Thesis (Ph. D.)--Illinois State University, 1970. / Title from title page screen, viewed Sept. 2, 2004. Dissertation Committee: Herman Brockman, David Pittman (co-chairs), John Frehn, Edwin Willis, David Weber. Includes bibliographical references (leaves 75-82) and abstract. Also available in print.

Cell cycle control genes in the yeasts Saccharomyces cerevisiae and Schizosaccharomyces pombe have been studied in detail in the past few years. The cdc25+ and wee1+ genes of S. pombe play key roles in the commitment to division. Genes homologous to the mitotic inducer cdc25+ and the mitotic inhibitor wee1+ of Schizosaccharomyces pombe were searched for in Saccharomyces cerevisiae using DNA cross-hybridization as the method of detection. Such homologs were not found in Saccharomyces cerevisiae by this method. Attention was therefore turned towards sequencing and partially characterizing a previously cloned gene, WHI1+, and its mutant form WHI1-1 (now call CLN3+ and CLN3-1 respectively). Sequence analysis showed that CLN3+ is a cyclin homolog. Cyclins are probably present in all eukaryotes and play an important role in controlling the onset of mitosis. However, unlike these mitotic cyclins, CLN3+ functions in G1. CLN3-1 cells enter a new round of the cell cycle at an aberrantly small cell size and are α-factor resistant. Sequence analysis showed that the CLN3-1 protein was a truncated form of CLN3+ caused by a nonsense mutation in the CLN3+ gene. Cells overexpressing CLN3+ had the same phenotype as CLN3-1 cells, suggesting that the truncated CLN3-l protein was a hyperactive form ofthe wild-type protein. CLN3+ and CLN3-1 were placed downstream of the yeast GAL1 promoter in a shuttle plasmid. Cells transformed with these plasmids and grown in the presence of galactose and the absence of glucose produced CLN3+ or CLN3-1 in large amounts. Cell size was reduced in such cells. These cells were also α-factor resistant. / Thesis / Master of Science (MSc)

Trans-dominante Mutationen im GPR1-Gen der Hefe Yarrowia lipolytica führen zur Sensitivität der Hefezellen gegenüber Essigsäure. Die Deletion dieses Genes hat dem gegenüber keinen Effekt auf den Phänotyp. In dieser Arbeit wurde das Gpr1-Protein aus Y. lipolytica und dessen Orthologe Ycr010cp, Ydr384cp und Ynr002cp von S. cerevisiae weiter charakterisiert. S. cerevisiae-Transformanden, welche die Mutantenallele GPR1-1 bzw. GPR1-2 exprimierten, zeigten bei gleichzeitiger Anwesenheit von Glucose eine erhöhte Sensitivität gegenüber Essigsäure. Mittels Ort-spezifischer und zufälliger Mutagenese konnten funktionell wichtige Bereiche in den Proteinen Ycr010cp und Ynr002cp identifiziert werden. Die GPR1-Orthologen in S. cerevisiae werden durch verschiedene C-Quellen und voneinander unabhängig reguliert. Die Expression von YCR010c und YDR384c wird weiterhin durch allgemeinen Stress induziert. Die Deletion von zwei oder allen drei Homologen hatte eine Verringerung der Ammoniumproduktion zur Folge. Aufgrund der geringen Ähnlichkeit der Gpr1p-Orthologen zu Ammoniumtransportern wird davon ausgegangen, daß sie selber keine Ammoniumtransporter darstellen. Es wird angenommen, dass die Gpr1p-orthologen Proteine eine regulatorische Funktion haben bzw. Bestandteil einer bisher nicht bekannten Signaltransduktionskette sind.

Trans-dominante Mutationen im GPR1-Gen der Hefe Yarrowia lipolytica führen zur Sensitivität der Hefezellen gegenüber Essigsäure. Die Deletion dieses Genes hat dem gegenüber keinen Effekt auf den Phänotyp. In dieser Arbeit wurde das Gpr1-Protein aus Y. lipolytica und dessen Orthologe Ycr010cp, Ydr384cp und Ynr002cp von S. cerevisiae weiter charakterisiert. S. cerevisiae-Transformanden, welche die Mutantenallele GPR1-1 bzw. GPR1-2 exprimierten, zeigten bei gleichzeitiger Anwesenheit von Glucose eine erhöhte Sensitivität gegenüber Essigsäure. Mittels Ort-spezifischer und zufälliger Mutagenese konnten funktionell wichtige Bereiche in den Proteinen Ycr010cp und Ynr002cp identifiziert werden. Die GPR1-Orthologen in S. cerevisiae werden durch verschiedene C-Quellen und voneinander unabhängig reguliert. Die Expression von YCR010c und YDR384c wird weiterhin durch allgemeinen Stress induziert. Die Deletion von zwei oder allen drei Homologen hatte eine Verringerung der Ammoniumproduktion zur Folge. Aufgrund der geringen Ähnlichkeit der Gpr1p-Orthologen zu Ammoniumtransportern wird davon ausgegangen, daß sie selber keine Ammoniumtransporter darstellen. Es wird angenommen, dass die Gpr1p-orthologen Proteine eine regulatorische Funktion haben bzw. Bestandteil einer bisher nicht bekannten Signaltransduktionskette sind.