Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2018-06-19T13:32:21Z No. of bitstreams: 1 Evaldo Moreira da Silva Junior.pdf: 1681061 bytes, checksum: 3c8938d092baff83e502672b6d6a1b69 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-19T13:32:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Evaldo Moreira da Silva Junior.pdf: 1681061 bytes, checksum: 3c8938d092baff83e502672b6d6a1b69 (MD5) Previous issue date: 2015-12-10 / Muscle lesions although more common in athletes also affects sedentary people, leading to partial or total removal of the individual from their daily activities. The muscle repair process comprises interdependent phases orchestrated by immune cells that invade the tissue behind the injury occurrence. Delays or enhancements at different stages can lead to chronic inflammation cases or fibrosis, reinforcing the search for an alternative treatment. The therapeutic ultrasound (US) is widely used to treat muscle injuries, but lack scientific evidence to explain its mechanism of action. This study aimed aims to elucidate the role of US in the inflammatory infiltrate cells presentes on the muscle tissue behind acute injury. For this purpose, 45 Wistar rats will were used, separated into 3 groups (5 animals in the control group, 20 animals suffer injury and will not receive treatment and 20 animals suffer injury and will be treat with US). The adopted procedure is the cryoinjury lesion consisting of two bat applications of cooled in liquid nitrogen directly into the in tibialis anterior (TA) muscle. The US treatment and these groups will be evaluate after 1, 2, 3 and 7 days. The US treatment (stationary mode, pulse 1: 4, with a frequency of 1 MHz and intensity of 0.4 W / cm2) was performed daily for 3 minutes. At the end of the study, the animals were euthanized with an anesthetic overdosis and the TA muscles were removed for neutrophil infiltration analysis and the different phenotypes of macrophages during muscle remodeling by immunostaining (positive for CD68, CD80, CD163, CD206 and elastase). The images were analyzed and quantified using the Image J software (National Institute of Health - NIH, USA). Statistical analysis of data was performed according to evaluating the distribution of the same by & Kolmogorov Smirnov test. Treatment with US generated in the damaged areas of the treated muscles, reduction in the number of neutrophils (elastase +) during the periods 1 and 2 days, an increase of M1 macrophages (CD80 +) in one day period and reducing them in periods of 2, 3 and 7 days. It was also noted when comparing the injured muscles untreated, the US generated reduced profile macrophages M2a (CD206 +) on day 2 and increased this phenotype cells present on day 3. The labeling of total macrophages (CD68 +) uS-treated animals was lower than that present in untreated animals on days 2, 3 and 7. There was no difference in other temporal comparisons. As continuity and the intensity of cells presence with pro or anti inflammatory action can leading to chronic inflammation or fibrosis cases, attesting the US's ability can modulate the occurrence of these cells is an important step in understanding the therapeutic potential of this resource in the treatment of muscle injuries. / As lesões musculares embora mais comuns em atletas, atingem também os não praticantes de atividades física, levando o indivíduo ao afastamento de suas atividades diárias. O reparo muscular compreende fases interdependentes orquestradas pelas células imunes que invadem o tecido logo após a ocorrência da lesão. O ultrassom (US) terapêutico é vastamente utilizado no tratamento de lesões musculares, porém faltam evidências científicas que expliquem seu mecanismo de ação. Este trabalho visou elucidar o papel do US sobre as células componentes do infiltrado inflamatório presente no tecido muscular após lesão aguda. Para tanto, foram utilizados 45 ratos Wistar, separados em 3 grupos (5 animais no grupo controle, 20 animais sofreram lesão e não receberam tratamento e 20 animais sofreram lesão e foram tratados com US). O procedimento de lesão adotado foi a criolesão com duas aplicações de bastão resfriado em nitrogênio líquido diretamente no músculo tibial anterior (TA). O US (modo estacionário, pulsado 1:4, com frequência de 1 MHz e intensidade de 0,4 W/cm2) foi aplicado diariamente por 3 minutos no respectivo músculo. Ao término dos períodos experimentais (1, 2, 3 e 7 dias), os músculos TA foram analisados quanto a presença de neutrófilos e dos diferentes fenótipos de macrófagos por meio de imunomarcação (positividade para elastase, CD68, CD80 e CD206). As imagens foram analisadas e quantificadas por meio do software Image J (NIH, EUA). A análise estatística dos dados foi realizada de acordo com a avaliação da distribuição dos mesmos pelo teste de Kolmogorov & Smirnov. O tratamento com US gerou, nas áreas lesionadas dos músculos tratados, redução no número de neutrófilos (elastase+) nos períodos de 1 e 2 dias, aumento de macrófagos M1 (CD80+) no período de 1 dia e redução destes nos períodos de 2, 3 e 7 dias. Também foi possível observar quando da comparação com os músculos lesionados não tratados, que o US gerou diminuição de macrófagos de perfil M2a (CD206+) no dia 2 e aumento da presença de células deste fenótipo no dia 3. A marcação de macrófagos totais (CD68+) nos animais tratados com US foi menor do que a presente nos animais não tratados nos dias 2, 3 e 7. Não houve diferença nas demais comparações temporais. Como continuidade e a intensidade da presença de células com ação pró ou anti inflamatória pode levar a quadros de inflamação crônica ou de fibrose, a comprovação da capacidade do US em modular a ocorrência destas células representa uma importante passo para a compreensão do potencial terapêutico deste recurso no tratamento de lesões musculares.

Made available in DSpace on 2016-08-17T18:39:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 5657.pdf: 4882476 bytes, checksum: ecaf13ba1de9758d6f63d658eefadedc (MD5) Previous issue date: 2012-02-17 / Financiadora de Estudos e Projetos / The objective of this study was to analyze the effects of Low level laser therapy (LLLT) associated with aerobic physical exercise on the muscle regeneration process during 2 periods of rest after of the muscle injury in rats. Forty rats were divided into 2 groups (A and B), and 4 subgroups each: GC (Control Group) - cryolesioned untreated; GE (Exercise Group) - cryolesioned treated with aerobic physical exercise; GL (Laser Group) - cryolesioned treated with laser; GEL (Exercise and Laser Group) - cryolesioned treated with laser and aerobic physical exercise. The tibialis anterior (TA) of the middle belly was injured by a cooling iron bar (cryoinjury). The animals in Group A remained at rest for 3 days, while Group B remained at rest for 7 days. The laser parameters were: 780 nm, 15 mW, during 10 s, 0.152 J e 3.8 J/cm². Physical exercises with or without laser were performed during 5 days, each session lasting 12 min at a treadmill velocity of 17 m/min. The AT muscles were removed for histological and morphometric analysis. The damage area was significantly smaller for the GEL, when remained at rest for 3 and 7 days respectively, (4.4±0.42 % and 3.5±0.14 %, p < 0.05) compared to GL (18.6±0.64 % and 7.5±0.13 %), GE (21±0.26 % and 8.7±0.32 %) and GC (23.9±0.37 % and 21.4±0.38 %). In addition, the number of blood vessels were significantly higher for the GEL, when remained at rest for 3 and 7 days respectively, (71.2±13.51 % and 104.5±11,78, p < 0.05) compared to the GL (60.6±11.25 and 93.5±16.87), GE (51.6±7.3 and 93.8±15.1) and GC (34.4±2.54 and 65.7±14.1). Therefore, the laser applied before the physical exercise on the treadmill stimulated an angiogenesis and accelerated the process of muscle regeneration. / O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos da laserterapia e do exercício físico aeróbio sobre a regeneração do músculo tibial anterior de ratos com diferentes períodos de repouso após a lesão. Foram utilizados para este estudo 40 ratos Wistar que foram submetidos à cirurgia para criolesão no músculo tibial anterior (TA). Os animais foram divididos em 2 grupos (A e B). Os animais do Grupo A permaneceram em repouso por 3 dias, enquanto o Grupo B permaneceu em repouso por 7 dia. Cada grupo foi subdividido em 4 grupos: o GC (Grupo Controle) lesionado e não tratado; o GE (Grupo Exercício) lesionado e tratado com exercício físico na esteira; o GL (Grupo Laser) - lesionado e tratado com laser e; o GEL (Grupo Exercício e Laser) lesionado e tratados com exercício físico na esteira e laser. Os parâmetros do laser utilizado foram 780 nm, 15 mW de potência, tempo de 10 s, com energia de 0,125J e dose de 3,8 J/cm2. O exercício físico com ou sem laser foi realizado durante 5 dias, cada sessão teve a duração de 12 minutos e a velocidade da esteira foi 17 m/min. Os músculos TA foram retirados para análise histológica e morfométrica. A área de lesão foi significativamente menor no GEL, quando o repouso foi mantido por 3 e 7 dias respectivamente, (4,4±0,42 % e 3,5±0,14 %, p < 0.05) comparado ao GL (18,6±0,64 % e 7,5±0,13 %), GE (21±0,26 % e 8,7±0,32 %) e GC (23,9±0,37 % e 21,4±0,38 %). Ainda, o número de vasos sanguíneos foi significantemente maior no GEL, quando o repouso foi mantido por 3 e 7 dias respectivamente, (71,2±13,51 % e 104,5±11,78, p < 0.05) comparado ao GL (60,6±11,25 e 93,5±16,87), GE (51,6±7,3 e 93,8±15,1) e GC (34,4±2,54 e65,7±14,1). Portanto, o laser aplicado antes do exercício físico na esteira estimulou a angiogênese e acelerou o processo de regeneração muscular.

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2018-06-19T15:19:00Z No. of bitstreams: 1 Jacira Souza Ribeiro.pdf: 1136563 bytes, checksum: 6f35b1abf4cd3ca62f8560ee50069169 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-19T15:19:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jacira Souza Ribeiro.pdf: 1136563 bytes, checksum: 6f35b1abf4cd3ca62f8560ee50069169 (MD5) Previous issue date: 2015-12-10 / The low-intensity pulsed ultrasound (LIPUS) has been used to promote muscle repair with better quality and in shorter time, however, there is no standardization for the parameters used in clinical practice. Thus, the aim of this study was to evaluate the effect of USPBI on the repair of skeletal muscle of rats after cryoinjury. Male Wistar rats (n=45) were divided into 3 groups: control; only injury; Injured and treated with LIPUS. The LIPUS application was performed daily, using the stationary mode, pulse 1: 4, 1 MHz frequency, intensity 0.4 W / cm2 for 3 minutes. The injured groups were euthanized at 1, 2, 3 and 7 days following injury induction. The tibialis anterior muscle (TA) was removed for morphological analysis and collagen remodeling, and the muscle sections stained with H&E and Picrosirus Red, respectively. Then, the slides were photographed and quantified using the program "Image J". The analysis of MyoD and myogenin gene expression was performed using real time PCR. The results showed that the USPBI promoted modulation of inflammatory responses with a decrease of inflammatory infiltrates after 1, 2, 3 and 7 days, and reduction of myonecrosis after 7 days, followed by an increase in the number of immature fibers after 3 and 7 days, and increase of blood vessels on days 2, 3 and 7 days. Regarding the deposition of collagen, the results showed better organization of the fibers in all experimental periods, and increased deposition of collagen fibers in the injured group and treated after 2 and 3 days. In addition, treatment with LIPUS promoted increased gene expression of MyoD reduction after 3 days and after 7 days. Regarding myogenin expression, the treated group showed increased expression after 7 days. In conclusion, the LIPUS induced positive effects on muscle repair process leading to reduced inflammation and myonecrosis, increased in the immature fibers and mature blood vessels, as well as modulation of Myod and miogenin in different periods. / O ultrassom pulsado de baixa intensidade (USPBI) tem sido utilizado por promover um reparo muscular de melhor qualidade e menor duração, porém, não há padronização quanto aos parâmetros utilizados na prática clínica. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do USPBI sobre o reparo do músculo esquelético de rato após criolesão. Foram utilizados 45 ratos Wistar, machos, divididos em 3 grupos experimentais: controle; somente lesão; lesionado tratado com USPBI. A aplicação de USPBI foi realizada diariamente após indução da lesão, modo estacionário, pulsado 1:4, frequência 1 MHz, intensidade 0,4 W/cm2, durante 3 minutos. Os grupos lesionados foram eutanasiados após 1, 2, 3 e 7 dias da indução da lesão. O músculo tibial anterior (TA) foi removido para análise morfológica e de remodelamento do colágeno, sendo os cortes corados com H&E e Picrosirius Red, respectivamente. As lâminas foram fotografadas e quantificadas com auxílio do programa “Image J”. A expressão gênica de MyoD e miogenina foi obtida por PCR em tempo real. Os resultados evidenciaram que o USPBI promoveu modulação da resposta inflamatória, havendo redução do infiltrado inflamatório após 1, 2, 3 e 7 dias, e redução da mionecrose após 7 dias, seguido pelo aumento no número de fibras imaturas após 3 e 7 dias, e aumento dos vasos sanguíneos nos dias 2, 3 e 7 dias. Em relação à deposição de colágeno, os resultados evidenciaram melhor organização das fibras em todos os períodos experimentais, além de aumento da deposição de fibras colágenas no grupo lesionado e tratado após 2 e 3 dias. Além disso, o tratamento com USPBI promoveu aumento da expressão gênica de MyoD após 3 dias e redução após 7 dias. Em relação a expressão de miogenina, o grupo tratado demonstrou aumento da expressão após 7 dias. Em conclusão, o USPBI nos parâmetros utilizados induziu efeitos positivos ao processo de reparo muscular causando redução do processo inflamatório e mionecrose, aumento de fibras jovens vasos sanguíneos maduros, além de modulação de MyoD e miogenina nos diferentes períodos avaliados.