. L'analyse de variance n'a pas révélé de différences significatives translinguistiques dans la fréquence de production pour toutes catégories de manière ou lieu.L'étude a montré des changements développementaux et spécifiques au langage dans l'espace vocalique des tout-petits quand les voyelles ont été soumises à une analyse acoustique. Cependant, des différences translinguistiques précoces dans l'espace vocalique n'étaient pas accompagnées par des différences translinguistiques dans les répertoires consonantiques selon les analyses de transcription phonétique. L'étude actuelle a fourni des preuves de l'hypothèse interactionnelle et suggère que le développement du babillage infantile est influencé par une interaction complexe des processus endogènes et exogènes, notamment le développement biologique du conduit vocal et la langue de l'environnement ambiant.

The first independant treatment of the acridoid family Orthoptera, Pyrgomorphidae, was that of Bolivar (1884). A revision was published later by Bolivar (1904-5) and this was summarised with s1ight modification shortly afterwards (Bolivar, 1909). No comprehensive review has been pub1ished subsequently, although a revision of the tribal arrangement was recently the subject of study by Akbar (1963) who gives a full review of the various changes that have occurred at the suprageneric level up to the present. [...]

Forage legumes are particularly important in the Province of Quebec. In 1961, hay (grass and legumes) occupied 67% of the crop area and was worth $97,307,000. or 55·8% of the total value of field crops. Improved pastures, not included in the above figures, occupied over 2,000,000 acres (Anon, 1961). Since alfalfa, birdsfoot trefoil, red, alsike, and ladino clovers are dominant in this hay crop, their agricultural importance is apparent. This, together with the fact that alfalfa is a common rotation crop, led to the choice of this plant for study. [...]