v, 136 leaves : ill. / Title page, contents and abstract only. The complete thesis in print form is available from the University Library. / Thesis (Ph.D.)--University of Adelaide, Dept. of Zoology, 1971

Thesis (Ph.D.) -- University of Adelaide, Dept. of Zoology, 1971.

Thesis (Ph. D.)--University of Hong Kong, 1996. / Includes bibliographical references (leaf 243-274).

Thesis (Ph.D.)--University of Hong Kong, 1996. / Includes bibliographical references (leaf 243-274). Also available in print.

Thesis (M. Sc.)--University of Canterbury, 2006. / Typescript (photocopy). Includes bibliographical references (leaves 100-115). Also available via the World Wide Web.

Thesis (Ph.D.)--McMaster University, 2003. / Advisor: B. G. Galef, Jr. Includes bibliographical references (leaves 106-115). Also available via World Wide Web.

published_or_final_version / Biochemistry / Doctoral / Doctor of Philosophy

Orientador: Suely Regina Mogami Bomfim / Resumo: Uma das biotecnologias com propósito relevante à saúde humana é o plasma rico em plaquetas (PRP) o qual, não há registro protocolar padronizado para Rattus novergicus (Wistar). De fato, a falta de padronização do método leva pesquisadores à dúvida sob qual protocolo seguir para os melhores resultados referente as concentrações e mudanças morfológicas plaquetárias. Tal indeterminação promove morosidade nas pesquisas científicas. Frente a conjectura, usou-se o mínimo de animais possíveis em experimentação duplo-cego, retirando-se 3,2 mL de sangue de cada animal por pulsão cardíaca o qual posteriormente, foi testado em três protocolos distintos. Cada protocolo foi designado como P1; P2; P3 e o grupo controle designado PSP. Desta forma, i. P1 foi submetido a uma única centrifugação de 160G por 6min resultando em 100 μL de PRP; ii. P2 foi resignado a dupla centrifugação sendo a primeira etapa 160G por 20min e a segunda etapa 400G por 15 min, resultando em 100 μL de PRP e iii. P3 destinado a dupla centrifugação sendo a primeira etapa 300G por 10 min e a segunda etapa 640G por 10 min, resultando em 100 μL de PRP. Obtivemos maiores concentrações plaquetárias dos protocolos P2 e P3 com concentrações superiores a 519%. Quanto a visualização morfológica plaquetária por esfregaço, os três protocolos apresentaram boa visualização, no entanto P3 sobressaiu-se aos demais quanto ao tempo global de preparo e menor inclusão eritrocitária. Assim, padronizamos um modelo animal in vivo para futur... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: One of the biotechnologies with a relevant human health purpose is platelet rich plasma (PRP), which has no standardized protocol record for Rattus novergicus (Wistar). In fact, the lack of standardization of the method leads researchers to doubt which protocol to follow for the best results regarding platelet concentrations and morphological changes. Such indeterminacy promotes slowness in scientific research. In view of the conjecture, how few animals were used in a double-blind experiment and 3.2 mL of blood was drawn from each animal by heartbeat and subsequently tested in three separate protocols. Each protocol was designated as P1; P2; P3 is the control group designated PSP. i. P1 was subjected to a single 160G centrifugation for 6min resulting in 100 μL of PRP, ii. P2 was resigned to double centrifugation with the first stage 160G for 20min and the second stage for 400G for 15 min, resulting in 100 μL of PRP and iii. P3 intended for double centrifugation with the first stage of 300G for 10 min and the second stage of 640G for 10 min, resulting in 100 μL of PRP. We obtained higher platelet concentrations of protocols P2 and P3 with concentrations higher than 519%. Regarding the morphological visualization of platelet smears, the three protocols presented good visualization, but P3 stood out for the others in terms of total preparation time and less erythrocyte invasion. Thus, we standardized an in vivo animal model for future scientific investigations interested in the ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

RESUME Ce travail s'inscrit dans le cadre d'une étude visant à identifier des gènes de prédisposition mineure au cancer mammaire en recourant au rat comme modèle. Vingt locus de trait quantitatif ou QTLs ont été associés au cancer mammaire induit chimiquement chez le rat (Cotroneo et al., 2006; Haag et al., 2003; Hsu et al., 2007; Lan et al., 2001; Quan et al., 2006; Samuelson et al., 2005; Samuelson et al., 2007; Shepel et al., 1998). Sept d'entre eux ont été identifiés au laboratoire suite à une analyse de liaison génétique du croisement impliquant la lignée sensible SPRD-Cu3 et la lignée résistante WKY/E56. Chacun des 7 locus identifiés a été associé à l’un des trois phénotypes tumoraux (la multiplicité, la latence et la vitesse de croissance tumorale) (Quan et al., 2006). Le présent travail a pour objectif de tester et de préciser les observations. A cet effet plusieurs approches ont été suivies. La première approche a consisté à s'interroger sur la nature des gènes de prédisposition; nous nous sommes demandés si ces gènes étaient des gènes suppresseurs de tumeurs. Pour cela nous avons caractérisé des tumeurs d'animaux F1 issus du croisement (SPRD-Cu3 X WKY) pour des éventuelles pertes d'hétérozygotie, indice essentiel de la présence de gènes suppresseurs de tumeurs, au niveau de chacun des 7 QTLs identifiés au laboratoire. A l’issue de cette étude, nous n’avons pas pu mettre en évidence des indices de présence de gènes suppresseurs de tumeurs dans les QTLs. La deuxième approche a consisté dans un premier temps à réaliser et étudier des lignées congéniques SPRD-Cu3.WKY pour plusieurs des sept locus identifiés statistiquement, ceci dans le but d'assurer l'existence des QTLs et de mesurer plus précisément l'implication de chacun d'entre eux dans le contrôle de la sensibilité au cancer mammaire. L’existence de 5 QTLs a ainsi pu être confirmée : trois QTLs situés sur les chromosomes 1p.tel, 5 et 18 sont associés à la multiplicité tumorale, un QTL situé sur le chromosome 9 est associé à la latence tumorale et un QTL situé sur le chromosome 10 est associé à la vitesse de croissance tumorale. Dans un deuxième temps, nous avons créé et analysé une lignée dite multicongénique afin de tester les relations d'épistasie éventuelles entre les QTLs situés sur les chromosomes 5 et 18. Nous avons ainsi démontré que le QTL situé sur le chromosome 18, contrôle à la fois la multiplicité tumorale et la vitesse de croissance tumorale. Cependant les deux traits sont indépendamment modulés par le QTL situé sur le chromosome 5. La troisième approche a consisté à appliquer la méthode du gène candidat à notre modèle. Les gènes candidats ont été sélectionnés sur base d'analyses de profils d'expression génique réalisées préalablement. Les gènes différentiellement exprimés entre les souches parentales et localisés dans les régions d'intérêt ont été considérés comme des candidats de choix. Nous avons évalué la candidature de quelques-uns de ces gènes dont Pla2g2a et Pfn1.

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