CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / The present study was conducted to evaluate the effects of heat stress on testis and semen criteria, and seminal plasma proteome of rams. Scrotal insulation (SI) was in place for eight days, using six rams. Animals were evaluated before (day 0), during and after SI until semen parameters returned to normal. Scrotal circumference, other testis parameters and sperm motility decreased after SI but returned to pre-insulation values on days 71, 85 and 113, respectively. Rams became azoospermic from day 29 to 71. The number of detectable spots per 2D gel decreased from 256  31 to 104  14 between days 0 and 29 (p < 0.05), returning to pre-insulation values on day 134. Several seminal proteins detected before insulation were absent when animals had low sperm motility or azoospermia, including albumin, arylsulfatase A, plasma glutamate carboxypeptidase, cathepsin F, transferrin, alpha-2-macroglobulin, angiotensin-converting enzyme, alpha fucosidase, beta galactosidase, TCP-1 containing chaperonins, heat shock protein 70 kDa, clusterin, palate, lung and nasal epithelium clone, ram seminal vesicle proteins, bodhesin 2, superoxide dismutase, cystatin B, peroxiredoxin 5, tissue inhibitor of metalloproteinase 2. Expression of other 17 proteins were quantitatively changed in the seminal plasma 2-D maps as the result of SI, such as actin, protein DJ-1, HRPE773-like, C-reactive protein precursor and porcine seminal plasma spermadhesins, among others. In conclusion, the expression of seminal plasma proteins was drastically altered by scrotal insulation, coincidental with changes in testis size and semen criteria. Proteins affected by heat stress are potentially involved in several events, from sperm protection and maturation to fertilization. / O presente estudo foi conduzido para avaliar os efeitos do estresse tÃrmico no testÃculo, parÃmetros seminais e proteoma do plasma seminal de carneiros. Seis carneiros da RaÃa Morada Nova var. branca foram submetidos à insulaÃÃo escrotal (IE) por oito dias. Os animais foram avaliados antes (dia 0), durante e apÃs a insulaÃÃo atà que os parÃmetros seminais tivessem retornado a normalidade. A circunferÃncia escrotal, bem como os demais parÃmetros de biometria testicular e a motilidade espermÃtica diminuÃram apÃs a IE, mas com retorno aos valores de prÃinsulaÃÃo entre os dias 71, 85 e 113, respectivamente. Os carneiros tornaram-se azoospÃrmicos entre os dias 29 e 71. O nÃmero de spots detectÃveis/gel diminuiu de 256  31 para 104  14 entre os dias 0 e 29 (p < 0,05), retornando aos valores prÃinsulaÃÃo no dia 134. Algumas proteÃnas detectadas no plasma seminal antes da insulaÃÃo estavam ausentes quando os animais tiveram menor motilidade espermÃtica ou azoospermia, incluindo albumina, arilsulfatase A, plasma glutamato carboxipeptidase, catepsina F, transferrina, alfa-2-macroglobulina, enzima conversora de angiotensina, alfa fucosidase, beta galactosidase, chaperonina contendo TCP-1, proteÃna de choque tÃrmico 70 kDa, clusterina, âpalate, lung and nasal epithelium cloneâ, âram seminal vesicle proteinsâ, bodesina 2, superÃxido dismutase, cistatina B, peroxiredoxina 5, tecido inibidor de metaloproteinase 2. ExpressÃes de outras 17 proteÃnas foram quantitativamente alteradas nos mapas bidimensionais do plasma seminal como resultado da IE, como a actina, proteÃna DJ-1, HRPE773, proteÃna C-reativa, âporcine seminal plasma espermadhesinsâ, entre outras. Conclui-se, que a expressÃo de proteÃnas no plasma seminal foi drasticamente alterada pela insulaÃÃo escrotal, coincidindo com mudanÃas no tamanho testicular e parÃmetros espermÃticos. As proteÃnas afetadas pelo calor estÃo potencialmente envolvidas em diversos eventos, como proteÃÃo espermÃtica, maturaÃÃo e fertilizaÃÃo.