Allergi förekommer hos cirka 20 % av befolkningen i Sverige. Av de 20 % bedöms 40 % vara allergiska mot pollen. Allergi uppstår då en individ upprepade gånger exponeras för ett allergiframkallande ämne sk allergen. IgE-antikroppar bildas och binder till basofila granulocyter och mastceller. Den allergiska reaktionen eller överkänslighetsreaktionen av typ I uppkommer när ett allergen exempelvis pollen, kommer i direkt kontakt med IgE-antikroppar på mastceller eller basofila granulocyter. Allergiska individer har högre koncentration av IgE-antikroppar i blodet än icke allergiska. Normal koncentration av IgE i serum hos icke allergiker är <0.35 kU/L. Syftet med studien var att genom analys av serumprover från 50 patienter jämföra två immunokemiska metoder på analysinstrumenten, Siemens immulite® 2000 XPi och Thermo Fisher Phadia® 250, för detektion av IgE-antikroppar riktade mot en inhalationspanel respektive björkpollen. Immulite® 2000 XPi användes som referensmetod. Jämförelsen gjordes för att bedöma om metoderna gav överensstämmande resultat och om Phadia® 250 skulle kunna användas som ett alternativ till rutinmetoden. Studiematerialet bestod av 50 patienter i åldrarna 18–80 år, 17  män (34 %) och 33 kvinnor (66 %). Resultatet visade att metoderna överlag gav överrensstämmande resultat med avseende på positiva och negativa IgE-värden, men att de uppmätta värdena för metoderna saknade överrensstämmelse. Analysresultaten från de båda metoderna gav överlag god korrelation vid analys av specifikt IgE mot björk (R=0,977) men en svagare korrelation vid analys av inhalationspanel (R=0,609). Med hjälp av Man-Whitney u-test sågs en signifikant skillnad vid IgE-analys mot björk (p= 0,0006) däremot sågs inte en signifikant skillnad mellan metodernas IgE-värden mot inhalationspanelerna (p=0,2398). För att kunna utvärdera om Phadia® 250 skulle kunna användas som ett alternativ till rutinmetoden, krävs en större population av prover samt fler analystillfällen. / Allergy is nowadays a public health problem that’s affecting 20 % of the Swedish population. A very common allergen that is related to 40% of all the allergic cases is pollen. Allergic reactions occur when an  individual is repeatedly exposed to an allergenic substance called allergene. IgE antibodies then form and bind to basophilic granulocytes and mast cells. The allergic reaction or type I hypersensitivity reaction, occurs when an allergen such as pollen comes into direct contact with IgE antibodies on mast cells or basophilic granulocytes. IgE is produced by plasma cells under the influence of CD4+ T lymphocytes. The IgE antibodies synthesized then sensitize the mast cells and basophilic granulocytes which are the most active cell types involved in allergic reactions. Allergic individuals have a higher concentration of IgE antibodies in the blood than non-allergic. Normal serum IgE concentration in non-allergic patients is <0.35 kU / L. The aim of the study was to compare two immunochemical instruments, Siemens Immulite® 2000 XPi and Thermo Fisher Phadia® 250, by analyzing 50 serum samples to detect possible presence of IgE antibodies directed against an inhalation panel and a single allergen (IgE against birch). The study material consisted of 50 patients between the ages of 18-80, 17 men (34%) and 33 women (66%). The results showed that overall the two methods yielded consistent results due to positive and negative IgE values, but the measured values of the methods lacked concordance. The analysis results from the two methods generally yielded good correlation in the analysis of specific IgE against birch (R = 0.977) but a weaker correlation in the inhalation panel analysis (R = 0.609). Man-Whitney u-test showed a significant difference in IgE analysis against birch (p = 0.0006). However, a significant difference between the IgE values of the methods against the inhalation panels (p = 0.22398) was not observed. To be able to evaluate whether Phadia® 250 could be used as an alternative to the routine method, a larger population of samples and more analytical occasions is required.

Autoantikroppar är antikroppar som attackerar en individs egen vävnad. Riktas dessa mot antigener från cellkärnan kallas de för ANA. Exempel på dessa är anti-dsDNA antikroppar som associeras med sjukdomen SLE. Med hjälp av metoderna ELISA, CLIFT eller FARR-radioimmunoassay kan anti-dsDNA antikroppar analyseras och tillsammans med kliniska symptom såsom ansiktserytem kan diagnosen SLE ställas. Syftet med examensarbetet var att undersöka analys av anti-dsDNA antikroppar med hjälp av instrumentet Phadia 250 vars princip är en automatiserad ELISA, för att se om det kan användas som screeningmetod istället för CLIFT. 20 EQUALIS-serumprover (externa kontrollprover) analyserades med Phadia 250 och de Phadia 250-positiva proverna analyserades ytterligare en gång med CLIFT. Därefter analyserades 44 patienters serumprover (21 positiva och 23 negativa, tidigare analyserade med CLIFT) med Phadia 250. Patientprovernas resultat gav 70 % sensitivitet och 86 % specificitet med Phadia 250. Phadia 250-resultat som ej överensstämde med förväntade resultat på EQUALIS- och patientproverna erhölls i flera fall. Vid en noggrannare granskning av EQUALIS-proverna noterades att liknande resultat erhållits av andra laboratorier som använt likartade metoder. EQUALIS-proverna var initialt analyserade och kategoriserade enligt CLIFT, vilket innebar att hög överensstämmelse kunde förväntas med den egna CLIFT-metoden. Slutsatsen av studien är att underlaget för att införa metoden i rutindiagnostiken är inte tillräckligt utifrån de erhållna resultaten. Det krävs ytterligare studier samt granskning av inkluderade patienters journaler för att säkrare bedöma metodernas korrelation till sjukdomen.

Kalprotektin är ett protein som bygger upp 60 % av neutrofila granulocyters granula. Vid inflammationer i tarmen vandrar neutrofila granulocyter ut genom mukosan och följer med faeces ut ur kroppen. Proteinet är kalciumbindande och surt och dessa egenskaper utnyttjas i moderna extraktionskit för att mäta mängden kalprotektin i faeces (F-kalprotektin). Thermofisher är ett företag som utvecklat en metod för analys av F-kalprotektin och den kallas för EliA Extraction kit 2 där Kalprotektin extraheras med hjälp av bufferten i röret och analyseras därefter av Phadia 250. Syftet med studien var att utföra en metodjämförelse mellan två metoder. I den första metoden kommer den rutinmetod som används på laboratoriet användas för att upparbeta faeces. I den andra kommer patienterna som skickar sin faeces direkt samlade i extraktionsrören till analys. Syftet är att jämföra analysresultaten för att se om de är lika. Studien utfördes på 26 vuxna patienter varav 11 var kvinnor och 15 var män. Innan analys av prover analyserades tre kontroller för att kontrollera om metoden för analys av F-kalprotektin fick analyseras. Under studien utfördes fyra olika inom-serie precision på fyra olika patienter med 25 replikat för att beräkna variationskoefficienten (CV). Metodens CV varierade mellan 19 - 27 %. Efter att en reparation på instrumentet utförts analyserades två prover med inom-serie precision och CV blev 8 – 13 %. Metodernas resultat hade stark korrelation (R = 0,9055) och vid beräkning av resultat med Mann-Whitney U-test sågs ingen signifikant skillnad (p = 0,3059). Det fanns dock en del prover som hade stor skillnad på resultatet vilket kan ge fel diagnos/klassning. För att kunna bedöma om den nya metoden kan användas som ett alternativ till rutinmetoden måste en större population analyseras. / Calprotectin is a protein that makes up 60 % of the granules of neutrophilic granulocytes. In inflammation of the intestine, neutrophilic granulocytes migrate out through the mucosa and follow the feces out of the body. The protein is calcium-binding and acidic and these properties are used in modern extraction kits to measure the amount of calprotectin in feces  (F-calprotectin). Thermofisher is a company that has developed a method for analysis of F-calprotectin and it is called EliA Extraction kit 2 which is analyzed by Phadia 250. The purpose of the study was to perform a method comparison between two methods. In the first method, the routine method used in the laboratory will be used to process feces. In the second, the patients who send their feces directly collected in the extraction tubes come for analysis. The purpose is to compare the analysis results to see if they are similar. The study was performed on 26 individuals of which 11 were women and 15 were men. Before analyzing, three controls were analyzed to check the method of analysis of F-calprotectin. A negative check and a positive check as well as a calibration check. During the study, four different within-run precision were performed on four different patients with 25 replicates to calculate the coefficient of variation (CV). The CV of the method varied between 19 – 27 %. After a repair on the instrument was performed, the CV was 8 – 13 %. The results of the methods had a strong correlation (R = 0.9055) and when calculating the results with Mann-Whitney U-test, no significant difference was seen (p = 0.3059). In order to be able to assess whether the new method can be used as an alternative to the routine method, a larger population must be analyzed.