Thesis (M.S.)--Ohio State University. / Bibliography: leaves 28-29.

Orientador : Yoko Bomura Rosato / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T09:40:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mehta_Angela_D.pdf: 14092017 bytes, checksum: 5a83411e669684c095655596bfa85ee6 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: No presente estudo, a expressão diferencial de X. axonopodis pv. citri em resposta a diferentes condições de cultura foi analisada através de eletroforese bidimensional (2-DE) de proteínas e cDNA RDA ("Representational Difference Analysis"). Para a análise de proteínas, a bactéria foi cultivada no meio basal MMl e na presença de extrato de folhas de urna planta suscetível (Citrus sinensis) assim como de urna resistente (Citrus reticulata) e urna não hospedeira (Passiflorae edulis). O perfil de proteínas revelou 12 "spots" diferenciais no tratamento com extrato de citros (hospedeiro suscetível) quando comparado àquele do MM 1. O perfil da bactéria cultivada em meio complexo NYG foi também analisado e a comparação com aquele do meio MM 1 revelou 36 proteínas diferenciais. Cinco proteínas dos diferentes tratamentos tiveram a região N-terrninal seqüenciada, incluindo 2 proteínas constitutivarnente expressas, 2 induzidas na presença de extrato de citros e 1 induzi da no meio complexo. Um método para a recuperação da bactéria de folhas da planta hospedeira foi também desenvolvido e validado através da análise de proteínas e RNA. O perfil de proteínas obtido através de 2-DE foi semelhante ao obtido pela bactéria cultivada na presença de extrato de folhas de Citrus sinensis. RNA total foi analisado através de eletroforese em gel de agarose e reações de RT -PCR utilizando primers para genes de X. axonopodis pv. citri confirmaram a qualidade do RNA obtido. O emprego desta técnica permitirá estudos de expressão in planta de diversas espécies de fitopatógenos. Com a técnica de cDNA RDA foram identificados cDNAs expressos na presença de extrato de folhas da planta hospedeira, assim como in vivo após hibridizações subtrativas contra cDNA da bactéria cultivada em MM1. Uma hibridização subtrativa de cDNAs da bactéria cultivada no meio NYG contra cDNAs expressos em MMl foi também efetuada. Um total de 37 genes distintos foi identificado através de busca de homologia no genoma de X. axonopodis pv. citri, incluindo genes que codificam proteínas hipotéticas (12), genes relacionados ao metabolismo (13), processos celulares (6) e patogenicidade (4), e elementos genéticos móveis (2) / Abstract: The present study reports the differentiaJ expression of X. axonopodis pv. citri in response to different growth conditions by two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) of proteins and cDNA RDA (Representational Difference Analysis). For the protein anaJysis, the bacterium was cultured in the basal medi um MM1 and in the presence of leaf extracts from a susceptible host plant (sweet orange) as well as a resistant (ponkan) and a non-host plant (passion fruit). The protein profiles revea1ed 12 differentiaJ spots in the citrus extract treatment (susceptible host) when compared to that of MM1. The 2-DE protein profile of the bacterium grown in the complex medium NYG was also obtained and the comparison with that of MM 1 revealed 36 differential spots. Five proteins from the different treatments were successful1y N-terminally sequenced and inc1uded 2 constitutively expressed proteins, 2 proteins up-regulated in the presence of citrus extracts and 1 up-regulated in the complex medium. A method for the recovery of bacterial cells from the host plant leaves was also developed and validated by the analysis of protein and RNA extracted from the recovered ce1ls. The protein pattem obtained by 2-DE was similar to that obtained for the bacterium grown in the presence of leaf extract of Citrus sinensis. Total RNA was analysed by agarose gel electrophoresis and RT -PCR reactions using specific primers for X. axonopodis pv. citri genes confirmed the quality af the RNA obtained. This method will be useful for in planta expression studies of several phytopathogenic species. In the cDNA RDA technique, cDNAs expressed in the presence of leaf extract of the host plant, as well as in vivo were identified after subtractive hybridizations against cDNAs of the bacterium cultured in the basal medium MM1. Also, a subtractive hybridization of cDNAs of the 3 bacterium grown in complex media against cDNAs expressed in the minimal medium was performed. A total of 37 distinct genes were identified by homology searches in the genome of X. axonopodis pv. citri, including genes that encode hypothetical proteins (12), genes involved in metabolism (13), cellular processes (6) and pathogenicity (4), and mobile genetic elements (2) / Doutorado / Genetica de Microorganismos / Doutor em Genetica e Biologia Molecular

Orientador: Adilma Regina Pippa Scamparini / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-03T10:02:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_CristinaMariaRodriguesda_D.pdf: 19396714 bytes, checksum: 65b1ef4943b089f2de8157677c2cadb8 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: A utilização da técnica de secagem por atomização como método de preservação de células de X. campestris pv manihotis cepa 280 foi estudada, visando à manutenção da viabilidade celular e da capacidade de produção de goma xantana. A fim de investigar a viabilidade da bactéria durante o processo de secagem por atomização, os efeitos das condições de crescimento, os diferentes fluidos de suspensão e de reidratação dos concentrados celulares na taxa de sobrevivência das células após a secagem por atomização foram estudados. Alta taxa de sobrevivência celular foi obtida quando leite desnatado reconstituido 10% como meio de suspensão das células e água destilada como fluido de reidratação do concentrado celular atomizado foram utilizados. Considerando as condições estudadas e utilizando a temperatura do ar de entrada no spray drier de 135°C e temperatura do ar de saída de 75°C, foi encontrado 98,42% de sobrevivência celular após secagem por atomização. Inoculando o concentrado atomizado em meio de fermentação contendo 2,0% de sacarose foram produzidos 13,86g/L de goma xantana, o que indica um aumento significativo na produção deste polissacarídeo em relação à produção de goma xantana através dos concentrados originais utilizados neste experimento. A viabilidade das células após secagem por atomização foi mais bem preservada quando os concentrados celulares foram armazenados a 5°C. Uma baixa recuperação de células viáveis foi obtida quando as culturas foram armazenadas em dessecador à temperatura ambiente. A utilização de diferentes temperaturas do ar de entrada do spray drier de 135, 150 e 200°C e diferentes temperaturas do ar de saída de 75, 85 e 90°C também foram avaliadas. A utilização de temperatura do ar de saída mais baixa resultou em maior taxa de sobrevivência do concentrado celular após secagem por atomização. Após 12 meses de preservação ensaios de viabilidade mostraram que as culturas concentradas atomizadas, armazenadas em dessecador à temperatura ambiente e a 5°C permaneceram estáveis, não sofrendo alteração morfológica. Não se detectou a presença de sublinhagens mutantes. A utilização de uma suspensão contendo maltodextrina 20 DE (30%) e goma arábica (10%) resultou em maior proteção às células e maior recuperação de células viáveis. / Abstract: The use of spray drying as a preservation method of Xanthomonas campestris pv manihotis strain 280 cells was studied aiming to maintain cellular viability and capability to produce xanthan gum. In order to investigate cells survival during spray drying process, the effects of growth condltlons, dlfferent suspendlng and rehydration fluids on the concentrated cells survival rate afier atomization were determinated. The highest viability rate was found, when skim milk 10% as cells suspension media and distilled water as rehydration fluid were used. Considering culture conditions, inlet air temperature of 135°C and outlet air temperature of 75°C, approximately 98,42% of survival rate was found. When this spray dried concentrated cells were inoculated in fermentation media containing 2% sucrose, it was produced 13,86g/L of xanthan gum per liter of broth. This date indicates a significant increase in the exopolysaccharide production. The viability of spray dried cells showed good preservation when the concentrated cells were stored at 5°C. The storage at room temperature (25°C) compromised the culture survival rate resulting in lower recovery of viable cells. After 12 months of preservation viability tests carried out demonstrated that the spray dried concentrated cells stored at 5°C and at room temperature did not present any morphological modification. It was not found any mutant strain. The maltodextrin 20DE (30%) and gum arabic (10%) blend provided protection concentrated cells resulting in further viable cells recover. / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

LD2668 .T4 1954 K5 / Master of Science

Thesis (Ph. D.)--University of Hawaii at Manoa, 1996. / Includes bibliographical references (leaves 81-86). / Microfiche. / xi, 86 leaves, bound ill. 29 cm

Thesis (Ph. D.)--University of Wisconsin--Madison, 1959. / Typescript. Abstracted in Dissertation abstracts, v. 20 (1959) no. 3, p. 841. Vita. eContent provider-neutral record in process. Description based on print version record. Includes bibliographical references (leaves 83-88).

Gottingen, Univ., Diss., 2003. / Computerdatei im Fernzugriff.

Halle, Wittenberg, Universiẗat, Diss., 2005.

Halle, Wittenberg, Universiẗat, Diss., 2002.

Göttingen, Universiẗat, Diss., 2003.