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Estudo das atividades cicatrizante e antimicrobiana do extrato glicólico e do gel de Psidium guajava L. e estudo da estabilidade do gel / Study of the healing and antimicrobial activities of the glycolic extract and gel of Psidium guajava L. and study of the stability of the gel

Okamoto, Marise Kiyoko Hasegawa 23 March 2010 (has links)
Psidium guajava L. é um arbusto perene, nativo da América tropical, cujas folhas são usadas na medicina tradicional latino-americana como antimicrobiano, antidiarreico e auxiliar no tratamento de diabetes. As caracterizações morfoanatômica e histoquímica das folhas, realizadas neste trabalho, contribuem no controle de qualidade da matéria-prima vegetal, empregada em formulações farmacêuticas. Os principais caracteres diagnósticos utilizados para a sua identificação foram: venação, tipo de tricomas, número de camadas de células epidérmicas, tipo de mesofilo e localização/tipo de cristais de oxalato de cálcio. Na triagem fitoquímica foi verificada a presença de taninos, flavonóides, óleos essenciais e de saponinas nas folhas e no extrato glicólico de P. guajava L. Após realizar o teste de estabilidade acelerada do gel de P. guajava L. foi observada a estabilidade de flavonóides e de taninos na formulação. Foram realizadas diferentes técnicas para verificar a atividade antimicrobiana do extrato e do gel de Psidium guajava L. tais como: microdiluição em placas utilizando detector de Elisa, difusão em disco, em \"template\" e macrodiluição em tubos. Os microrganismos testados foram Pseudomonas aeruginosa (ATCC9027), Escherichia coli (ATCC10536), Staphylococcus aureus (ATCC6538) e Cândida albicans (ATCC10231). Dimetilsulfóxido foi utilizado para a diluição do extrato glicólico e do gel. O meio de cultura utilizado para os métodos de microdiluição e macrodiluição foi o caldo caseína soja, para as técnicas de difusão o ágar caseína soja, ambos para bactérias; para levedura o meio Sabouraud em caldo e ágar. Foi observada eficácia antimicrobiana do gel (200 mg/mL) contra E. coli e (200 mg/mL e 500 mg/mL) contra P. aeruginosa e S. aureus. Os extratos glicólicos (200 µL/mL e 500 µL/mL) apresentaram atividade antimicrobiana para E. coli. O extrato glicólico (500 µL/mL) apresentou atividade contra P. aeruginosa e S. aureus, porém assim como o gel, não apresentou ação antifúngica, através da técnica de microdiluição (ELISA), que se destacou por ser mais econômica e eficiente que as demais. No teste de cicatrização ocorreu cicatrização da lesão através da utilização de extrato glicólico e gel de Psidium guajava L., porém macroscopicamente não foi significativo em relação à solução fisiológica. No entanto, em análise histológica das lesões, foram observadas diferenças qualitativas, evidências de fibroplasia e proliferação vascular, características de fase granulatória, nos grupos tratados com extrato glicólico e gel de Psidium guajava L. a partir de 72 horas, o que não foi observado no grupo solução fisiológica nem no grupo Dersani®. Comprova-se assim a eficácia do gel de extrato glicólico de Psidium guajava L. na cicatrização de feridas cutâneas em ratos. Esta pode ser uma nova opção de medicamento para pacientes que dependam do Sistema único de saúde (SUS). / Psidium guajava L. is a perennial shrub, native of tropical América used in Latin American traditional medicine as antimicrobial, antidiarrheic, and in the treatment of diabetes. The morphoanatomical characteristics and histochemistry of the leaves have been proven to be a rapid method for quality control of the crude drug used in pharmaceutical formulations. The main diagnostic characters for the identification of its leaves in the present paper were: venation, trichomes type, number of layers of epidermal cells, mesophyll type and location/type of crystals of calcium oxalate. The presence of tannins, flavonoids, essential oils and saponins was verified in the leaves and in the glycolic extract of P. guajava L. through phytochemical screening. The accelerated stability study of the gel P. guajava L. showed the stability of flavonoids and tannins in the formulation. Different techniques were performed to verify the antimicrobial activity of the extract and of the gel of Psidium guajava L. such as microdilution plates using Elisa detector, disk diffusion, in \"template\" and macrodilution tubes. The tested microorganisms were Pseudomonas aeruginosa (ATCC9027), Escherichia coli (ATCC10536), Staphylococcus aureus (ATCC6538) and Candida albicans (ATCC10231). Dimethyl sulfoxide was used for dilution of the glycolic extract and the gel. The culture medium used for the methods of macrodilution and microdilution was casein soy broth and casein soy agar for the diffusion technique, both for bacteria; for the yeast the Sabouraud medium in broth and agar. Antimicrobial efficacy of the gel (200 mg / mL) was observed against E. coli and (200 mg / mL and 500 mg / mL) against P. aeruginosa and S. aureus. Glycolic extracts (200 mL / mL and 500 mL / mL) showed activity against E. coli. The glycolic extract (500 µL/mL) showed activity against P. aeruginosa and S. aureus but similar to the gel, the extract didnt show antifungal action, through the microdilution technique (ELISA), which showed to be more efficient and cheaper than all other. In the healing test cicatrization occurred through the use of gel and glycolic extract of Psidium guajava L.; macroscopically the result was not significant compared to saline. However, histologically there were qualitative differences in the lesions, evidence of fibroplasia and vascular proliferation, granulatori phase characteristic in the groups treated with gel and glycolic extract of Psidium guajava L. from 72 hours on. This was not observed in the saline nor DERSANI® groups. So the effectiveness of the gel and of the glycolic extract of Psidium guajava L. on the healing of skin wounds can be proven in rats. This can be a new option for patients who depend on the Unique Health System (SUS).
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Estudo das atividades cicatrizante e antimicrobiana do extrato glicólico e do gel de Psidium guajava L. e estudo da estabilidade do gel / Study of the healing and antimicrobial activities of the glycolic extract and gel of Psidium guajava L. and study of the stability of the gel

Marise Kiyoko Hasegawa Okamoto 23 March 2010 (has links)
Psidium guajava L. é um arbusto perene, nativo da América tropical, cujas folhas são usadas na medicina tradicional latino-americana como antimicrobiano, antidiarreico e auxiliar no tratamento de diabetes. As caracterizações morfoanatômica e histoquímica das folhas, realizadas neste trabalho, contribuem no controle de qualidade da matéria-prima vegetal, empregada em formulações farmacêuticas. Os principais caracteres diagnósticos utilizados para a sua identificação foram: venação, tipo de tricomas, número de camadas de células epidérmicas, tipo de mesofilo e localização/tipo de cristais de oxalato de cálcio. Na triagem fitoquímica foi verificada a presença de taninos, flavonóides, óleos essenciais e de saponinas nas folhas e no extrato glicólico de P. guajava L. Após realizar o teste de estabilidade acelerada do gel de P. guajava L. foi observada a estabilidade de flavonóides e de taninos na formulação. Foram realizadas diferentes técnicas para verificar a atividade antimicrobiana do extrato e do gel de Psidium guajava L. tais como: microdiluição em placas utilizando detector de Elisa, difusão em disco, em \"template\" e macrodiluição em tubos. Os microrganismos testados foram Pseudomonas aeruginosa (ATCC9027), Escherichia coli (ATCC10536), Staphylococcus aureus (ATCC6538) e Cândida albicans (ATCC10231). Dimetilsulfóxido foi utilizado para a diluição do extrato glicólico e do gel. O meio de cultura utilizado para os métodos de microdiluição e macrodiluição foi o caldo caseína soja, para as técnicas de difusão o ágar caseína soja, ambos para bactérias; para levedura o meio Sabouraud em caldo e ágar. Foi observada eficácia antimicrobiana do gel (200 mg/mL) contra E. coli e (200 mg/mL e 500 mg/mL) contra P. aeruginosa e S. aureus. Os extratos glicólicos (200 µL/mL e 500 µL/mL) apresentaram atividade antimicrobiana para E. coli. O extrato glicólico (500 µL/mL) apresentou atividade contra P. aeruginosa e S. aureus, porém assim como o gel, não apresentou ação antifúngica, através da técnica de microdiluição (ELISA), que se destacou por ser mais econômica e eficiente que as demais. No teste de cicatrização ocorreu cicatrização da lesão através da utilização de extrato glicólico e gel de Psidium guajava L., porém macroscopicamente não foi significativo em relação à solução fisiológica. No entanto, em análise histológica das lesões, foram observadas diferenças qualitativas, evidências de fibroplasia e proliferação vascular, características de fase granulatória, nos grupos tratados com extrato glicólico e gel de Psidium guajava L. a partir de 72 horas, o que não foi observado no grupo solução fisiológica nem no grupo Dersani®. Comprova-se assim a eficácia do gel de extrato glicólico de Psidium guajava L. na cicatrização de feridas cutâneas em ratos. Esta pode ser uma nova opção de medicamento para pacientes que dependam do Sistema único de saúde (SUS). / Psidium guajava L. is a perennial shrub, native of tropical América used in Latin American traditional medicine as antimicrobial, antidiarrheic, and in the treatment of diabetes. The morphoanatomical characteristics and histochemistry of the leaves have been proven to be a rapid method for quality control of the crude drug used in pharmaceutical formulations. The main diagnostic characters for the identification of its leaves in the present paper were: venation, trichomes type, number of layers of epidermal cells, mesophyll type and location/type of crystals of calcium oxalate. The presence of tannins, flavonoids, essential oils and saponins was verified in the leaves and in the glycolic extract of P. guajava L. through phytochemical screening. The accelerated stability study of the gel P. guajava L. showed the stability of flavonoids and tannins in the formulation. Different techniques were performed to verify the antimicrobial activity of the extract and of the gel of Psidium guajava L. such as microdilution plates using Elisa detector, disk diffusion, in \"template\" and macrodilution tubes. The tested microorganisms were Pseudomonas aeruginosa (ATCC9027), Escherichia coli (ATCC10536), Staphylococcus aureus (ATCC6538) and Candida albicans (ATCC10231). Dimethyl sulfoxide was used for dilution of the glycolic extract and the gel. The culture medium used for the methods of macrodilution and microdilution was casein soy broth and casein soy agar for the diffusion technique, both for bacteria; for the yeast the Sabouraud medium in broth and agar. Antimicrobial efficacy of the gel (200 mg / mL) was observed against E. coli and (200 mg / mL and 500 mg / mL) against P. aeruginosa and S. aureus. Glycolic extracts (200 mL / mL and 500 mL / mL) showed activity against E. coli. The glycolic extract (500 µL/mL) showed activity against P. aeruginosa and S. aureus but similar to the gel, the extract didnt show antifungal action, through the microdilution technique (ELISA), which showed to be more efficient and cheaper than all other. In the healing test cicatrization occurred through the use of gel and glycolic extract of Psidium guajava L.; macroscopically the result was not significant compared to saline. However, histologically there were qualitative differences in the lesions, evidence of fibroplasia and vascular proliferation, granulatori phase characteristic in the groups treated with gel and glycolic extract of Psidium guajava L. from 72 hours on. This was not observed in the saline nor DERSANI® groups. So the effectiveness of the gel and of the glycolic extract of Psidium guajava L. on the healing of skin wounds can be proven in rats. This can be a new option for patients who depend on the Unique Health System (SUS).

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