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Efeito do resveratrol na qualidade e desenvolvimento de embriões bovinos criopreservados ou conservados em meio holding / Effect of resveratrol on the quality and development of bovine embryos cryopreserved or preserved in the middle holdingSilva, Ariany Rafaella Neto 04 August 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-08-04 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / This study was developed with the objective of evaluating the response of bovine
embryos produced in vitro (PIV) the addition of resveratrol (Resv) to recultivo to
embryos vitrified (Experiment 1-E1) and medium Holding for fresh embryos
(Experiment 2-E2) to check the maintenance or improvement in the quality of these
embryos. In E1 PIV vitrified bovine embryos were heated and recultivados in the
medium containing 0.5 μM of resveratrol, evaluating the re-expansion rates, hatching
and cell quality by analysis of TUNEL. In E1, the hatching rate of recultivo more than
24 hours after (P < 0.05) in the Resv Group (37,7 vs. 19,1%). The rate of embryos
according to the stage of development did not show difference between treatments.
Even in E1, for fresh embryos PIV the total number of cells (NTC) was superior to that
found in the vitrified embryos (131,6 vs 88,8 and 82,7%) , as well as the NCA (number
of apoptotic cells) was lower (6,3 ± 0,8) compared with control groups and resveratrol
(15,8 ± 1.2 and 13,5 ± 1,0), which did not differ among themselves in these variables.
No difference was observed in embryos degenerates and reactive oxygen species (ROS)
and Glutathione (GSH). In E2 bovine embryos were fresh bottled PIV in 0,25 ml straws
with a holding in the presence (TR6 and TR10) or absence (TH6 and TH10) of
resveratrol and kept on warming plate to 36° C in different times, six and 10 hours,
followed by the unloading spouts and recultivo until 24 hours. Hatching rates at 24
hours of embryos treated with antioxidant tended to be greater than in the control. Bx
TR10 rates was higher (51,2%) the TR6 (30,8%) (P < 0.05), the other stages of
development were similar, the NTC was lower in TH10. The index of EROS was
superior in TH10 (23,4126 ± 1,5661). The values of the GSH TR6 (95,2208) were
larger than TH6 (30,7594) (P < 0.05), the TR10 issuing GSH (49,5330 ± 6,5332) did
not differ from TH10 group (47,2044) (P > 0,05). / Esse estudo foi desenvolvido com os objetivos de avaliar a resposta de embriões
bovinos produzidos in vitro (PIV) à adição de resveratrol (Resv) aos meios de recultivo
para embriões vitrificados (Experimento 1 - E1) e Holding para embriões frescos
(Experimento 2 - E2) para verificar a manutenção ou melhora na qualidade desses
embriões. No E1 embriões bovinos PIV vitrificados foram aquecidos e recultivados em
meio contendo 0,5 μM de resveratrol, avaliando-se as taxas de reexpansão, eclosão e
qualidade celular através da análise de TUNEL. No E1, a taxa de eclosão após 24 horas
de recultivo foi superior (P < 0.05) no grupo Resv (37,7 vs 19,1%). Na taxa de embriões
de acordo com o estágio de desenvolvimento não apresentaram diferença entre
tratamentos. Ainda no E1, para os embriões PIV frescos o número total de células
(NTC) foi superior ao encontrado nos embriões vitrificados (131,6 vs 88,8 e 82,7%),
assim como o NCA (número de células apoptóticas) foi menor (6,3 ± 0,8) em relação
aos grupos controle e resveratrol (15,8 ± 1,2 e 13,5 ± 1,0), que não diferiram entre si
nessas variáveis. Não foi observada diferença nas taxas de embriões degenerados e
emissão de espécies reativas ao oxigênio (EROS) e glutationa (GSH). No E2 embriões
bovinos PIV frescos foram envasados em palhetas de 0,25mL com meio holding na
presença (TR6 e TR10) ou ausência (TH6 e TH10) de resveratrol e mantidos sobre
placa aquecedora a 36°C em diferentes tempos, seis e 10 horas, seguido do desenvase e
recultivo até 24 horas. As taxas de eclosão às 24hs dos embriões tratados com
antioxidante tenderam a ser maior que no controle. As taxas de Bx TR10 foi superior
(51,2%) ao TR6 (30,8%) (P < 0,05), os demais estágios de desenvolvimento
apresentaram-se semelhantes. O NTC foi menor no TH10, assim como a MCI. O índice
de EROS foi superior no TH10 (23,4126 ± 1,5661). Os valores de GSH do TR6
(95,2208) foram maiores que TH6 (30,7594) (P < 0,05), no TR10 a emissão de GSH
(49,5330 ± 6,5332) não diferiu do grupo TH10 (47,2044) (P > 0,05).
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