Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2017-11-27T16:45:41Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE JOSÉ ERITON GOMES DA CUNHA.pdf: 4938507 bytes, checksum: 52c4bcd6499bc3e95e89199f5fbad7a0 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-27T16:45:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE JOSÉ ERITON GOMES DA CUNHA.pdf: 4938507 bytes, checksum: 52c4bcd6499bc3e95e89199f5fbad7a0 (MD5) Previous issue date: 2016-03-07 / FACEPE / As Doencas Prionicas, tambem conhecidas como Encefalopatias Espongiformes Transmissiveis (EET), fazem parte de um grupo de doencas raras e invariavelmente fatais e incidem em diversos animais, incluindo o homem, e sao ocasionadas pelo acumulo de uma proteina insoluvel denominada PríonScrapie (PrPsc). Fazem parte deste grupo a Encefalopatia Espongiforme Bovina (EEB), CronicWastingDisease (CWD) nos cervideos, Scrapie em ovinos e nos humanos Doenca de Creutzfeldt-Jakob(DCJ), Kuru, Gerstmann-Straussler-ScheinkerDisease (GSS) e Insonia Familiar Fatal. Uma forte caracteristica das EET e a altaheterogeneidade clinica e histopatologica, tendo como o codon 129 da proteina príon o maior fator para esta variabilidade. Por conta desta variabilidade e a falta de biomarcadores determinantes para as Doencas Prionicas, o estudo clinico dos casos se torna crucial para o diagnostico diferencial. Nesta tese, criamos um banco de dados online, o epiCJD, para centralizar informacoes epidemiologicas a fim de orientar medicos e servir como apoio aos gestores de saude. Utilizamos os registros dos casos ate entao coletados pelo Centro de Doencas Prionicas da Alemanha. Alem disso, foram analisados Aβ42 e a proteina Tau atraves de eletroquimioluminiescencia (MSD) como possiveis biomarcadores para diagnostico diferencial. Apos a analise dos dados, observamos que a distribuicao geografica dos registros nao indicam clusters ou hotspots, obedecendo basicamente o tamanho populacional. A distribuicao de acordo com o genero nao difere de outras populacoes descritas na literatura e os primeiros sintomas sao compativeis com os descritos previamente, bem como a idade media do inicio da doenca. A distribuicao genotipica do codon 129 esta de acordo com a literatura. Quanto ao MSD, observamos que a quantificacao foi ligeiramente superior nos niveis de TAU e significativamente superior Aβ42 em relacao aos controles, DA e DCJ. Baixos niveis de Aβ42 e alto nivel de TAU se mostraram caracteristicas em DA e DCJ, comparado aos controles. Como perspectivas futuras, o banco de dados sera alimentado por outros dados, alem dos provenientes da Alemanha, a fim de observar se ha ou nao variacoes entre outras populacoes. A tecnica MSD se mostrou promissora podendo, depois de melhoramentos, ser uma ferramenta de diagnostico molecular. / Prion diseases, or Transmissible Spongiform Encephalopathies (TSEs), are part of a group of rare diseases and invariably fatal and focus on various animals, including humans, and are caused by the accumulation of insoluble protein called Prion Scrapie (PrPsc). Bovine Spongiform Encephalopathy (BSE), CronicWastingDisease (CWD) in deer, scrapie in sheep and Creutzfeldt-Jakob disease (CJD), Kuru, Gerstmann-Straussler-ScheinkerDisease (GSS) and Fatal Familial Insomnia, in humans, are example of TSEs. A strong feature of the TSE is the high heterogeneity clinical and histopathological, with the codon 129 of the prion protein the biggest factor for this variability. Because of this variability and lack of biomarkers to determine the prion diseases, the clinical study of cases becomes crucial for the differential diagnosis. In this thesis, we have created an online database, epiCJD, to centralize epidemiological information in order to guide physicians and serve as support for public health managers. We use records from German Prion Disease Center. Furthermore, Ab42 were analyzed and Tau protein by electrochemiluminescence-based detection system (MSD) as biomarkers for the differential diagnosis. The distribution according to gender does not differ from other populations described in the literature and the first symptoms are consistent with those described previously, as well as the average age of onset of the disease. The genotype distribution of the 129 codon is in agreement with the literature. As for the MSD,we noted that the quantification was slightly higher levels of TAU and Ab42 significantly higher compared to controls, AD and CJD. Low levels of Ab42 and high TAU proved characteristics in AD and CJD, compared to controls. As future prospects, the database will be fed by other data, in addition to from Germany, in order to observe whether there are variations among other populations. MSD technique proved promising and may, afterimprovements, to be a molecular diagnostic tool.

Submitted by Israel Vieira Neto (israel.vieiraneto@ufpe.br) on 2015-03-05T18:18:45Z No. of bitstreams: 2 Jose_Eriton_Gomes_da_Cunha.pdf: 1528213 bytes, checksum: 7808fa0521f72c6aa79a728ea24ae0b4 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-05T18:18:45Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Jose_Eriton_Gomes_da_Cunha.pdf: 1528213 bytes, checksum: 7808fa0521f72c6aa79a728ea24ae0b4 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012 / CAPES, CNPq / A Doença de Alzheimer (DA) e a Doença de Creutzfeldt-Jakob (DCJ) apresentam caráter neurodegenerativo, ocasionadas pelo acúmulo extracelular de proteínas insolúveis. Dentre alguns fatores de risco, as mutações nos códons M129V e E200K do gene PRNP são os mais importantes na DCJ. Alguns estudos foram realizados com o códon 129, sendo bastante controversos. Este trabalho teve como objetivo verificar a influência dos códons 129 e 200 e a presença da mutação E200K na DA. 145 amostras de DNA de pacientes com DA e 198 controles foram genotipadas para os códons 129 e 200 através da técnica da PCR e digestão enzimática com as enzimas NspI para o códon M129V e BsmAI, para o códon 200. Onze pacientes e oito controles foram sequenciados com o MegaBace1000. Quarenta e dois pacientes e quarenta e dois controles foram genotipados para o códon 129 sendo 16 MM, 20 MV e 6 VV nos pacientes e 24 MM, 15 MV e 3 VV nos controles. Não foram encontradas diferenças estatísticas significativas. Para a mutação E200K, 61 pacientes e 75 controles foram genotipados, não ocorrendo mutação em nenhuma amostra. Nossos dados corroboram com outros grupos mostrando que o códon 129 parece não estar associado a DA. A baixa frequência da mutação E200K pode justificar a ausência desta na nossa amostragem, o que precisa ser confirmado com maior número de amostras, com devida atenção pela possível estratificação associada a grupos étnicos e outros fatores como cosegregação de outros genes associados ao PRNP. Este trabalho contribuiu para um melhor conhecimento do perfil neuroepidemiológico da população local.

INTRODUÇÃO: Os polimorfismos do gene da proteína priônica (PRNP) podem estar associados a doenças neurológicas não priônicas. Estudos em pacientes com doença de Alzheimer (DA) apontam para possível associação entre os polimorfismos do códon 129 do PRNP e DA. Essa associação não foi estudada na população brasileira. Neste estudo, descrevemos a associação entre os diferentes polimorfismos do PRNP e DA. MÉTODOS: Foi estudada amostra composta por 100 pacientes com DA, acompanhados no Ambulatório de Neurologia Cognitiva e do Comportamento e no Centro de Referência em Distúrbios Cognitivos do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo, pareados para grupo controle com 111 indivíduos, em relação à frequência dos diferentes polimorfismos do PRNP e o desempenho cognitivo. Os polimorfismos do PRNP foram estudados pelo método de cromotografia líquida de fase reversa desnaturante (DHPLC). Foi realizada extratificação da amostra pelo genótipo da apolipoproteína E (apoE). RESULTADOS: A frequência dos polimorfismos do códon 129 foi: 45,5% M/M, 42,4% M/V e 12,2% V/V nos pacientes com DA; e 39,6% M/M, 50,5% M/V e 9,9% V/V nos indivíduos controles (p=0,503). O códon 117 apresentou variante alélica silenciosa em 5% dos pacientes com DA e 3% dos controles (p=0,780). A deleção de um ocatapeptídeo repetido ocorreu em 5% dos pacientes com DA e 4% dos controles (p=0,738). Todos os pacientes com DA e os controles eram N171N. Uma paciente do grupo com DA apresentou a mutação V180I. A análise bivariada e regressão logística não mostraram associação entre os diferentes polimorfismos do códon 129 e o desempenho cognitivo nos pacientes com DA, assim como nos indivíduos cognitivamente normais. A extratificação segundo genótipo da apoE não revelou diferença em relação aos polimorfismos do códon 129 do PRNP entre os grupos DA e controles. CONCLUSÕES: Não houve diferença de frequência dos diferentes polimorfismos do códon 129 do PRNP entre os pacientes com DA e idosos cognitivamente normais, bem como em relação aos demais códons polimórficos do gene. Não houve diferença em relação ao desempenho cognitivo nos pacientes com DA e nos controles segundo o polimorfismo do códon 129 do PRNP. Um paciente apresentou mutação do códon 180 (V180I), e recebeu o diagnóstico de doença de Creutzfeldt-Jakob genética / INTRODUCTION: The polymorphism in the prion protein gene (PRNP) may influence non prion neurological diseases. Some reports associate Alzheimers disease (AD) and the polymorphic codon 129 of the PRNP. This association has not been studied in Brazilian population. In this study we aimed to describe the association between the polymorphisms of codon 129 of the PRNP and AD. METHODS: One hundred AD patients were evaluated in the Cognitive and Behavioral Neurology Unit and Cognitive Disorders Reference Center of the Hospital das Clínicas of the University of São Paulo School of Medicine, matched for 111 controls, regarding to the PRNP polymorphism and cognitive measures. The PRNP polymorphisms were analyzed using denaturing high-performance liquid chromatography (DHPLC). Analyzes stratifying by apoE genotype was performed. RESULTS: The distribution of the codon 129 polymorphisms were: 45.5% M/M, 42.4% M/V and 12.2% V/V in AD patients; 39.6% M/M, 50.5% M/V and 9.9% V/V in the control group (p=0.503). The 117 codon analysis revealed silent allelic variant in 5% of AD patients and 3% of controls (p=0.780). The octarepeat deletion occurred in 5% of AD and 4% of controls (p=0.738). All AD patients and controls were N171N. One AD patient had a point mutation at codon 180 (V180I). Logistic regression failed to confirm any association between AD cognitive performance and the codon 129 of PRNP, as well as in the control group. There was no association between the codon 129 genotypes and genotypes and AD according to the apoE stratification. CONCLUSIONS: There were no differences in the frequency of the codon 129 polymorphism between AD. control group, according to the codon 129 polymorphisms. A point mutation at the codon 180 (V180I) was diagnosed in one patient

INTRODUÇÃO: Os polimorfismos do gene da proteína priônica (PRNP) podem estar associados a doenças neurológicas não priônicas. Estudos em pacientes com doença de Alzheimer (DA) apontam para possível associação entre os polimorfismos do códon 129 do PRNP e DA. Essa associação não foi estudada na população brasileira. Neste estudo, descrevemos a associação entre os diferentes polimorfismos do PRNP e DA. MÉTODOS: Foi estudada amostra composta por 100 pacientes com DA, acompanhados no Ambulatório de Neurologia Cognitiva e do Comportamento e no Centro de Referência em Distúrbios Cognitivos do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo, pareados para grupo controle com 111 indivíduos, em relação à frequência dos diferentes polimorfismos do PRNP e o desempenho cognitivo. Os polimorfismos do PRNP foram estudados pelo método de cromotografia líquida de fase reversa desnaturante (DHPLC). Foi realizada extratificação da amostra pelo genótipo da apolipoproteína E (apoE). RESULTADOS: A frequência dos polimorfismos do códon 129 foi: 45,5% M/M, 42,4% M/V e 12,2% V/V nos pacientes com DA; e 39,6% M/M, 50,5% M/V e 9,9% V/V nos indivíduos controles (p=0,503). O códon 117 apresentou variante alélica silenciosa em 5% dos pacientes com DA e 3% dos controles (p=0,780). A deleção de um ocatapeptídeo repetido ocorreu em 5% dos pacientes com DA e 4% dos controles (p=0,738). Todos os pacientes com DA e os controles eram N171N. Uma paciente do grupo com DA apresentou a mutação V180I. A análise bivariada e regressão logística não mostraram associação entre os diferentes polimorfismos do códon 129 e o desempenho cognitivo nos pacientes com DA, assim como nos indivíduos cognitivamente normais. A extratificação segundo genótipo da apoE não revelou diferença em relação aos polimorfismos do códon 129 do PRNP entre os grupos DA e controles. CONCLUSÕES: Não houve diferença de frequência dos diferentes polimorfismos do códon 129 do PRNP entre os pacientes com DA e idosos cognitivamente normais, bem como em relação aos demais códons polimórficos do gene. Não houve diferença em relação ao desempenho cognitivo nos pacientes com DA e nos controles segundo o polimorfismo do códon 129 do PRNP. Um paciente apresentou mutação do códon 180 (V180I), e recebeu o diagnóstico de doença de Creutzfeldt-Jakob genética / INTRODUCTION: The polymorphism in the prion protein gene (PRNP) may influence non prion neurological diseases. Some reports associate Alzheimers disease (AD) and the polymorphic codon 129 of the PRNP. This association has not been studied in Brazilian population. In this study we aimed to describe the association between the polymorphisms of codon 129 of the PRNP and AD. METHODS: One hundred AD patients were evaluated in the Cognitive and Behavioral Neurology Unit and Cognitive Disorders Reference Center of the Hospital das Clínicas of the University of São Paulo School of Medicine, matched for 111 controls, regarding to the PRNP polymorphism and cognitive measures. The PRNP polymorphisms were analyzed using denaturing high-performance liquid chromatography (DHPLC). Analyzes stratifying by apoE genotype was performed. RESULTS: The distribution of the codon 129 polymorphisms were: 45.5% M/M, 42.4% M/V and 12.2% V/V in AD patients; 39.6% M/M, 50.5% M/V and 9.9% V/V in the control group (p=0.503). The 117 codon analysis revealed silent allelic variant in 5% of AD patients and 3% of controls (p=0.780). The octarepeat deletion occurred in 5% of AD and 4% of controls (p=0.738). All AD patients and controls were N171N. One AD patient had a point mutation at codon 180 (V180I). Logistic regression failed to confirm any association between AD cognitive performance and the codon 129 of PRNP, as well as in the control group. There was no association between the codon 129 genotypes and genotypes and AD according to the apoE stratification. CONCLUSIONS: There were no differences in the frequency of the codon 129 polymorphism between AD. control group, according to the codon 129 polymorphisms. A point mutation at the codon 180 (V180I) was diagnosed in one patient