Thesis (Ph. D.)--University of Manitoba, 1995. / eContent provider-neutral record in process. Description based on print version record. Includes bibliographical references.

Thesis (Ph. D.)--University of Manitoba, 1997. / eContent provider-neutral record in process. Description based on print version record. Includes bibliographical references.

Thesis (Ph. D.)--University of Rochester, 1999. / eContent provider-neutral record in process. Description based on print version record. Includes bibliographical references.

Thesis (Ph. D.)--University of Manitoba, 1997. / Includes bibliographical references.

Orientador: Marines Nobre dos Santos Uchoa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-15T10:37:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Monteiro-Oliveira_MarcelaPinto_M.pdf: 904499 bytes, checksum: 29ad85bc2d3181a740228954039bca7e (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Durante o processo conhecido como terapia fotodinâmica, a aplicação de fotossensibilizadores associados a uma fonte de luz de comprimento de onda complementar, gera produtos que podem danificar componentes essenciais das células, e causar a morte celular. Dentro desse contexto, a aplicação dessa terapia sobre microrganismos presentes em lesões de cárie é de grande valia, uma vez que poderá reduzir a quantidade de tecido dental a ser removido no tratamento da cárie, diminuir as chances de progressão da doença bem como os riscos de acometimento pulpar do elemento dentário. Assim, o objetivo deste estudo in vitro foi determinar parâmetros para o uso de um diodo emissor de luz (LED) associado ao corante azul de orto toluidina (TBO) na redução da contagem de Streptococcus mutans presentes em lesões de cárie dentinária. Para isto, 72 espécimes de dentina coronária de dentes bovinos foram imersos em cultura contendo Streptococcus mutans para produzir lesões de cárie. Tais espécimes foram divididos aleatoriamente em 6 grupos (n=12): Controle (exposição a NaCl a 0,9% por 5 min); TBO (exposição ao TBO a 0,01% por 5 min); LEDA (exposição ao LED por 4,2 min); LEDB (exposição ao LED por 6,5 min); PDTA (exposição ao corante associado ao LED por 4,2 min) e PDTB (exposição ao corante associado ao LED por 6,5 min). As densidades de energia utilizadas para os tempos de 4,2 e 6,5 min, foram de 166 e 249 J/cm2, respectivamente. Antes e após os tratamentos, amostras de tecido dentinário cariado foram coletadas e analisadas microbiologicamente, por meio da contagem das unidades formadoras de colônia (UFC) de S. mutans. A profundidade das lesões de cárie produzidas pelo modelo microbiológico utilizado foi determinada por meio da microscopia de luz polarizada. Foram utilizados os testes ANOVA/Tukey para comparar os valores de log redução dos grupos (a=5%). Observou-se redução significativa de S. mutans nos grupos em que aplicou-se TBO associado ao LED, com as duas densidades de energia utilizadas. Entretanto, nenhuma diferença significativa foi encontrada para os diferentes tempos de irradiação. Concluiu-se que os parâmetros utilizados no presente estudo, para o emprego do LED associado ao TBO, foram efetivos em reduzir a contagem de S. mutans presentes em lesões de cárie dentinária. / Abstract: Photodynamic therapy (PDT) is a technique that consists in the activation of certain photosensitizers by light in the presence of tissue oxygen, resulting in the production of reactive radicals capable of inducing cell death. In this context, this therapy may become a suitable approach to disinfect the dentin tissue during the caries treatment, and reduce the tissue removal, minimizing the probability of caries progression and pulp involvement. This randomized in vitro study determined parameters for using a light-emitting diode (LED) with toluidine blue O (TBO) for reduction of Streptococcus mutans counts inside dentin caries. Seventy two bovine coronary dentin slabs were immersed in Streptococcus mutans culture for demineralization production. Dentin slabs were allocated to 6 groups (n=12) as follows: Control (treated with 0.9% NaCl solution for 5 min); TBO (treated with 0.1 mg/ml TBO for 5 min); LEDA (submitted to irradiation for 4.2 min); LEDB (submitted to irradiation for 6.5 min); PDTA (treated with TBO plus irradiation for 4.2 min) and PDTB (treated with TBO plus irradiation for 6.5 min). The energy densities used for 4.2 and 6.5 min correspond at 166 and 249 J/cm2, respectively. Before and after treatments, dentin samples were analyzed with regard to S. mutans counts. The caries lesion depth produced by the microbiological model was analyzed by polarized light microscopy. ANOVA/Tukey tests were utilized to compare log reductions among groups (a=5%). Bacterial reduction was observed when dentin was exposed to both TBO and LED at both irradiation times. However, no difference in S. mutans reduction was found between the two energy densities. Concluding, although the use of LED combined with TBO was effective in reducing the Streptococcus mutans counts in carious dentin, this effect may not have clinical significance. / Mestrado / Odontopediatria / Mestre em Odontologia

Orientador: Renata de Oliveira Mattos-Graner / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-27T04:12:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vizoto_NataliaLeal_D.pdf: 2014309 bytes, checksum: c9893c670e96978a4923d0db115c76f9 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: Streptococcus mutans é uma espécie bacteriana comum da microbiota bucal de seres humanos envolvida na patogênese da cárie dentária e em endocardites infecciosas promovidas por bacteremias de origem bucal. Para ser transmitido e ocupar seus nichos ecológicos, S. mutans precisa persistir na saliva e se adaptar fisiologicamente a cada fase da colonização, um processo que provavelmente envolve diversas alterações do seu transcriptoma. Para isto, S. mutans utiliza sistemas reguladores de transcrição de dois componentes (SDC). O SDC SptRS foi identificado através de análises in silico do genoma da cepa S. mutans UA159, como ortólogo do sistema SptSR (Spt de Saliva persistence) de Streptococcus pyogenes. O objetivo deste trabalho foi investigar a participação do sistema SptRS de S. mutans em fenótipos importantes para a colonização bucal. Para isto, mutantes knockout dos genes sptR e sptS, SMU.927 e SMU.928 respectivamente, foram construídos a partir da cepa UA159 (UAsptR- e UAsptS-) e comparados com a cepa parental em análises de morfologia, crescimento planctônico sob diferentes condições nutricionais, persistência em saliva humana, formação de biofilme e autólise a 44oC. Além disto, genes do regulon de SptRS foram pesquisados através de ensaios da Imunoprecipitacão de Cromatina seguido de sequenciamento (ChIP-seq), RT-PCR quantitativo (RT-PCRq) e de Ensaios de Retardamento da Mobilidade Eletroforética (EMSA) com proteína recombinante SptRr de S. mutans. Os mutantes sptR e sptS mostraram crescimento planctônico lento em meios de cultura RPMI e em MQD comparados à cepa parental, além de atividade autolítica reduzida em 22,4 e 53,13%, respectivamente. Não foram observadas, entretanto, alterações significativas na morfogênese, formação de biofilmes in vitro, nem na persistência em saliva humana. Os dados de ChIP-seq e RT-qPCR indicaram que SptRS regula genes envolvidos na resposta de estringência (SMU.926), repressão catabólica (ccpA), metabolismo de múltiplos açúcares (SMU.78, SMU.137, SMU.542, SMU.1734), sistemas fosfoenolpiruvato-fosfotransferase (PTS) (SMU.2047, SMU.114, SMU.115) sistemas de transporte do tipo ABC (SMU.182, SMU.880, SMU.905, SMU.1035, SMU.1095, SMU.1178c, SMU.1939) e biogênese de parede celular (SMU.1091, SMU.2147, SMU.609, SMU.1434c, SMU.22). SptR funcionou como um regulador negativo em 86% (37/43) dos genes testados. Análises de RT-qPCR e EMSA indicaram ainda que SptR regula diretamente o regulador de transcrição CovR (SMU.1924), envolvido na repressão de genes de virulência e formação de biofilmes. Este estudo fornece evidências de que SptRS regula diversas funções de S. mutans importantes para a sobrevivência em condições nutricionalmente escassos, aparentemente coordenando o metabolismo com o crescimento bacteriano e com a expressão de genes de virulência / Abstract: Streptococcus mutans is a common bacterial species of the bucal microbiota of humans involved in the pathogenesis of dental caries and infectious endocarditis promoted by bacteremia of bucal origin. To be transmitted and occupy their ecological niches, S. mutans need to persist in saliva and adapt physiologically to each phase of colonization, a process that probably involves several changes in its transcriptome. To this end, S. mutans uses transcriptional regulatory systems called Two Component System (TCS). The TCS SptRS was identified in an in silico analysis of the genome of S. mutans strain UA159, as an orthologue of the SptRS system (Spt of Saliva persistence) of Streptococcus pyogenes. The aim of this study was to investigate the role of the TCS SptRS in functional traits important for S. mutans to colonize its bucal niches. Thus, knockout mutants of sptR and sptS (SMU.927 and SMU.928, respectively) were obtained in strain UA159 (UAsptR-, UAsptS-) and compared to parental strain regarding morphology, planktonic growth under different nutritional conditions and persistence in human saliva, biofilm formation and autolysis at 44oC. In addition, genes of SptRS regulon were analised by Chromatin Immunoprecipitation followed the sequencing (ChIP-seq), quantitative RT-PCR (RT- qPCR) and Electrophoretic Mobility Shift Assays (EMSA) with S. mutans SptR recombinant protein. Inactivation of sptR/S promotes slow planktonic growth in RPMI and CDM, culture media 22.4 to 53.13% reductions in autolysis respectively, but does not significantly affect morphogenesis. However, mutants do not show significant alterations in biofilm formation or in persistence in human saliva. ChIP-seq and RT-qPCR analyses showed that SptRS regulates genes for stringent response (SMU.926), metabolism of multiple sugars (SMU.78, SMU.137, SMU.542, SMU.1734), catabolite repression (SMU.1591, ccpA), phosphoenolpyruvate phosphotransferase systems (PTS), ABC transport systems (SMU.182, SMU.880, SMU.905, SMU.1035, SMU.1095, SMU.1178c, SMU.1939) and cell wall biogenesis (SMU.22, SMU.609, SMU.1091, SMU.1434c, SMU.2147) SptR worked as a negative regulator of 86% (37/43) of the tested genes. RT-qPCR and EMSA analyses further showed that SptR directly represses expression of the transcriptional regulator CovR (SMU.1924), which is a repressor of genes involved in biofilm formation and virulence. This study provides evidence that SptRS regulates several functions important for S. mutans survival under poor nutritional conditions, apparently coordinating metabolism with bacterial growth and expression of virulence genes / Doutorado / Microbiologia e Imunologia / Doutora em Biologia Buco-Dental

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción: La cavidad oral es un ecosistema mixto, formado por diversas especies microbianas, en donde las bacterias cumplen un rol fundamental en el equilibrio salud- enfermedad. Se ha descrito a la caries dental como una de las patologías orales más prevalentes a nivel mundial y se ha observado que especies pertenecientes al género Streptococcus, específicamente al grupo viridans, están fuertemente relacionadas con su desarrollo. S. mutans ha sido una de las especies más asociadas a su inicio y progresión. Sin embargo, esta enfermedad puede ocurrir en ausencia de él y, otras especies pertenecientes a este género, podrían tener una inesperada relevancia en la enfermedad. Objetivo: Determinar la prevalencia y diversidad de especies bacterianas pertenecientes al género Streptococcus en saliva de niños pre-escolares chilenos con y sin caries. Metodología: Muestras de saliva total no estimulada fueron colectadas de la cavidad oral de niños pre-escolares chilenos, entre 2 y 5 años de edad, que presentan caries (10 individuos) o libres de caries (10 individuos), según índice ICDAS II. Se determinó la capacidad tamponante y pH salival, recuento, aislamiento e identificación bacteriana pertenecientes al género Streptococcus. La identificación se realizó mediante test bioquímicos, Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) y secuenciación de ADN, según corresponda. Resultados: Se observaron diferencias en relación a las especies identificadas en las muestras de sujetos con y sin caries. De los aislados obtenidos de sujetos sin caries, las especies más prevalentes fueron S. salivarius (40%), S. mutans (20%) y S. thermophilus (13,3%) y las especies aisladas en baja proporción correspondieron a S. vestibularis y S. sanguinis (3,3% cada una). De los aislados obtenidos de sujetos con caries, la especie más prevalente correspondió a S. salivarius (73,3%) y las especies encontradas en menor proporción correspondieron a Bacillus subtilis subsp. subtilis (16,7%), S. anginosus y S. mitis (3,3% cada una). Los análisis estadísticos para asociar las variables edad, pH, capacidad tamponante y recuento bacteriano, en relación a prevalencia de caries, resultaron ser no significativos. 2 Conclusiones: Las especies del género Streptococcus y otras especies identificadas, tanto para sujetos con y sin caries, fueron diferentes en cuanto a diversidad. Sin embargo, especies que han sido identificadas como autores principales tanto del desarrollo de caries como de su ausencia, fueron encontradas en baja proporción o no fueron encontradas en este grupo etario. S. salivarius resultó ser la especie aislada con mayor frecuencia en ambos grupos y, parámetros como edad, pH, capacidad tamponante en relación con prevalencia de caries, no fueron significativos. Esto podría revelar que las propiedades cariogénicas y de virulencia de cada especie estarían en íntima relación con las condiciones ambientales y las asociaciones bacterianas que ellas realicen dentro del Biofilm, que una misma especie podría actuar tanto a favor o en contra del hospedero y que un mayor tamaño muestral sería necesario para obtener resultados más concluyentes.

Orientador: Luís Geraldo Vaz / Co-orientador: Laiza Maria Grassi Fais / Banca: Valfrido Antonio Pereira Filho / Banca: Valentim Adelino Ricardo Barão / Resumo: Este estudo comparou as propriedades de superfície e a adesão Streptococcus mutans na liga Ti-35Nb-7Zr-5Ta e no titânio comercialmente puro (Ti cp) antes e após a anodização. Foram utilizados discos (Ø8mmx2mm; N = 40) divididos em 2 grupos: T (Ti cp), TNZT (Ti-35Nb- 7Zr-5Ta), e subdivididos conforme a realização (A+) ou não (A-, controle) da anodização eletroquímica (300 V, 1 min) em β-glicerofostato de sódio + acetato de cálcio. As propriedades avaliadas foram: topografia de superfície e identificação qualitativa dos elementos químicos (microscópio eletrônico de varredura-MEV/EDS), energia livre de superfície (ELS, mensurada em goniômetro) e rugosidade média (Ra, determinada em rugosímetro). Para avaliação da adesão bacteriana, os discos foram contaminados com Streptococcus mutans (NTCC 25175) para determinação de UFC/mL e do padrão de adesão (MEV). Os valores de Ra e ELS de cada grupo foram comparados (A- vs. A+) por meio do teste Kruskal-Wallis associado ao teste de Dun (α = 0,05). Os valores de Ra (μm) e ELS (mN/m), respectivamente, foram: A-- T=0,97/44,24; TNZT=0,17/36,68; A+ - T=1,21/56,88; TNZT=0,53/53,64, com aumento significante de ambas propriedades (p < 0,05) após a anodização. A análise em MEV/EDS indicou a formação de uma camada multiporosa, com deposição de íons Ca e P nos subgrupos A+. Após a anodização houve aumento na adesão do patógeno apenas na liga TNZT. Conclui-se que a anodização do Ti cp e da liga TNZT alteram as propriedades de superfície com potencial para melhorias na osseointegração, contudo há aumento na adesão de S. mutans na liga TNZT. / Abstract: The aim of this study was to compare the surface properties and the adhesion of Streptococcus mutans on Ti-35Nb-7Zr-5Ta and commercially pure titanium (cp Ti) before and after the anodization. Discs (Ø8mmx2mm, N=40) were divided into 2 groups: T (cp Ti), TNZT (Ti-35Nb-7Zr- 5Ta), and subdivided in untreated (A- , control) or anodic treated (A+) in β- glicerofostato + calcium acetate (300 V, 1min). The evaluated surface properties were: surface topography and qualitative identification of chemical elements (in scanning electron microscope -SEM/EDS), surface free energy (SFE, measured with a goniometer), and the average roughness (Radetermined in profimoleter). The discs were contaminated with Streptococcus mutans (NTCC 25175) for determination of CFU/mL; the surfaces with adhered viable cell were also analyzed with SEM. The values of Ra and ELS were compared (A- vs . A+) by means of Kruskal-Wallis associated Dun test (α= 0.05). The median Ra (μm) and ELS (mN/m), respectively, were: A- T=0.97/44.24; TNZT=0.17/36.68; A+ T=1.21/56.88; TNZT=0.53/ 53.64. All groups showed significantly higher values of Ra and ELS (p < 0.05) after anodizing. The analysis in SEM/EDS indicated the formation of a multiporous layer with deposition of Ca and P ions. Only anodic treated TNZT exhibited an increase in adhesion of S. mutans. It was concluded that the anodic tretament of Ti cp and TNZT change the surface properties with potential improvements for osseointegration, despite the increase in the adhesion of S. mutans on TNZT. / Mestre

Orientadores: Pedro Luiz Rosalen, Marta Cristina Teixeira Duarte / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-20T05:30:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Galvao_LiviaCamaradeCarvalho_M.pdf: 2503098 bytes, checksum: 760c43af0e7b213e1e3e3c97f4e922d7 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: O objetivo desse trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana, in vitro, de óleos essenciais e frações dos óleos de melhor atividade, contra microrganismos do grupo mutans em estado planctônico. Além disso, os biofilmes de Streptococcus mutans foram submetidos às frações ativas e os óleos de melhor atividade e frações ativas foram avaliados quanto à sua citotoxicidade e caracterizados quimicamente. Para isso, vinte óleos essenciais (OE) foram obtidos por hidrodestilação a partir de plantas pertencentes ao banco de germoplasmas da Coleção de Plantas Medicinais e Aromáticas (CPMA/CPQBA/UNICAMP). Estes OE foram avaliados quanto à sua atividade antimicrobiana por meio dos ensaios: concentrações inibitória (CIM) e bactericida mínima (CBM) contra Streptococcus mutans UA159. Controles positivo (clorexidina 0,12 %) e negativo (propilenoglicol 6,12 % e 25 %) também foram testados...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The aim of this study was to evaluate the in vitro antimicrobial activity of essential oils (EO) and fractions from highest activity EO against planktonic cells of mutans streptococci. Besides, the biofilms formed by this microorganism were submitted to active fractions and the higher activity EO and active fractions were evaluated regarding their citotoxicity and chemically characterized. For this, twenty essentinal oils were obtained from plants of the "Collectio of Medicinal and Aromatic Plants" (CPMA, CPQBA/UNICAMP), germplasm bank by hydrodistillation. These EO were evaluated by antimicrobial assays: minimum inhibitory (MIC) and bactericidal (MBC) concentrations against Streptococcus mutans UA159. Positive (chlorhexidine 0.12%) and negative (propylene glycol 6.12 % and 25%) controls were also tested...Note: The complete abstract is available with the full electronic document / Mestrado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Mestre em Odontologia

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / La caries es una de las enfermedades infecciosas más prevalentes en el ser humano. En Chile esta patología afecta cerca del 90% de la población. Esta, es una manifestación clínica de una infección bacteriana crónica transmisible, y se caracteriza por producir un proceso destructivo e irreversible de los tejidos inorgánicos y orgánicos del diente, la caries puede conducir a la pérdida de la pieza dentaria. Los streptococci mutans son los microorganismos más fuertemente asociados con esta enfermedad, principalmente Streptococcus mutans y Streptococcus sobrinus. Los principales factores de virulencia asociados a la cariogenicidad de estas bacterias incluyen adhesión, acidogenia y aciduria. Se han analizado diferentes poblaciones de Streptococcus mutans, pudiendo identificar en cada una de ellas una amplia variabilidad genética. Por otra parte, la identificación de diferentes cepas se ha correlacionado con sus diferencias en potencial de virulencia. El presente estudio tiene por objetivo determinar la presencia de variabilidad genética en los aislados de S. mutans provenientes de individuos Chilenos de 6- 11 años; de una población urbana y otra rural. Para ello se extrajeron muestras de saliva de 52 pacientes, a partir de las cuales se obtuvieron 104 aislados bacterianos, estos fueron sometidos a PCR, con los primers GTFB-F y GFTB-R, para comprobar si correspondían o no a S. mutans. Mediante este análisis se pudo establecer que 92 de los aislados correspondían a este microorganismo, de los cuales 41 corresponden a la población urbana y 51 a la rural. Luego se purificó el DNA genómico de los aislados y se sometió a la técnica RAPD, con dos primers F-05 y F-09, con el objetivo de determinar la existencia de variabilidad entre las muestras. Con el uso de esta técnica se encontró la existencia de variabilidad genética en las muestras de ambas poblaciones. Mediante el análisis del programa RAPDistance se determinó que el valor promedio de distancia (SAB) correspondió a 0,69± 0,14 para los individuos de ambas poblaciones estudiadas, con lo que se indica que no hay una gran similitud entre los aislados.