Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004Bitstream added on 2014-06-13T20:26:14Z : No. of bitstreams: 1 tebet_jm_dr_botfmvz.pdf: 1202705 bytes, checksum: 87aefda16f89b84e0977e3fbd5f9e260 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo geral deste estudo foi verificar o efeito do processo de congelação e descongelação sobre o sêmen de três espécies de felinos, Leopardus tigrinus (n = 5, 15 ejaculados), L.pardalis (n=5, 17 ejaculados) e Felis catus (n = 10). A colheita de sêmen foi realizada por eletroejaculação (experimento 1 e 2) ou colheita do epidídimo e ducto deferente (experimento 2). Os ejaculados foram processados segundo o mesmo protocolo: centrifigação, suspensão em criodiluente, envasamento em palhetas de 0,25 mL (5 x 106 sptz), equilíbrio de uma hora a 5ºC (<0,5ºC/min), congelação em vapor de nitrogênio por vinte minutos e imersão. A descongelação foi efetuada a 46ºC por 15 segundos. Foi analisada a ultraestrutura espermática nas três espécies para verificar os danos causados pela criopreservação. O experimento I testou a diferença entre a eficiência de dois criodiluentes, o TEG (7% glicerol) e o MP- 50 (3% glicerol, 2% dimetilformamida), utilizados para congelar o sêmen de L. tigrinus e L. pardalis. Os resultados mostraram que os diluentes não diferiram nas duas espécies. L. tigrinus apresentou decréscimo marcante no índice de motilidade progressiva (IMP) (média de 36,3 pontos). L. pardalis apresentou queda menor no IMP (média de 18,1 pontos). Ambas as espécies tiveram elevação na porcentagem de defeitos maiores (média de 7,2 e 24,7 pontos percentuais, respectivamente) em função do aumento da incidência de alterações de acrossomo. A contaminação do sêmen por urina foi um fato marcante para L. tigrinus (53% dos ejaculados) e L. pardalis (59%), o que pode ter resultado em alta incidência de caudas dobradas e enroladas (23,4% e 13,3%) e sugeriu uma proporcional perda de resistência da célula espermática frente aos estresses da criopreservação. O experimento II utilizou o gato doméstico e testou... . / The general aim of this study was to evaluate the effect of freezing/thawing procedure on the semen of three feline species, Leopardus tigrinus (n=5, 15 ejaculates), L. pardalis (n=5, 17 ejaculates) and Felis catus (n=10). Semen was obtained by electroejaculation (experiment 1 and 2) or directly from epididymal and vasa deferentia (experiment 2) and processed by the same protocol: centrifugation (300g/10min), extending with cryodiluent, loading into 0,25 mL straws (5 x 106 sptz) and storage at 5ºC for one hour (<0,5ºC/min), freezing in nitrogen vapor for 20 minutes and immersion. Thawing was achieved at 46ºC for 15 minutes. Spermatozoa ultrastructure was analyzed to detect injuries caused by cryopreservation in the three species. The first experiment tested the difference on efficiency between two freezing extenders, TEG (7% glycerol) and MP-50 (3% glycerol + 2% dimetilformamide) utilized to freeze L. tigrinus and L. pardalis sperm. The results appointed that there weren't evident differences between the two cryodiluents, in both species. L tigrinus exhibited a high decrease on sperm progressive motility index (PMI) (mean 36.3). L. pardalis showed lighter declines on PMI (mean 18,1). Both species presented elevation in percentage of major deffects (mean 7.2 and 24.7 points, respectively) due to the increase of acrossomal injuries. Sperm contamination by urine was a remarkable fact to L tigrinus (53% of the ejaculates) and L. pardalis (59% of the ejaculates) what occasioned and caused loss of spermatic resistance to face the stress of cryopreservation. The second experiment studied domestic cats and tested the difference between two techniques of semen collection - the electroejaculation and the acquisition from epididymides and vasa deferentia - faced to cryopreservation in TEG (7% glycerol) diluent. Electroejaculation was followed by orchiectomy and epididymal acquisition of semen... (Complete abstract, click electronic address below).

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005Bitstream added on 2014-06-13T20:59:36Z : No. of bitstreams: 1 vianna_fp_me_botfmvz.pdf: 192638 bytes, checksum: b176cb07b3c7470d7a90e481c0abf4b1 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Com objetivo de correlacionar e associar a eficiência do teste de termoresistência (rápido e lento) de sêmen congelado na espécie bovina com a fertilidade a campo após a Inseminação Artificial foram utilizados 64 ejaculados de 39 touros da raça Nelore com idades entre 2 e 10 anos pertencentes a central de inseminação artificial Jacarezinho Genetics. Após as colheitas as amostras de sêmen foram avaliadas macro e microscopicamente quanto ao volume, aspecto, turbilhonamento, motilidade total, vigor, concentração e patologia espermática. Posteriormente os ejaculados foram congelados com diluente (TRIS) a uma altura de 3 cm do nitrogênio líquido (-140ºC) em um tanque de congelação durante 15 minutos. Para análise das partidas congeladas foram utilizados os parâmetros de motilidade total subjetiva, vigor, análise computadorizada do movimento espermático (HTMA – IVOS 10), análise de fluorescência para avaliar a integridade de membrana pós-descongelação, após as provas rápidas (46ºC/30`) e lenta (38ºC/5h) de termoresistência. Os valores de motilidade total após as provas de termoresistência foram subdivididos em 4 grupos (0= 0% de motilidade, 1= 1-20% de motilidade, 2= 21-40% de motilidade e 3= > 40% de motilidade). O teste de fertilidade foi realizado através da inseminação artificial de 3161 fêmeas da raça Nelore, com idade entre 2 e 16 anos em uma mesma propriedade, sendo a fertilidade avaliada através do índice de prenhez a 1ª inseminação artificial. Para verificar a associação entre as ocorrências de interesse e a... . / With the aim of correlating the efficiency of the thermoresistance test (fast and slow) of the frozen sperm in the bovine species with the fertility 64 were used ejaculated of 39 bulls of the race Nelore with age between 2 and 10 years belonging to a Headquarter of Artificial Insemination. After the crops the sperm samples were appraised macro and microscopical as for the volume, aspect, turbine, total motility, energy, concentration and spermatic pathology.Later the ejaculated were frozen in diluent (TRIS) to a height of 3 cm of the liquid nitrogen (-140º C) in a freezing tank for 15 minutes. For analysis of the frozen departures the parameters of subjective total motility, energy, computerized analysis of the spermatic movement (HTMA – IVOS 10) were used. Fluorescence test was also used to evaluate the integrity of the membrane post-defrosting after the proofs fast (46°C/30’) and slow (38°C/5h) of thermoresistance. The total motility values after the thermoresistance proofs they were subdivided into 4 categories denominated of adaptation (0=0% of motility, 1= 0- 20% of motility, 2= 20-40% of motility and 3= >40% of motility).The fertility test was accomplished through the artificial insemination of 3161 females of the race Nelore, with age between 2 and 16 years in a same property and the fertility was appraised through the pregnancy index after the first artificial insemination. In order to verify the association between the occurrences of interest and the fertility it was used the proof of Qui-square, with the calculation of statistics X2 and P. The statistics were considered significant when p<0,05 and in the cases which 0,05<p<0,10 the tendency was referred to significance, where p is the probability of erroneously concluding for the significance.The results showed that there were no significant differences among the categories of total... (Complete abstract, click electronic address below).

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005Bitstream added on 2014-06-13T20:19:20Z : No. of bitstreams: 1 oliveira_jv_me_botfmvz.pdf: 299191 bytes, checksum: 712daaf6fc5fbb6e68b25bce715b679f (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O presente trabalho teve os objetivos: avaliar laboratorialmente o sêmen congelado de asininos através do Hamilton Thorne (HTMA); determinar os indices de fertilidade do sêmen criopreservado em jumentas e éguas e verificar a resposta uterina das jumentas perante o sêmen in-natura, diluente e congelado. No experimento 1 as amostras de sêmen, foram criopreservados em dois criotubos: meio macrotubo - 2,5 mL (M) ou palheta - 0,5 mL (P) com diluente MP50 e dez formulações de crioprotetores: 1= 2% DMSO e 2% DF; 2= 3% DF; 3= 2% MF e 2% de Glicerol; 4= 2% dimetil acetamida e 2% de glicerol; 5= 3% metil formamida; 6= 3% de dimetil acetamida; 7= 3% glicerol e 2% dimetil acetamida; 8= (Specific Patogen Free) 3% glicerol e 2% dimetil formamida; 9= 3% Dimetil sulfóxido e 2% glicerol; 10= 1% etilieno glicol + 3% dimetil sulfóxido e 1% dimetil formamida. As comparações realizadas entre os 2 tipos de envase, meio macrotubo e palhetas, não demonstraram superioridade (P>0,05) entre si, não havendo interação com as formulações utilizadas, nos parâmetros analisados. Para as características de motilidade total foi verificado que os tratamentos M4, P4 e P6 foram superiores ao M7 e P5 (P<0,05) a avaliação da motilidade progressiva mostrou qua a formulação M4 se distingüiu exclusivamente do M7 (P<0,05). O estudo da linearidade (LIN), apontou diferença exclusivamente entre os tratamentos M3 e M6 (P<0,05). Os valores obtidos de VCL (velocidade real), de VAP (velocidade do trajeto espermático) e de VSL (velocidade retílinea) proporcionaram resultados semelhantes entre os tratamentos (P>0,05). Na avaliação da membrana plasmática pela fluorescência, foi encontrado maior valor para o tratamento P6, que diferiu significativamente de P5 e M7, além disso o tratamento P4 se diferenciou de P5 (P<0,05)... . / The current paper aimed at conducting laboratoty tests in order to evaluate the frozen semen of the asinines, determining the fertility rate of semen cryopreserved in female donkeys and mares and also verifying the uterine response of female donkeys to the in natura, MP50 extender and frozen semen. In experiment 1, the semen samples were cryopreserved in two cryotubes: half macro tube 2.5 mL (M) or pallets - 0.5 mL (P) with MP50 diluting and ten formulations of cryoprotectors: 1= 2% DMSO and 2% DF; 2= 3% DF; 3= 2% MF and 2% of glycerol; 4= 2% dimethyl acetamide and 2% of glycerol; 5= 3% methyl formamide; 6= 3% of dimethyl acetamide; 7= 3% glycerol and 2% dimethyl acetamide; 8= (Specific Patogen Free) 3% glycerol and 2% dimethyl formamide; 9= 3% dimethyl sulfoxide and 2% glycerol; 10= 1% ethylene glycol + 3% dimethyl sulfoxide and 1% dimethyl formamide. The comparisons made between the two types of packing, did not show superiority (P>0.05) between themselves, and there was no interaction with the used formulations within the analyzed parameters. Regarding the characteristic total motility, it has been verified that the M4, P4 and P6 treatments were superior to the M7 and P5 (P<0,05). The evaluation of the progressive motility showed that the M4 formulation differed exclusively from the M7 (P<0,05). The linearity study demonstrated difference particularly between the M3 and M6 treatments (P<0,05). The values of real velocity, sperm direction velocity and linear velocity did not show similar results between the treatments (P>0,05). Concerning the evaluation of the plasma membrane by fluorescence, a higher value was found for the P6 treatment, which differed significantly from the P5 and M7. Moreover, the P4 treatment was different form the P5 (P<0,05). The other comparisons made... (Complete abstract, click electronic address below).

Orientador : Maria Denise Lopes / Resumo: O objetivo geral deste estudo foi verificar o efeito do processo de congelação e descongelação sobre o sêmen de três espécies de felinos, Leopardus tigrinus (n = 5, 15 ejaculados), L.pardalis (n=5, 17 ejaculados) e Felis catus (n = 10). A colheita de sêmen foi realizada por eletroejaculação (experimento 1 e 2) ou colheita do epidídimo e ducto deferente (experimento 2). Os ejaculados foram processados segundo o mesmo protocolo: centrifigação, suspensão em criodiluente, envasamento em palhetas de 0,25 mL (5 x 106 sptz), equilíbrio de uma hora a 5ºC (<0,5ºC/min), congelação em vapor de nitrogênio por vinte minutos e imersão. A descongelação foi efetuada a 46ºC por 15 segundos. Foi analisada a ultraestrutura espermática nas três espécies para verificar os danos causados pela criopreservação. O experimento I testou a diferença entre a eficiência de dois criodiluentes, o TEG (7% glicerol) e o MP- 50 (3% glicerol, 2% dimetilformamida), utilizados para congelar o sêmen de L. tigrinus e L. pardalis. Os resultados mostraram que os diluentes não diferiram nas duas espécies. L. tigrinus apresentou decréscimo marcante no índice de motilidade progressiva (IMP) (média de 36,3 pontos). L. pardalis apresentou queda menor no IMP (média de 18,1 pontos). Ambas as espécies tiveram elevação na porcentagem de defeitos maiores (média de 7,2 e 24,7 pontos percentuais, respectivamente) em função do aumento da incidência de alterações de acrossomo. A contaminação do sêmen por urina foi um fato marcante para L. tigrinus (53% dos ejaculados) e L. pardalis (59%), o que pode ter resultado em alta incidência de caudas dobradas e enroladas (23,4% e 13,3%) e sugeriu uma proporcional perda de resistência da célula espermática frente aos estresses da criopreservação. O experimento II utilizou o gato doméstico e testou... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: The general aim of this study was to evaluate the effect of freezing/thawing procedure on the semen of three feline species, Leopardus tigrinus (n=5, 15 ejaculates), L. pardalis (n=5, 17 ejaculates) and Felis catus (n=10). Semen was obtained by electroejaculation (experiment 1 and 2) or directly from epididymal and vasa deferentia (experiment 2) and processed by the same protocol: centrifugation (300g/10min), extending with cryodiluent, loading into 0,25 mL straws (5 x 106 sptz) and storage at 5ºC for one hour (<0,5ºC/min), freezing in nitrogen vapor for 20 minutes and immersion. Thawing was achieved at 46ºC for 15 minutes. Spermatozoa ultrastructure was analyzed to detect injuries caused by cryopreservation in the three species. The first experiment tested the difference on efficiency between two freezing extenders, TEG (7% glycerol) and MP-50 (3% glycerol + 2% dimetilformamide) utilized to freeze L. tigrinus and L. pardalis sperm. The results appointed that there weren't evident differences between the two cryodiluents, in both species. L tigrinus exhibited a high decrease on sperm progressive motility index (PMI) (mean 36.3). L. pardalis showed lighter declines on PMI (mean 18,1). Both species presented elevation in percentage of major deffects (mean 7.2 and 24.7 points, respectively) due to the increase of acrossomal injuries. Sperm contamination by urine was a remarkable fact to L tigrinus (53% of the ejaculates) and L. pardalis (59% of the ejaculates) what occasioned and caused loss of spermatic resistance to face the stress of cryopreservation. The second experiment studied domestic cats and tested the difference between two techniques of semen collection - the electroejaculation and the acquisition from epididymides and vasa deferentia - faced to cryopreservation in TEG (7% glycerol) diluent. Electroejaculation was followed by orchiectomy and epididymal acquisition of semen... (Complete abstract, click electronic address below). / Doutor

Orientador: Frederico Ozanan Papa / Resumo: O presente trabalho teve os objetivos: avaliar laboratorialmente o sêmen congelado de asininos através do Hamilton Thorne (HTMA); determinar os indices de fertilidade do sêmen criopreservado em jumentas e éguas e verificar a resposta uterina das jumentas perante o sêmen "in-natura", diluente e congelado. No experimento 1 as amostras de sêmen, foram criopreservados em dois criotubos: meio macrotubo - 2,5 mL (M) ou palheta - 0,5 mL (P) com diluente MP50 e dez formulações de crioprotetores: 1= 2% DMSO e 2% DF; 2= 3% DF; 3= 2% MF e 2% de Glicerol; 4= 2% dimetil acetamida e 2% de glicerol; 5= 3% metil formamida; 6= 3% de dimetil acetamida; 7= 3% glicerol e 2% dimetil acetamida; 8= (Specific Patogen Free) 3% glicerol e 2% dimetil formamida; 9= 3% Dimetil sulfóxido e 2% glicerol; 10= 1% etilieno glicol + 3% dimetil sulfóxido e 1% dimetil formamida. As comparações realizadas entre os 2 tipos de envase, meio macrotubo e palhetas, não demonstraram superioridade (P>0,05) entre si, não havendo interação com as formulações utilizadas, nos parâmetros analisados. Para as características de motilidade total foi verificado que os tratamentos M4, P4 e P6 foram superiores ao M7 e P5 (P<0,05) a avaliação da motilidade progressiva mostrou qua a formulação M4 se distingüiu exclusivamente do M7 (P<0,05). O estudo da linearidade (LIN), apontou diferença exclusivamente entre os tratamentos M3 e M6 (P<0,05). Os valores obtidos de VCL (velocidade real), de VAP (velocidade do trajeto espermático) e de VSL (velocidade retílinea) proporcionaram resultados semelhantes entre os tratamentos (P>0,05). Na avaliação da membrana plasmática pela fluorescência, foi encontrado maior valor para o tratamento P6, que diferiu significativamente de P5 e M7, além disso o tratamento P4 se diferenciou de P5 (P<0,05)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: The current paper aimed at conducting laboratoty tests in order to evaluate the frozen semen of the asinines, determining the fertility rate of semen cryopreserved in female donkeys and mares and also verifying the uterine response of female donkeys to the "in natura", MP50 extender and frozen semen. In experiment 1, the semen samples were cryopreserved in two cryotubes: half macro tube 2.5 mL (M) or pallets - 0.5 mL (P) with MP50 diluting and ten formulations of cryoprotectors: 1= 2% DMSO and 2% DF; 2= 3% DF; 3= 2% MF and 2% of glycerol; 4= 2% dimethyl acetamide and 2% of glycerol; 5= 3% methyl formamide; 6= 3% of dimethyl acetamide; 7= 3% glycerol and 2% dimethyl acetamide; 8= (Specific Patogen Free) 3% glycerol and 2% dimethyl formamide; 9= 3% dimethyl sulfoxide and 2% glycerol; 10= 1% ethylene glycol + 3% dimethyl sulfoxide and 1% dimethyl formamide. The comparisons made between the two types of packing, did not show superiority (P>0.05) between themselves, and there was no interaction with the used formulations within the analyzed parameters. Regarding the characteristic total motility, it has been verified that the M4, P4 and P6 treatments were superior to the M7 and P5 (P<0,05). The evaluation of the progressive motility showed that the M4 formulation differed exclusively from the M7 (P<0,05). The linearity study demonstrated difference particularly between the M3 and M6 treatments (P<0,05). The values of real velocity, sperm direction velocity and linear velocity did not show similar results between the treatments (P>0,05). Concerning the evaluation of the plasma membrane by fluorescence, a higher value was found for the P6 treatment, which differed significantly from the P5 and M7. Moreover, the P4 treatment was different form the P5 (P<0,05). The other comparisons made... (Complete abstract, click electronic address below). / Mestre

Orientador: Frederico Ozanam Papa / Resumo: Com o intuito de verificar a ação do acetato de prednisolona e do plasma seminal sobre a resposta inflamatória uterina de éguas inseminadas com sêmen congelado, desenvolveu-se os seguintes procedimentos: inicialmente 36 éguas foram aleatoriamente divididas em 6 grupos experimentais: G1 grupo controle, éguas não inseminadas; G2 éguas inseminadas com 800 x 106 de espermatozóides "in natura"; G3 éguas inseminadas com sêmen congelado 800 x 106 de espermatozóides viáveis pré-congelação; G4 éguas inseminadas com sêmen congelado 800 x 106 de espermatozóides viáveis pré-congelação + adição de 20 mL de plasma seminal; G5 éguas inseminadas com sêmen congelado 800 x 106 de espermatozóides viáveis pré-congelação + corticóide-terapia; G6 éguas inseminadas com sêmen congelado 800 x 106 de espermatozóides viáveis pré-congelação + adição de 20 mL de plasma seminal + corticóide-terapia. A corticóide-terapia foi iniciada quando os animais apresentavam folículos de 35 mm e edema uterino, neste momento, se efetuava a administração da gonadotrofina coriônica humana (hCG) e concomitantemente 0,1 mg/kg de acetato de prednisolona por via intramuscular (Predef ), e repetia-se o corticóide a cada 12 horas até a ovulação. Os animais dos grupos tratados com corticóide G5 e G6, demonstraram um decréscimo significativo na função neutrofílica, frente ao teste da redução do tetrazólio nitroazul (NBT). O plasma seminal não alterou a intensidade da resposta inflamatória em nenhum dos testes realizados. No teste de fertilidade foram realizados dois grupos de inseminação, no primeiro, foram utilizadas éguas sem histórico de resposta inflamatória intensa pós-inseminação e não foi vista diferença estatística nos resultados de prenhes. Entretanto, no segundo teste de fertilidade, onde foram usadas éguas problemas, com... (Resumo completo clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: Aiming to verify the action of prednizolone acetate and of seminal plasma on the uterine inflammatory response of mares inseminated with frozen semen, the following procedures were developed. Thirty six mares were randomly allocated in 6 experimental groups: G1 control groups, with non-inseminated mares; G2 mares inseminated with 800 x 106 "in natura" sperm cells; G3 mares inseminated with 800 x 106 frozen-thawed sperm cells; G4 mares inseminated with 800 x 106 frozen-thawed sperm cells + 20 mL seminal plasma; G5 mares inseminated with 800 x 106 frozen-thawed sperm cells + cortico-therapy; G6 mares inseminated with 800 x 106 frozen-thawed sperm cells + 20 mL seminal plasma + cortico-therapy. The therapy with 0,1 mg/kg of prednizolone acetate (IM) (Predef ), was performed when the mares presented follicles with 35 mm and uterine edema. At this moment the ovulation was induced with human corionic gonadotrophin (hCG), and the corticoid administrations repeated every 12 hours until ovulation. In G5 and G6 when the animals were treated with corticoid, it was observed a significant decrease on the neutrophil function, analyzed by the tetrazolio nitroazul test (NBT). The infusion of seminal plasma did not modify the uterine inflammatory response in any of the performed tests. For the fertility test, two groups of inseminated mares were used. On the first one, mares with no history of intense uterine inflammatory response after insemination were used. No statistic differences were observed on pregnancy results. However, on the second group of fertility test when problem mares, with history of post-insemination endometritis, were used, the corticoid-treated group presented a significant high pregnancy rate when compared with the control group (67% and 0% respectively). The cortico-therapy showed to be a safe method with no side effects on treated animals, representing an adequate choice for animals... (Complete abstract, click electronic address below). / Doutor

Orientador: Frederico Ozanam Papa / Resumo: Com objetivo de correlacionar e associar a eficiência do teste de termoresistência (rápido e lento) de sêmen congelado na espécie bovina com a fertilidade a campo após a Inseminação Artificial foram utilizados 64 ejaculados de 39 touros da raça Nelore com idades entre 2 e 10 anos pertencentes a central de inseminação artificial Jacarezinho Genetics. Após as colheitas as amostras de sêmen foram avaliadas macro e microscopicamente quanto ao volume, aspecto, turbilhonamento, motilidade total, vigor, concentração e patologia espermática. Posteriormente os ejaculados foram congelados com diluente (TRIS) a uma altura de 3 cm do nitrogênio líquido (-140ºC) em um tanque de congelação durante 15 minutos. Para análise das partidas congeladas foram utilizados os parâmetros de motilidade total subjetiva, vigor, análise computadorizada do movimento espermático (HTMA - IVOS 10), análise de fluorescência para avaliar a integridade de membrana pós-descongelação, após as provas rápidas (46ºC/30') e lenta (38ºC/5h) de termoresistência. Os valores de motilidade total após as provas de termoresistência foram subdivididos em 4 grupos (0= 0% de motilidade, 1= 1-20% de motilidade, 2= 21-40% de motilidade e 3= > 40% de motilidade). O teste de fertilidade foi realizado através da inseminação artificial de 3161 fêmeas da raça Nelore, com idade entre 2 e 16 anos em uma mesma propriedade, sendo a fertilidade avaliada através do índice de prenhez a 1ª inseminação artificial. Para verificar a associação entre as ocorrências de interesse e a... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: With the aim of correlating the efficiency of the thermoresistance test (fast and slow) of the frozen sperm in the bovine species with the fertility 64 were used ejaculated of 39 bulls of the race Nelore with age between 2 and 10 years belonging to a Headquarter of Artificial Insemination. After the crops the sperm samples were appraised macro and microscopical as for the volume, aspect, turbine, total motility, energy, concentration and spermatic pathology.Later the ejaculated were frozen in diluent (TRIS) to a height of 3 cm of the liquid nitrogen (-140º C) in a freezing tank for 15 minutes. For analysis of the frozen departures the parameters of subjective total motility, energy, computerized analysis of the spermatic movement (HTMA - IVOS 10) were used. Fluorescence test was also used to evaluate the integrity of the membrane post-defrosting after the proofs fast (46°C/30') and slow (38°C/5h) of thermoresistance. The total motility values after the thermoresistance proofs they were subdivided into 4 categories denominated of adaptation (0=0% of motility, 1= 0- 20% of motility, 2= 20-40% of motility and 3= >40% of motility).The fertility test was accomplished through the artificial insemination of 3161 females of the race Nelore, with age between 2 and 16 years in a same property and the fertility was appraised through the pregnancy index after the first artificial insemination. In order to verify the association between the occurrences of interest and the fertility it was used the proof of Qui-square, with the calculation of statistics X2 and P. The statistics were considered significant when p<0,05 and in the cases which 0,05<p<0,10 the tendency was referred to significance, where p is the probability of erroneously concluding for the significance.The results showed that there were no significant differences among the categories of total... (Complete abstract, click electronic address below). / Mestre

Orientador : José Buratini Júnior / Resumo: Estudos recentes têm evidenciado o envolvimento de diferentes FGFs no controle do desenvolvimento folicular ovariano, entre eles o FGF-7. O FGF- 10 apresenta alta similaridade ao FGF-7, expresso em células da teca, e ambos atuam através do mesmo receptor FGFR-2b, expresso em células da granulosa. O FGF-10 modula a atividade celular em uma série de tecidos, mas ainda não foi investigado no ovário. O objetivo principal deste trabalho foi avaliar a participação do FGF-10 no controle do desenvolvimento folicular mediante investigação da expressão do seu RNAm em folículos ovarianos bovinos. A expressão do FGF-7 também foi investigada paralelamente. Além disso, a expressão gênica do FGF-10 e FGF-7 foi investigada numa variedade de tecidos bovinos fetais e adultos. "Pools" de folículos pré-antrais e oócitos, folículos inteiros com diâmetro entre 2 e 4mm, células da teca e da granulosa de folículos maiores que 5mm e amostras de tecidos tiveram seu RNA total extraído. Dos folículos maiores que 5mm, o fluído folicular foi coletado e as concentrações de estradiol e de progesterona foram determinadas por radioimunoensaio. Folículos com progesterona acima de 100ng/mL foram considerados atrésicos e excluídos da análise. Os folículos restantes foram agrupados de acordo com a concentração de estradiol (<5; 5-20; >20-100 e >100ng/mL) e de acordo com o diâmetro (5-7; 8-10 e >10mm). A expressão gênica do FGF-7 e do FGF-10 foi examinada por RT-PCR. Os efeitos da concentração intrafolicular de estradiol e do diâmetro foram investigados por RT-PCR semiquantitativo. A expressão do FGF-10 foi detectada em folículos pré-antrais primordiais, primários e secundários, oócitos e células da teca, mas não em células da granulosa. Adicionalmente, o RNAm do FGF-7 foi pela primeira vez detectado... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Recent studies have evidenced the involvement of different FGF on ovarian follicular development control, among them FGF-7. FGF-10 exhibits high similarity to FGF-7, which is expressed in theca cells, and both act through the same receptor FGFR-2b, expressed in granulosa cells. FGF-10 modulates cellular activities in several tissues, but it has not been investigated in ovary yet. The main objective of this work was to evaluate FGF-10 participation in controlling follicular development, through the investigation of its mRNA expression in bovine ovarian follicles. In parallel, FGF-7 gene expression was also investigated. Furthermore, FGF-10 and FGF-7 gene expression was assessed in a variety of bovine adult and fetal tissues. Pools of preantral follicles and oocytes, whole follicles at 2-4mm in diameter, granulosa and theca cells from follicles larger than 5mm and tissue samples were submitted to total RNA extraction. Follicular fluid from follicles larger than 5 mm was collected and estradiol and progesterone concentrations were measured by RIA. Follicles with progesterone levels above 100ng/mL were considered atretic and excluded from the analysis. Remaining follicles were grouped according to intrafollicular estradiol concentration (<5; 5-20; >20-100; and >100ng/mL) and according to diameter (5-7; 8-10 and >10mm). FGF-7 and FGF-10 gene expression was examined by RT-PCR. Effects of intrafollicular estradiol concentration and diameter were assessed by semiquantitative RT-PCR. FGF-10 gene expression was detected in primordial, primary and secondary preantral follicles, oocytes and theca cells, but not in granulosa cells. In addition, FGF-7 mRNA was detected for the first time in bovine preantral follicles and investigated in oocytes, where it was absent. FGF-10 expression in theca cells decreased as intrafollicular... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

A hibridação entre espécies ou populações pode propiciar uma excelente oportunidade de estudo das relações genéticas, ecológicas e demográficas entre táxons relacionados, e dos processos evolutivos envolvidos na manutenção da distinção entre estes. Neste estudo, procuramos avaliar diferentes aspectos biológicos envolvidos nos processos de hibridação entre três espécies de felídeos Neotropicais: Leopardus tigrinus, L. geoffroyi e L. colocolo. A investigação genética, realizada por meio da análise combinada de diferentes marcadores moleculares como DNA mitocondrial, locos de microssatélite e segmentos dos cromossomos Y e X nas três espécies, revelou dois padrões diferenciados de hibridação para L. tigrinus vs. L. colocolo no centro e nordeste brasileiro e para L. tigrinus vs. L. geoffroyi no sul do Brasil. A hibridação entre L. tigrinus e L. colocolo foi inferida como um processo antigo, estando atualmente ausente ou restrita à ocorrência de eventos esporádicos na região central brasileira. Por outro lado, a hibridação entre L. tigrinus e L. geoffroyi no sul do país aparece praticamente restrita ao estado do Rio Grande do Sul como uma das mais intensas zonas atuais de hibridação já documentada em carnívoros, com cerca de 60% da população local considerada como de origem híbrida. Uma ampla variedade de tipos recombinantes foi identificada para este último par de espécies, indicando à produção de híbridos férteis aparentemente capazes de cruzar entre si e com ambas as espécies parentais, levando, assim, à homogeneização genética das populações locais das duas espécies. Esta zona híbrida pareceu ainda apresentar uma assimetria na direção de L. geoffroyi, podendo indicar a existência de pressões seletivas que favoreçam o retrocruzamento com esta espécie. Análises morfológicas e ecológicas foram também realizadas em L. tigrinus e L. geoffroyi no estado do Rio Grande do Sul com o objetivo de caracterizar estas espécies em suas áreas de contato. Apesar da intensidade da hibridação, as duas espécies aparentemente mantêm uma diferenciação morfológica no que diz respeito ao tamanho corporal. No entanto, variações nos padrões de pelagem parecem estar associadas, em parte, a origens híbridas. Da mesma maneira, análises de distribuição, associação com habitats e nicho trófico no estado sugerem a existência de uma segregação ecológica entre estes dois felídeos nesta região. / Hybridization between species and populations may provide an excellent opportunity to study genetic, demographic and ecological relationships between closely related taxa, and the evolutionary processes involved in the maintenance of the species distinctness. At the present study, we aim to evaluate the different biological aspects involved on the hybridization processes between three Neotropical felids: Leopardus tigrinus, L. geoffroyi and L. colocolo. Genetic surveys, performed with a combined analysis of different molecular markers such as mitochondrial DNA, microsatellite loci and Y and X chromosomes segments on the three felid species, revealed two different patterns of hybridization between L. tigrinus and L. colocolo at central and northeastern Brazil and between L. tigrinus and L. geoffroyi at southern Brazil. The hybridization between L. tigrinus and L. colocolo was inferred as an ancient event, being, currently, absent or restricted to esporadic events in the central Brazilian region. On the other hand, hybridization between L. tigrinus and L. geoffroyi in southern Brazil seemed to be nearly restricted to Rio Grande do Sul state as one of the most intensive hybridization events documented in carnivores, in which approximately 60% of the local population carry a hybrid origin. A wide variety of recombinant types was identified for this pair of species indicating the production of fertile hybrids apparently able to cross with each other and also with both parental species, leading to the genetic homogenization of the local populations of the two species. This hybrid zone seemed to be also assimetric in L. geoffroyi direction, suggesting the existence of selective pressure that favours backcrossings with this species. Morphological and ecological analyzes was also performed at L. tigrinus and L. geoffroyi from Rio Grande do Sul state aiming to characterize both species in their contact zones. Despite the extensive hybridization, both species apparently keep the morphological differentiation related to body size. However, variations on the patterns of pelage seem to be associated in part to a hybrid origin. The same way, analyses of geographic distributions, habitat association and trophic niche in the state suggest the existence of an ecological segregation between these two felids in this region.

Resumo: O presente trabalho envolveu três experimentos: Influência da imunização passiva contra estradiol (E2) e a aspiração do maior folículo (F1) no momento do desvio folicular esperado, sobre a ocorrência do desvio folicular observado. Também foi objetivo verificar o efeito desses tratamentos sobre o perfil de hormônio folículo estimulante (FSH), hormônio luteinizante (LH) e inibina total circulante. Para tanto, os animais foram imunizados com dose única de soro anti-E2 (G anti-E2) ou o F1 foi aspirado no momento do desvio esperado (GAF1). O plasma sangüíneo foi obtido no período pré e póstratamento. O intervalo entre o dia da aplicação do soro (desvio esperado) e o dia da detecção do desvio foi em média o mesmo para o G anti-E2 e controle. No GAF1, a eliminação do maior folículo provocou atraso no momento da detecção do desvio folicular entre o segundo (F2) e o terceiro (F3) maior folículo, comparado ao controle. Em ambos os tratamentos o perfil de FSH, LH e inibina total foi similar ao controle. O experimento 2 tratou de um projeto piloto visando dominar a técnica de colheita de fluido dos grandes folículos ovarianos por meio de punção com agulha fina e o efeito desse procedimento sobre o folículo e às concentrações hormonais. Foram utilizados dois grupos de animais, G1 o folículo foi mantido intacto (controle) e G2 foi utilizada uma punção folicular quando o maior folículo atingiu diâmetro ~35 mm. Ultrasonografia ovariana foi realizada desde o ínicio da detecção de um folículo ~25mm, seguindo até a detecção da ovulação. O terceiro experimento objetivou verificar a influência de gonadotrofina coriônica humana (hCG) em folículos de 30 ou 35mm sobre as concentrações de hormônios esteróides e fatores intrafoliculares. A colheita do fluido folicular foi realizada imediatamente antes e 30 horas após a aplicação... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The present study involved three experiments: The influence of passive immunization against estradiol (E2) and the largest follicle aspiration (F1) during the expected time of follicle deviation (F1~20mm) on observed follicle deviation occurrence. In addition, the study aimed to verify the related treatment effect on FSH, LH and total inhibin patterns in plasma. Therefore, the animais were immunized with a single dose of serum anti-E2 (G-anti E2) or the F1 was ablated at the expected time of deviation (GAF1). The blood samples were obtained at the pre and post treatment period. The interval between the day of anti-serum administration (expected time of deviation) and the day of deviation detection was similar for G-anti E2 and control groups. The GAF1 presented a delay on time detection of follicle deviation between the second (F2) and the third (F3) largest follicle upon elimination of the largest follicle when compared to control group. In both treatments, patterns of FSH, LH, and total inhibin were similar to control. The experiment 2 was a pilot project viewing training the technique to obtain follicular fluid from large ovarian follicles by puncture using a 25G needle, in addition to determine the effect of this procedure on follicle and hormonal concentrations. Two groups were used, G1 with the maintenance of intact follicle (control) and G2 with a follicle puncture when the largest follicle reached ~35mm in diameter. Ovarian ultrasonography was performed since the detection of a follicle 25mm and it remained until the detection of ovulation. The third experiment aimed to verify the influence of human chorionic gonadotrophin (hCG) on follicles measuring 30 or 35 mm, determining steroid hormone concentrations and intrafoJlicular factors. The follicular fluid collection was performed immediately before and 30 hours after hCG administration... (Complete abstract, click electronic access below)