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Identificação e caracterização de uma nova heme peroxidase exclusiva de plantas

Lazzarotto, Fernanda January 2011 (has links)
Peroxidases são enzimas amplamente distribuídas nos organismos, sendo de fundamental importância para o seu desenvolvimento. Atuam reduzindo o peróxido de hidrogênio à água, minimizando, assim, o dano celular em condições de estresse e modulando as respostas celulares que utilizam o peróxido de hidrogênio como molécula sinalizadora. Através de análises em bancos de depósito de genomas, uma provável nova heme-peroxidase (ascorbate peroxidase-related ou APx-R) foi identificada. APx-R é uma proteína exclusiva de plantas e está presente desde organismos basais, como algas, até angiospermas. Diferentemente de outras peroxidases, geralmente codificadas por pequenas famílias gênicas originadas a partir de eventos de duplicação, APx-R se apresenta como um gene cópia-única em todos os genomas de plantas já sequenciados e disponibilizados. Apesar de haver grande similaridade de estrutura proteica entre APx e APx-R, APx-R possui um grande número de substituições conservadas em domínios críticos, sugerindo que esta proteína provavelmente se originou de algum membro da família das ascorbato peroxidases, mas acumulou mutações suficientes de forma que não pode mais ser considerado um membro desta família. Para verificar a localização subcelular de APx-R, protoplastos de arroz foram transfectados com uma construção de fusão traducional APx-R::YFP, sob o controle do promotor 35S. A visualização da florescência foi feita através de microscopia confocal e revelou que APx-R é uma proteína de dupla-localização, a qual pode localizar-se tanto nas mitocôndrias quanto nos cloroplastos. Análises de BiFC mostraram que APx-R pode interagir com as APx presentes nos mesmos compartimentos subcelulares, indicando que estas proteínas podem estar atuando de forma sinérgica no metabolismo de detoxificação do peróxido de hidrogênio. Para caracterizar APx-R funcionalmente, mutantes de arroz superexpressando RNA de interferência objetivando silenciar o gene OsAPx-R foram obtidos através de transformação via Agrobacterium tumefaciens. As plantas RNAi-OsAPx-R apresentaram alterações no metabolismo do peróxido de hidrogênio quando comparadas às plantas não-transformadas, mostrando diferenças nas atividades de SoD. Cat e APx, suportando a provável participação de APx-R na defesa contra o estresse. Assim, estes resultados mostraram que OsAPx-R codifica uma proteína funcional, a qual está relacionada com o sistema antioxidante e é requerida na resposta a estresses, provavelmente atuando na proteção dos cloroplastos e mitocôndrias, ambas organelas com intensa formação de espécies reativas de oxigênio. / Peroxidases are widely distributed in all organisms, being of fundamental importance for their development. These enzymes act reducing hydrogen peroxide into water, minimizing cellular damage in stressful conditions and modulating cell responses through hydrogen peroxide signaling. From analysis in public genomic databases, a putative new heme-peroxidase (ascorbate peroxidase-related or APx-R) was identified. APx-R is exclusive of plants and present from basal to vascular organisms. Unlike other peroxidases, usually encoded by large genic families originated from duplication events, APx-R is present as a single-copy gene in all available plant genomes. Despite the high structure similarity between APx and APx-R proteins, APx-R presents a great number of conserved substitutions in critical domains, suggesting that this protein probably emerged from the family of ascorbate peroxidases, but accumulated enough mutations so it cannot be grouped in this family anymore. To access subcellular localization, rice protoplasts were transfected with a translational fusion of yellow fluorescent protein (YFP) to APx-R protein under the control of the 35S promoter. Fluorescence visualization was performed by confocal microscopy and revealed that APx-R is a dual-target protein targeted to chloroplasts and mitochondrias. BiFc analysis showed that APx-R can interact with APx proteins which are present in the same subcellular compartments, indicating that these proteins may be acting synergistically in hydrogen peroxide scavenging metabolism. To further characterize APx-R in antioxidant metabolism, rice mutants expressing interference RNA for APx-R gene were obtained through Agrobacterium tumefaciens transformation. RNAi-silenced plants presented a disturbed hydrogen peroxide metabolism in comparison to non-transformed plants, with differences in SoD, Cat and APx activity, supporting the participation of APx-R in stress defense. Altogether, these results showed that OsAPx-R encodes a functional protein, which is related to the antioxidant system and required in stress response, probably acting in chloroplast and mitochondria protection, both organelles with intense reactive oxygen species formation.
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Valor prognóstico da mieloperoxidase na doença arterial coronariana

Roman, Raquel Melchior January 2006 (has links)
Resumo: Mieloperoxidase (MPO) é uma enzima derivada de leucócitos que cataliza a formação de numerosas espécies reativas oxidantes. Além de integrante da resposta imune inata, evidências têm comprovado a contribuição destes oxidantes para o dano tecidual durante inflamação. A MPO participa de atividades biológicas pro-aterogências relacionadas à evolução da doença cardiovascular; incluindo iniciação, propagação e as fases de complicação aguda do processo aterosclerótico. Desta forma, MPO e sua cascata inflamatória representam um alvo atrativo para investigação prognóstica e terapêutica na doença aterosclerótica cardiovascular. Nesta revisão, apresentamos o estado da arte no entendimento das ações biológicas às evidências clínicas da relação entre MPO e doença arterial coronariana.
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Associação entre polimorfismos da mieloperoxidase e gravidade da doença arterial coronariana

Wainstein, Rodrigo Vugman January 2008 (has links)
Resumo não disponível
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Caracterização de um novo membro da superfamília de peroxidases não animais : ascorbato peroxidase-relacionada

Lazzarotto, Fernanda January 2015 (has links)
Peroxidases atuam catalisando a redução do peróxido de hidrogênio à água a fim de minimizar o dano celular e modular, direta ou indiretamente, respostas celulares dependentes da sinalização operada por esta espécie reativa de oxigênio. Análises prévias, feitas em bancos de dados de sequências genômicas, permitiram a identificação de uma nova heme peroxidase não-animal (ascorbato peroxidase-relacionada ou APx-R), a qual foi descrita pela primeira vez em 2011 em um estudo publicado pelo nosso grupo de pesquisa. O trabalho detalhado nos próximos capítulos desta tese teve como objetivo caracterizar a participação de APx-R no metabolismo antioxidante vegetal através de abordagens filogenéticas e funcionais. Os resultados apresentados nos capítulos dois e três mostram que APx-R é uma peroxidase de classe I, filogeneticamente relacionada à ascorbato peroxidase, citocromo-c peroxidase e catalase peroxidase. Em Arabidopsis thaliana, APx-R codifica uma proteína cloroplastídica que atua regulando os processos de germinação e maturação da semente. A superexpressão de APx-R in planta afetou drasticamente a viabilidade das sementes, sugerindo que os níveis de expressão deste gene devem ser rigorosamente controlados para permitir o desenvolvimento da planta. Além disso, as análises filogenéticas aqui apresentadas levaram à identificação de uma nova família de peroxidases (intitulada ascorbato peroxidase-like ou APx-L), adicionando um novo componente ao complexo sistema antioxidante vegetal. / Peroxidases act reducing hydrogen peroxide into water, minimizing cell injury and modulating cell responses through hydrogen peroxide signaling. From analysis in public genome databases, we identified a non-animal heme-peroxidase (ascorbate peroxidase-related or APx-R) present from basal to vascular plants, which was initially described in a study published by our group in 2011. The work described hereafter aimed to characterize APx-R participation in the antioxidant metabolism through phylogenetic and functional approaches. The results presented on chapters two and three showed that APx-R is a class I peroxidase, phylogenetically related to ascorbate peroxidase, cytochrome-c peroxidase and catalase peroxidase. In Arabidopsis thaliana, APx-R gene encodes a chloroplast protein which acts regulating germination and seed maturation processes. The overexpression of APx-R in planta impaired seed viability, showing that APx-R expression level must be tightly controlled in order to enable plants to develop properly. In addition, the phylogenetic analysis here presented allowed the identification of a new peroxidase family, called ascorbate peroxidase-like (APx-L), which adds a new component into plant antioxidant metabolism.
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Estudo da correlação dos níveis séricos de citocinas (IL-1β, IL-6, IL-18BP, IL-33 E TNF-α) e da atividade da mieloperoxidase com o grau de obstrução coronariana em pacientes com hipótese diagnóstica de doença isquêmica do miocárdio / Correlation of serum cytokines (IL-1β, IL-6, IL-18BP, IL-33 and TNF-α) and myeloperoxidase activity with the degree of coronary obstruction in patients with a diagnosis of ischemic myocardial disease

Lima, Antônio Augusto Guimarães January 2012 (has links)
LIMA, Antônio Augusto Guimarães. Estudo da correlação entre níveis séricos de citocinas (IL-1B , IL-6, IL-18BP, IL-33 e TNF-a) e da mieloperoxidade com o grau de obstrução coronariano em pacientes com hipótese diagnóstica de doença isquêmica do miocárdio. 2012. 126 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-07-26T13:33:25Z No. of bitstreams: 1 2012_tese_aaglima.pdf: 2963429 bytes, checksum: 20853cfe3c17625832693e8de4329703 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2013-08-06T11:54:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_tese_aaglima.pdf: 2963429 bytes, checksum: 20853cfe3c17625832693e8de4329703 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-08-06T11:54:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_tese_aaglima.pdf: 2963429 bytes, checksum: 20853cfe3c17625832693e8de4329703 (MD5) Previous issue date: 2012 / Atherosclerosis is a complex multifactorial disease characterized by accumulation of inflammatory cells, lipoproteins, and fibrous tissue in the walls of large and medium arteries. The innate and adaptive immunity, with the presence of leukocytes, mainly monocytes and lymphocytes, have an important role in this process. This participation can take place by signaling with cytokines and the release of the enzyme myeloperoxidase (MPO) by the cytoplasmic granules. Cardiovascular risk factors classically play an important role in prevention, however, the majority of patients with CV events have one or no risk factor. Therefore new biomarkers are needed to define diagnosis and prognosis. This study selected patients with a diagnosis of stable angina (SA) or acute coronary syndrome (ACS) undergoing coronary angiography and evaluated by the Gensini score (GS). Performed serum activity MPO, serum tumor necrosis factor alpha (TNF-α), interleukins (1β, 6, 18bp and 33) (IL-1β, IL-6, IL-18bp, and IL-33, respectively). In two years carried out a review of medical records or telephone interviews in 93 patients in this sample. Used to analyze the variables: atherosclerotic burden (carotid, coronary or lower limb atherosclerosis); the clinical picture in two years (asymptomatic or chest pain or death); clinical presentation (SA or ACS); cardiovascular events (stent, CABG, chest pain or death). The results combinations of cytokines and myeloperoxidase, with the variables presented demonstrate that IL-6 related in univariate analysis with the presence of atherosclerotic load (p <0.014), elevated serum levels of IL-18bp in patients with ACS both in univariate and multivariate analysis (p <0.001 and p <0.045 respectively), IL-1β was negatively correlated with the degree of GS in univariate and multivariate analysis (p <0.042 and <0.002 respectively); in a univariate analysis associated with the GS on patients who had chest pain or death, undergoing CABG, with CV events and ACS (p <0.001 for all). In multivariate analysis, patients with higher GS underwent CABG more often and had more chest pain or death (p <0.001 for all). The MPO activity showed no correlation or association with different variables. Patients with diabetes mellitus and in use of statin had higher GS (p <0.001 for both). In conclusion, patients with coronary stenosis were important predictors of cardiovascular events and more often underwent CABG. The IL-1β correlated negatively with GS and patients with at least one of the sites previously mentioned atheroclerosis had IL-6 levels elevated. IL-18bp correlated with elevated serum levels in patients with ACS. / Aterosclerose é uma doença complexa multifatorial caracterizada pelo acúmulo de células inflamatórias, lipoproteínas e tecido fibroso na parede das grandes e médias artérias. A imunidade inata e adaptativa, com a presença dos leucócitos, principalmente, monócitos e linfócitos, têm uma participação importante nesse processo. Esta participação poderá acontecer pela sinalização com as citocinas e com a liberação da enzima mieloperoxidase (MPO) pelos grânulos citoplasmáticos. Os fatores de risco cardiovasculares (CV) clássicos têm uma função importante na prevenção, porém, a maioria dos pacientes com eventos CV têm um ou nenhum fator de risco. Portanto novos marcadores biológicos são necessários para definir diagnóstico e prognóstico. Esse estudo selecionou pacientes com a hipótese diagnóstica de angina estável (AE) ou síndrome coronariana aguda (SCA), submetidos à coronariografia e avaliados pelo escore de Gensini (EG). Realizados a atividade da MPO, dosagens séricas do Fator de necrose tumoral alfa (TNF-α), interleucinas (1β, 6, 18bp e 33) (IL-1β, IL-6, IL-18bp e IL-33, respectivamente). Em 2 anos realizado revisão de prontuários ou entrevistas por telefone em 93 pacientes desta amostra. Utilizado na análise as variáveis: carga aterosclerótica (aterosclerose em carótidas ou coronárias ou em membros inferiores); quadro clínico em 2 anos (assintomático ou dor torácica ou morte); apresentação clínica (AE ou SCA); eventos cardiovasculares (stent, cirurgia de revascularização miocárdica (CRM), dor torácica ou morte). Os resultados das associações das citocinas e MPO com as variáveis apresentadas demonstraram que a IL-6 relacionou-se em análise univariada com presença de carga aterosclerótica (p<0,014); níveis séricos elevados da IL-18bp associou-se em pacientes com SCA, tanto na análise uni e multivariada (p<0,001 e p<0,045 respectivamente); a IL-1β apresentou correlação negativa com o grau do EG na análise univariada e multivariada (p<0,042 e <0,002 respectivamente); em uma análise univariada o EG associou-se com pacientes que apresentaram dor torácica ou óbito, submetidos à CRM, com eventos CV e com SCA (p<0,001 em todos). Na análise multivariada os pacientes com EG mais elevados submeteram-se mais frequentemente a CRM e apresentaram mais dor torácica ou óbito (p<0,001 em todos). A atividade da MPO não apresentou correlação ou associação com as diversas variáveis analisadas. Pacientes portadores de Diabetes mellitus e em uso de estatinas apresentaram EG mais elevados (p<0,001 nos dois). Como conclusão, pacientes com obstruções coronarianas importante foram preditores de eventos cardiovasculares e mais frequentemente foram submetidos à CRM. A IL-1β correlacionou-se negativamente com o EG e pacientes com algum sítio de aterosclerose apresentaram IL-6 elevados. A IL-18bp orrelacionou-se com níveis séricos elevados em pacientes com SCA.
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Materiais hierarquicamente estruturados com fase cúbica mesoporosa: síntese, caracterização e uso como suporte na imobilização da enzima HRP / Materials hierarchically structuralized with mesoporosa cubical phase: synthesis, characterization and use as support in the immobilization of enzyme HRP

Loiola, Adonay Rodrigues January 2009 (has links)
LOIOLA, A. R.; Materiais hierarquicamente estruturados com fase cúbica mesoporosa: síntese, caracterização e uso como suporte na imobilização da enzima HRP. 2009. 124 f. Tese (Doutorado em Química Inorgânica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2009. / Submitted by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2014-10-15T18:37:50Z No. of bitstreams: 1 2009_tese_arloiola.pdf: 7284991 bytes, checksum: 7db2580a35b28f28187e6da83c68be1f (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2015-03-05T18:01:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_tese_arloiola.pdf: 7284991 bytes, checksum: 7db2580a35b28f28187e6da83c68be1f (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-05T18:01:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_tese_arloiola.pdf: 7284991 bytes, checksum: 7db2580a35b28f28187e6da83c68be1f (MD5) Previous issue date: 2009 / Hierarchical silica porous materials have been successfully synthesized using polystyrene nanospheres as macropore template, triblock copolymer Pluronic F127 as mesopore template, tetramethyl orthosilicate as silica source and ethanol as cosurfactant. The obtained materials were characterized by XRD, TG-DTA, N2 adsorption, Hg porosimetry, SEM, HRSEM, TEM and AFM. These materials consist of a system of macropores with diameters of ca. 300 nm whose walls are filled with mesoporous material with an average pore of diameter 10 nm. The materials are also integrated with non-crystalline micropores. The synthesized hierarchical materials have been obtained both as powder and as monoliths, which shows that this material can be generated according to specific necessities. The XRD pattern indicates one sample with structure Fm3 m, which consists of the mesopores organized in a face-centred cubic arrangement. High-resolution scanning electron microscopic analyses revealed silica forming envelope-like structure around the polystyrene nanospheres, giving rise to other macroporous sites. This fact implies the formation of channel systems in which two macropores types co-exist. The hierarchical porous materials exhibited a BET surface area up to 469 m2 g-1, and macroporous area of 55 m2 g-1. The synthesized materials have also been suitable as support for enzyme immobilization (HRP – horseradish peroxidase). However, problems possibly related to the high complexity within the materials affected the biocatalyst activity / Materiais porosos hierarquicamente estruturados foram eficientemente sintetizados usando nanoesferas de poliestireno como direcionadores de macroporos, copolímero em tribloco plurônico F127 como direcionador de mesoporos, tetrametilortosilicato como fonte de sílica e etanol como cosurfactante. Os materiais obtidos foram caracterizados através de difração de raios-X a baixo ângulo, análise térmica, adsorção de N2, porosimetria de mercúrio, microscopia eletrônica de varredura, microscopia eletrônica de varredura de alta resolução, microscopia eletrônica de transmissão e microscopia de força atômica. Estes materiais consistem de um sistema de macroporos com diâmetro de aproximadamente 300 nm com paredes preenchidas por mesoporos cujos diâmetros médios são da ordem de 5 nm. Os materiais também apresentam microporosidade, mas de forma não-cristalina. Os materiais hierárquicos sintetizados foram obtidos na forma de pó e ainda sob a forma de monolitos, mostrando ser possível gerá-los de acordo com necessidades específicas. Os difratogramas de raios-X indicam que pelo menos uma amostra apresenta estrutura Fm3 m, a qual consiste de mesoporos organizados em um arranjo cúbico de face centrada. As análises de microscopia eletrônica de varredura de alta resolução revelam que a sílica forma uma estrutura em espécie de envelope em torno das nanoesferas de poliestireno, dando origem a outros sítios macroporosos. Isto implica na formação de sistemas de canais possuidores de dois tipos de macroporosidade. Os materiais hierarquicamente estruturados apresentaram áreas superficiais, calculadas pelo método de BET, de até 469 m2g-1, e área superficial de macroporos de 55 m2.g-1. Os materiais mostram-se ainda úteis na imobilização enzimática (HRP – peroxidase de raiz forte), mas problemas possivelmente relacionados à complexidade do material afetaram a atividade do biocatalisador
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Purificação, caracterização e atividade antifúngica da Mm-POX, uma peroxidase do látex de Marsdenia megalantha (GOYDER; MORILLO, 1994) / Purification, characterization and antifungal activity of Mm-POX, a peroxidase of latex Marsdenia megalantha (Goyder; MORILLO, 1994)

Oliveira, Henrique Pinho January 2013 (has links)
OLIVEIRA, H. P. Purificação, caracterização e atividade antifúngica da Mm-POX, uma peroxidase do látex de Marsdenia megalantha (GOYDER; MORILLO, 1994). 2013. 152 f. Tese (Doutorado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by Daniel Eduardo Alencar da Silva (dealencar.silva@gmail.com) on 2015-01-22T17:36:17Z No. of bitstreams: 1 2013_tese_hpoliveira.pdf: 7775368 bytes, checksum: 04af7f6679b25787c9a736c130f5945a (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2016-01-25T20:21:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_tese_hpoliveira.pdf: 7775368 bytes, checksum: 04af7f6679b25787c9a736c130f5945a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-25T20:21:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_tese_hpoliveira.pdf: 7775368 bytes, checksum: 04af7f6679b25787c9a736c130f5945a (MD5) Previous issue date: 2013 / The peroxidases are present in all living organisms and constitute a group of multifunctional enzymes with several biotechnological applications. In this group, the class III plant peroxidases (POX) (EC 1.11.1.7) are enzymes well characterized, with involvement in lignification, suberization, auxin catabolism, wound healing and plant defense. These enzymes have been detected in different parts of the plant, including the latex. The aim of this work was the purification, characterization and antifungal activity evaluation of a peroxidase from Marsdenia megalantha latex, an endemic species of the Caatinga. The latex was collected from plant grown in Quixadá, Ceará, Brazil, diluted (1:2) in 0.05 M Tris-HCl containing 0.15 M NaCl, pH 8.0, and subjected to centrifugation and dialysis against water. The supernatant was applied to a DEAE-Cellulose matrix previously equilibrated with 0.05 M sodium acetate buffer, pH 5.2 and two protein fractions were obtained. Elution of the non retained proteins (FnRd) was achivied by the equilibrium buffer, whereas the bound proteins (FRd) were eluted with 0.2 M NaCl in the same buffer. FnRd was subjected to a chromatography on Superose 12 HR 10/30 column, yielding two protein fractions (S1 and S2). S1 was shown to be a pure protein with peroxidasic activity, apparent molecular mass of 60 kDa, pI 5.2 and identity with other POXs, being named of M. megalantha peroxidase (Mm-POX). Mm-POX follows the Michaelis-Menten kinetics, with high affinity for guaiacol and H2O2, elevated thermal stability (60 °C, 1 hour) and optimum pH around 6.0. The catalytic activity of Mm-POX was reduced in the presence of classic peroxidases inhibitors, including azide, DTT, EDTA and Na2S2O5 and also in high concentrations of Na+, Mn2+ and salicylic acid. On the other hand, Ca2+ and Mg2+, even at low concentrations, were able to enhance the enzymatic activity of Mm-POX. In addition, Mm-POX was able to inhibit the Fusarium oxysporum and F. solani conidia germination. This action is probably due to changes in the cell membrane as well as induction of oxidative stress. The results reveal that Mm-POX is a class III peroxidase, being the first enzyme isolated from M. megalantha species, with potential use in the control of plant disease caused by fungi, adding biotechnological value to this enzyme. / As peroxidases estão presentes em todos os organismos vivos e constituem um grupo de enzimas multifuncionais com diversas aplicações biotecnológicas. Nesse grupo, as peroxidases de plantas classe III (POX) (EC 1.11.1.7) são enzimas bem caracterizadas, com participação na lignificação, suberização, catabolismo de auxinas, cicatrização e defesa vegetal. Tais enzimas têm sido detectadas em diferentes partes do vegetal, inclusive no látex. Esse trabalho teve como objetivo a purificação, caracterização e avaliação da atividade antifúngica de uma peroxidase presente no látex de Marsdenia megalantha, uma espécie endêmica da Caatinga. O látex foi coletado de plantas nativas da região do Quixadá Ceará, Brasil, diluído (1:2) em Tris-HCl 0,05 M, contendo NaCl 0,15 M, pH 8,0 e submetido à centrifugação e diálise contra água. O sobrenadante foi aplicado em matriz de DEAE-Celulose, equlibrada com tampão acetato de sódio 0,05 M, pH 5,2, resultando nas proteínas não retidas (FnRd) e nas proteínas retidas (FRd), essas últimas eluídas com a adição de NaCl 0,2 M no tampão inicial. A FnRd foi submetida à cromatografia em matriz de Superose 12 HR 10/30, originando duas frações proteicas (S1 e S2). S1 se mostrou como uma proteína pura, com atividade peroxidásica, massa molecular aparente de 60 kDa, pI de 5,2 e identidade com outras POXs, que foi denominado de peroxidase de M. megalantha (Mm-POX). Mm-POX obedece à cinética de Michaelis-Menten, apresenta alta afinidade pelo guaiacol e H2O2, estabilidade térmica elevada (60 ºC, 1 hora) e pH ótimo em torno de 6,0. A atividade catalítica da Mm-POX foi reduzida diante de inibidores clássicos de peroxidases, incluindo azida, DTT, EDTA e Na2S2O5 e de concentrações elevadas Na+, Mn2+ e ácido salicílico. Por outro lado, os íons Ca2+ e Mg2+, mesmo em baixas concentrações, foram capazes de potencializar a atividade enzimática da Mm-POX. Testada contra fungos, Mm-POX (0,2 µg/mL) foi capaz de inibir a germinação de conídios de Fusarium oxysporum e F. solani, ação que provavelmente decorre de alteração na membrana celular e indução de estresse oxidativo. Os dados em conjunto demonstram que a Mm-POX é uma peroxidase classe III, se constituindo na primeira proteína isolada de M. megalantha, com possibilidade de uso no controle de doenças vegetais ocasionadas por fungos, agregando valor biotecnológico a essa enzima.
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Avaliação de produtos químicos no controle e na indução de mecanismos bioquímicos de resistência à mancha bacteriana (Xanthomonas perforans) do tomateiro

Itako, Adriana Terumi [UNESP] 02 December 2012 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-12-02Bitstream added on 2014-06-13T20:06:06Z : No. of bitstreams: 1 itako_at_dr_botfca.pdf: 1032828 bytes, checksum: e81f7ee93043c70914d51612014e840a (MD5) / O presente trabalho teve por objetivo avaliar em condições de casa-de-vegetação e de campo a ação de alguns fungicidas e antibiótico no controle da mancha bacteriana (Xanthomonas perforans) do tomateiro e na ativação de enzimas relacionadas à indução de resistência. A sensibilidade in vitro foi avaliada utilizando os produtos acibenzolar-S-metil; piraclostrobina e piraclostrobina + methiran, oxicloreto de cobre, oxicloreto de cobre + mancozeb, fluazinam e oxitetraciclina nas concentrações de 0; 5; 10; 50; 100; 500; 1000 e 5000 μg.mL-1. Acibenzolar- S-metil e piraclostrobina não inibiram o crescimento de X. perforans em todas as concentrações avaliadas e para os demais produtos, o crescimento bacteriano variou em função da concentração ensaiada. Para avaliação da severidade e atividade enzimática em casa-devegetação, foram utilizadas as cultivares de tomateiro Santa Clara e Gisele e o híbrido AP 529 inoculadas com X. perforans. Os tratamentos consistiram da pulverização com acibenzolar-Smetil (2,5 g i.a./100 L), fluazinam (25 g i.a./100 L), piraclostrobina (8 g i.a./100 L), piraclostrobina + methiran (20 g + 220 g i.a./100L), oxicloreto de cobre (150 g i.a./100 L), oxicloreto de cobre + mancozeb (88 g + 60 g i.a./100 L) e oxitetraciclina (40 g i.a./100 L), além de uma testemunha inoculada e uma testemunha não inoculada. Com os dados de severidade foi calculada a área abaixo da curva de progresso da doença (AACPD). Todos os tratamentos apresentaram redução da AACPD em relação à testemunha. Os fungicidas acibenzolar-S-metil, piraclostrobina e piraclostrobina + methiran tiveram a maior redução da severidade da mancha bacteriana em tomateiro em condições de casa-de-vegetação. Os produtos à base de... / This study aimed to evaluate in greenhouse and in field the action of fungicides and antibiotics against tomato’s bacterial spot (Xanthomonas perforans) and the activation of enzymes related to the resistance. The sensitivity was evaluated in vitro using the products acibenzolar-Smethyl, pyraclostrobin, pyraclostrobin + methiran, copper oxychloride, copper oxychloride + mancozeb, oxytetracycline at concentrations of 0, 5, 10, 50, 100, 500, 1000 and 5000 μg.mL- 1. Acibenzolar-S-methyl and pyraclostrobin did not inhibit the growth of X. perforans in all concentrations tested and for other products, the bacterial growth varied depending on the concentration tested. To assess the severity and enzyme activity in greenhouse, we used the tomato cultivars Santa Clara, Gisele and AP529 inoculated with X. perforans. The treatments consisted of pulverization with: acibenzolar-S-methyl (2.5 g a.i./100 L), fluazinam (25 g a.i./100 L), pyraclostrobin (8 g a.i./100 L) methiran + pyraclostrobin (20 g + 220 g i.a./100 L), copper oxychloride (150 g ai/100 L), copper oxychloride + mancozeb (88 g + 60 g a.i./100 L), oxytetracycline (40 g a.i./100 L), and in addition an inoculated and non inoculated as control. The area under the disease progress curve (AUDPC) was calculated using the assessments data of the severity disease. All treatments had reduced the AUDPC compared to the control. The fungicides acibenzolar-S-methyl, pyraclostrobin, and pyraclostrobin + methiran had the highest reduction in the severity of bacterial spot on tomato plants under greenhouse experiments conditions. The acibenzolar-S-methyl... (Complete abstract click electronic access below)
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Valor prognóstico da mieloperoxidase na doença arterial coronariana

Roman, Raquel Melchior January 2006 (has links)
Resumo: Mieloperoxidase (MPO) é uma enzima derivada de leucócitos que cataliza a formação de numerosas espécies reativas oxidantes. Além de integrante da resposta imune inata, evidências têm comprovado a contribuição destes oxidantes para o dano tecidual durante inflamação. A MPO participa de atividades biológicas pro-aterogências relacionadas à evolução da doença cardiovascular; incluindo iniciação, propagação e as fases de complicação aguda do processo aterosclerótico. Desta forma, MPO e sua cascata inflamatória representam um alvo atrativo para investigação prognóstica e terapêutica na doença aterosclerótica cardiovascular. Nesta revisão, apresentamos o estado da arte no entendimento das ações biológicas às evidências clínicas da relação entre MPO e doença arterial coronariana.
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Associação entre polimorfismos da mieloperoxidase e gravidade da doença arterial coronariana

Wainstein, Rodrigo Vugman January 2008 (has links)
Resumo não disponível

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