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ANÁLISE DO PERFIL MOLECULAR DE VESTÍGIOS SANGUÍNEOS PROVENIENTES DE LOCAIS DE CRIME APÓS APLICAÇÃO DE REAGENTE QUIMIOLUMINESCENTE.Santos, Luciana Maia Escher dos 24 June 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-06-24 / Molecular Biology shown to be an effective tool in forensic laboratories for the
ability to identify an individual from minute amounts of biological samples such as
blood, bones, semen, hair, teeth, nails, spittle, urine and other biological fluids
recovered from the crime scene. One of the main biological evidence found at a
crime scene are traces of bloodstains. This study aimed to analyze the molecular
profiles of biological samples exposed to the chemiluminescent reagent luminol
based on different storage times (48 hours and 30 days). With the measurement of
all samples can be inferred that in the first 48 hours of storage, there was obtained
DNA and varying concentrations after application of the chemiluminescent reagent.
The samples were amplified by PCR using a multiplex system AmpFlSTR ® Select
NGM and capillary electrophoresis. Molecular profiles were obtained complete
and incomplete denoting specificity as the quality and quantity of the sample
analyzed. The selection of molecular markers mini-STRs greatly contributed to the
success of these profiles, allowing the study and analysis of degraded material. Our
data suggest that the degradation of the DNA molecule exposed to the
chemiluminescent reagent was higher in the samples compared to those containing
diluted whole blood impregnation. Therefore, analyzing the bloodstains samples
exposed to luminol in shorter storage provide molecular profiles compatible to clash
samples. / A Biologia Molecular mostrou-se uma ferramenta efetiva nos laboratórios forenses
pela capacidade de identificar um indivíduo a partir de quantidades ínfimas de
amostras biológicas como sangue, ossos, sêmen, cabelo, dentes, unhas, saliva,
urina, entre outros fluidos biológicos recuperados no local do crime. Uma das
principais evidências biológicas encontradas em local de crime são vestígios de
substâncias hematóides. Esta pesquisa visou a análise de perfis moleculares de
amostras biológicas expostas ao reagente quimioluminescente a base de luminol em
diferentes tempos de armazenamento (48 horas e 30 dias). Com a quantificação de
todas as amostras pode-se inferir que nas primeiras 48 horas de armazenamento,
obtiveram-se concentrações variáveis de DNA e após a aplicação do reagente
quimioluminescente. As amostras foram amplificadas por PCR utilizando um sistema
multiplex AmpFlSTR® NGM SElect e eletroforese capilar. Foram obtidos perfis
moleculares completos e incompletos denotando inespecificidade conforme a
qualidade e quantidade da amostra analisada. A seleção dos 17 marcadores
moleculares mini-STRs em muito contribuiu para o sucesso desses perfis, permitindo
estudo e análise de material degradado. Os dados indicam que a degradação da
molécula de DNA exposta ao reagente quimioluminescente foi maior nas amostras
diluídas em relação àquelas contendo impregnação com sangue total. A análise
estatística das amostras com e sem exposição ao reagente quimioluminescente
comparado ao grupo controle e em diferentes concentrações, mostrou não haver
diferença estatísticamente significativa entre os valores quantificados obtidos. Ainda
assim, analisar as amostras hematóides expostas ao luminol em menor tempo de
armazenamento proporcionarão perfis moleculares compatíveis ao confronto de
amostras.
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