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Avaliação como probióticos para frangos de corte de Pichia pastoris e Pichia pastoris recombinante contendo o gene da fosfolipase C de Clostridium perfringens / Evaluation of the probiotic properties in broilers of Pichia pastoris and a recombinant Pichia pastoris containing the Clostridium perfringens fosfolipase C gene

STORCH, Otávio Brod 17 November 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2014-08-20T14:37:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_otavio_brod.pdf: 418993 bytes, checksum: 32f13d3584050e87ad3df6842a8e5496 (MD5) Previous issue date: 2008-11-17 / Antibiotics used for the last decades as growth promoters for animals, were banned in several countries because of the risk of inducing the appearance of antibiotic resistant bacteria. Probiotics, live microorganisms that benefit health promoting the stability of the gut microbiota, are their most promising substitutes. The objective of this research was to determine the probiotic properties of Pichia pastoris and a recombinant P. pastoris containing the Clostridium perfringens fosfolipase C gene. Ross® P8 female chicks were randomly distributed in four groups of ten each, in three repeats, and fed with a commercial food devoid of antibacterials. Group 1 was fed with un-supplemented food; group 2 was supplemented with 1x106 viable P. pastoris strain KM71H gr-1; group 3 with 1x106 viable recombinant P. pastoris containing the C. perfringens fosfolipase C gene gr-1 and group 4 with 1x106 viable spores of Bacillus cereus var. Toyoi gr-1. Water and food were supplied ad libitum. Weight gain of each animal and food conversion of each group at 49 days of age, were estimated. Individual seroconversions against C. perfringens &#945; toxin at days 1, 10, 20, 30 and 49 were estimated. At the end of the experiment the animals were slaughtered and samples from different organs examined histologically. Mean live weights at 49 days of age were 2.172, 2.228, 2.410 and 2.333 Kg for groups 1, 2, 3 and 4, respectively, different at P<0.05. Mean food conversions were 2.58, 2.41, 2.35 and 2.50 for groups 1, 2, 3 and 4, respectively. Seroconversions at 49 days of age were 1.1, 1.4, 1.5 and 1.3 for groups 1, 2, 3 and 4, respectively, different at P<0.05. Histological alterations were not detected. It was concluded that P. pastoris and recombinant P. pastoris may be used as probiotics for broilers due to their capacity of increasing food efficiency and seroconversion without undesirable effects. / Os antibióticos utilizados como promotores de crescimento nas últimas décadas foram banidos em vários países devido ao risco de induzir o surgimento de bactérias resistentes. Entre as alternativas para sua substituição, os probióticos, suplementos alimentares compostos de microrganismos vivos que beneficiam a saúde do hospedeiro através do equilíbrio da microbiota intestinal, aparecem como a mais plausível. Este trabalho objetivou determinar as propriedades como probiótico da levedura Pichia pastoris e sua variante recombinante contendo o gene da fosfolipase C de Clostridium perfringens. Frangas de um dia de idade da linhagem Ross® P8 foram distribuídas aleatoriamente em quatro grupos de dez animais cada, em três repetições, e alimentadas com ração comercial isenta de antibacterianos. O grupo 1 (Controle) recebeu ração não suplementada, o grupo 2 recebeu a mesma ração suplementada com 1x106 células viáveis gr-1 de P. pastoris cepa KM71H, o grupo 3 ração suplementada com 1x106 gr-1 de células viáveis de P. pastoris recombinante contendo o gene da toxina &#945; de C. perfringens, e o grupo 4 ração suplementada com 1x106 gr-1 de esporos viáveis de Bacillus cereus var. Toyoi. Ração e água foram oferecidos ad libitum. Estimou-se o ganho de peso de cada animal aos 49 dias de idade, e a conversão alimentar de cada grupo. Determinou-se a soroconversão individual por ELISA, utilizando como antígeno a toxina &#945; padrão de C. perfringens, a partir de amostras de sangue coletadas aos 1, 10, 20, 30 e 49 dias de idade. Ao término do experimento os animais foram abatidos e amostras de órgãos submetidos a análise histopatológica. No dia 49, os pesos vivos médios foram 2,172, 2,228, 2,410 e 2,333 kg, significativamente diferentes (P<0,05) ao grupo controle, para os grupos 1, 2, 3 e 4, respectivamente. As conversões alimentares médias foram 2,58, 2,41, 2,35 e 2,5 para os grupos 1, 2, 3 e 4, respectivamente. As soroconversões ao dia 49 foram 1,1, 1,4, 1,5 e 1,3 para os grupos 1, 2, 3 e 4, respectivamente, significativamente diferentes (P<0,05) ao grupo controle. Nos estudos histopatológicos não foram encontradas alterações. Concluiu-se que P. pastoris e P. pastoris recombinante podem ser utilizadas como probiótico em frangos de corte por aumentar a eficiência alimentar e a soroconversão, sem apresentar contraindicações.

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