Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal. / La pollinisation et la fécondation induisent, dans le pistil, l'expression de nombreux messagers. Certains de ceux-ci sont nouvellement produits tandis que d'autres voient leur expression augmenter. Ce mémoire expose les résultats obtenus pour trois de ces gènes induits par la pollinisation et/ou la fécondation chez Solanum chacoense Bitt., une pomme de terre sauvage. Le premier, SPP2, est une désoxygénase de fonction inconnue de la famille des 2-oxoglutarate dépendantes, que les identités de séquence rapprochent d'enzymes impliquées dans les voies de biosynthèse d'alcaloïdes. Ce clone fut isolé simultanémment de deux banques d'ADNc construites à partir de pistils pollinisés depuis 48 heures (banque PP48) et 96 heures (banque 0v96), par la méthode d'hybridation soustractive. Le second gène, l'ACC oxydase qui est l'enzyme responsable de transformer l'ACC en éthylène, fut isolé dans la banque d'ADNc PP48 par la méthode du criblage différentiel. Le corps de ce mémoire traite principalement de ces deux premiers gènes, le troisième nommé SPP30 étant présenté en annexe sous forme d'article manuscrit, afin de mieux cerner la discussion. Ce troisième gène, SPP30, est très fortement homologue à un antigène de surface de Plasmodium falciparum, l'agent causal de la malaria, et fut isolé dans la banque d'ADNc PP48 par hybridation soustractive. L'ACC oxydase est un gène qui a déjà été caractérisé chez un grand nombre d'espèces de plantes. Depuis longtemps déjà il est établi que l'ACC oxydase est une importante enzyme de la voie de biosynthèse de l'éthylène, et que ce dernier est connu pour ses effets au niveau de la sénescence des pièces florales, sénescence qu'induisent les événements de pollinisation et de fécondation chez les végétaux. Pour cette raison, nous n'avons pas poussé très avant sa caractérisation. Une hybridation d'ARN de type northern démontre tout de même que, chez Solanum chacoense, l'expression de l'ACC oxydase augmente fortement dans le pistil suite à une pollinisation de 48 heures. L'intérêt du clone SPP2, quant à lui, nous est apparu grandissant au fur et à mesure que sa caractérisation progressait. Nous avons réussi, par le biais de nombreuses expérimentations, a démontrer que les ARNm de la désoxygénase SPP2 sont non seulement induits dans les ovaires matures par la pollinisation (compatible ou non), mais également par la fécondation et la blessure du style. On ne peut détecter les ARNm de SPP2 dans le style des fleurs matures, car son patron d'expression régresse de l'extrémité du style jusqu'à l'ovaire, et cela en fonction du développement floral. On constate aussi que l'augmentation de l'expression de SPP2 que l'on peut observer dans les ovaires matures de S. chacoense suite à la pollinisation et la fécondation, n'est pas le résultat du développement floral normal des fleurs. De plus, la période durant laquelle l'expression de SPP2 est maximale, correspond en fait à la période de réceptivité de la fleur à la fécondation. Finalement, le patron d'expression de SPP2 coïncide avec la zone d'abcission du style. Le patron d'expression de SPP2 nous laisse penser que cette enzyme pourrait être impliquée dans la voie de biosynthèse de métabolites secondaires pouvant jouer un rôle dans le guidage et la croissance des tubes polliniques vers les ovules. Aussi, la forme que prend l'expression des ARNm de SPP2 au niveau de la base du style, nous laisse penser que SPP2 pourrait également jouer un rôle de marqueur cellulaire entre le style et l'ovaire. Finalement, on sait que SPP2 est principalement exprimée au niveau du pistil, des feuilles et des fruits, et que son expression coïncide (dans les fleurs) avec la période pendant laquelle les fleurs de S. chacoense sont réceptives à la pollinisation et à la fécondation, alors que sa diminution coïncide avec la période à partir de laquelle la fécondation ne peut plus avoir lieu chez les fleurs. Tout ceci nous laisse penser que notre désoxygénase (présente de façon constitutive et induite par la pollinisation, la fécondation ou la blessure), pourrait être impliquée dans la voie de biosynthèse d'un métabolite secondaire tels qu'un alcaloïde possédant des propriétés anti-microbiennes ou encore, anti-herbivores.

Thesis (M. Eng.)--Carleton University, 2001. / Includes bibliographical references (p. 159-162). Also available in electronic format on the Internet.

Thèse numérisée par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal. / Nous traitons dans ce mémoire de la question du modèle d'insertion sociétale des Églises en Afrique. Cette réflexion ecclésiologique s'impose au vu de la situation africaine de "crise" qui s'aggrave, rendant l'avenir de millions de vies déjà précaires, incertain voire impossible. Cette situation contraste avec la croissance numérique des fidèles dans les Églises d'Afrique, vue par certains comme un signe d'espoir. À notre connaissance et selon notre expérience, il se pose un sérieux problème: celui de l'écart flagrant entre, d'une part, la pratique et le discours propres au mode actuel d'insertion sociétale des Églises et, d'autre part, les aspirations fondamentales des peuples africains. Ce modèle d'insertion sociétale passe à côté de l'Afrique réelle et, en conséquence, hypothèque la crédibilité, voire, l'avenir même desdites Églises. Une typologie des modèles d'insertion ecclésiale dans 1 'histoire nous a aidé à préciser ceux qui ont cours en Afrique ou qui seraient appropriés à la situation africaine. Un examen historique du rapport de la .conscience croyante à 1 'organisation sociétale révèle trois modèles ecclésiologiques: celui de la "chrétienté", celui de la "modernité" et le modèle "prophétique" pour lequel nous distinguons deux versions. Dans le modèle de la chrétienté, les structures ecclésiales et sociétales ne font qu'un, au sein d'un "ordre social" perçu comme voulu tel par Dieu. Dans celui de la modernité, l'Église et la société sont séparées et étrangères l'une à l'autre: l'accent y est mis sur la vie intérieure et le salut individuel. Enfin, le modèle prophétique renoue avec la grande tradition biblique et patristique. Une première version contemporaine se retrouve surtout à Vatican II et prône l'ouverture ou l'attention au monde et à 1 'histoire, lieu de la possible manifestation de Dieu. La deuxième version est véhiculée surtout par le courant théologique de la libération et marginalement par l'enseignement social de 1 'Église catholique. cette version exige la prise en compte du sort des pauvres et des exclus dans le rapport Église-société, car ce serait là le chemin privilégié de la révélation elle-même. Nous faisons l'hypothèse que le modèle prophétique, dans sa deuxième version, constitue la "voie" la plus authentiquement chrétienne pour 1 'insertion des Églises en Afrique. Cette approche serait la plus soucieuse de tout homme et de tout l'homme, "image de Dieu", dans sa situation socio-historique concrète, et serait plus apte à faire droit aux déshérités. Elle suppose un engagement dans une transformation libératrice de la société. Au plan de la méthode, nous avons d'abord cherché à situer ecclésiologiquement la pratique et le discours actuels des Églises concernant leur insertion sociétale. Pour cette démarche critique, nous avons puisé dans notre expérience, pour le cas spécifique de 1 'Église d'Idiofa, au Zaïre, et nous avons eu recours au diagnostic du théologien camerounais bien connu, Jean- Marc Éla, pour l'ensemble des Églises africaines. Nous avons procédé de la même manière pour les propositions de changement, mais en laissant, cette fois, toute la place à Jean-Marc Éla. Cette approche en deux volets principaux nous paraissait propice à mettre en évidence les passages nécessaires.

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l’Université de Montréal. / Le corps professionnel infirmier qui regroupe 460 000 individus en France, assume une fonction sociale nodale au sein de nos systèmes de santé. Ce milieu professionnel qui offre une vision du travail du soin à double facette (Technique/relationnelle) est l'objet d'un intérêt multidisciplinaire croissant. Nonobstant, les études menées sur l'aspect identitaire de la profession, c'est sous l'angle de la santé au travail que nous appréhenderons son objet. Nombre d'études, menées ces vingt-cinq dernières années ont mis en évidence que les métiers en relation avec le public et plus particulièrement ceux en rapport avec la maladie et la mort, généraient des tensions émotionnelles et psychiques intenses. Selon cette perspective, le stress subi dans le quotidien du travail de l'infirmière a été abondamment développé, soit sous l'angle de l'épuisement professionnel ou encore sous celui de la détresse émotionnelle. Plus récemment, les centres d'intérêt se sont déplacés vers d'autres indicateurs, tels que la satisfaction au travail, le bien-être psychologique ou encore la qualité de vie au travail. Ces approches volontairement positives attestent que si le travail du soin est générateur de stress, ce dernier peut être modulé par des ressources personnelles ou situationnelles que l'individu interpose entre lui et le stimulus. Dans le contexte de rationalité économique actuelle où la restructuration complète des systèmes de santé fragilise le sentiment de sécurité au travail, il est pertinent, dans le souci du maintien de la qualité des soins, d'interroger en amont, la qualité de vie au travail des infirmier(e)s. C'est l'objet de la présente étude dont le but est de décrire les niveaux de qualité de vie et de soutien au travail ainsi que d'identifier les stratégies de coping utilisées par des infirmier(e)s d'un établissement psychiatrique de la région parisienne. En seconde intention, les relations possibles entre les différentes variables d'intérêt ont été examinées. L'échantillon de convenance de 131 individus constitué à partir de la population infirmière disponible de rétablissement a été invité à remplir un questionnaire auto administré constitué de trois instruments de mesure soit : le Work Relationshin Index (WRI) qui correspond à une des trois dimensions du Work Environment Scale (WES) élaboré par Moos (1986) ; Le questionnaire de copine de Paulhan , Nuissier, Quintard, Cousson et Bourgeois (1994) adaptation française du Ways of Coping Check-List de Vitaliano et al. (1985) ; l'échelle de la qualité de vie au travail de Elizur et Shye(1991) dans sa traduction française (Delmas, 1999) et d'un talon sociodémographique. La modèle d'adaptation de Roy (Andrews & Roy, 1991) a servi d'assise conceptuelle dans le cadre de cette recherche. Les données collectées ont été analysées statistiquement à l'aide du logiciel SPSS.9. Dans l'ensemble, il appert que les infirmier(e)s qui ont participé à cette étude témoignent d'une qualité de vie au travail modérée. Des éléments contextuels, tels que la perception d'etre moyennement soutenu par ses collègues de travail ou par son supérieur hiérarchique, de ressentir un stress intense face à certaines situations, appuient ce constat. La dimension relationnelle est omniprésente dans les résultats de cette recherche puisque, tant le soutien du supérieur que la cohésion entre les pairs sont associés significativement et positivement à la qualité de vie au travail de ces infirmier(e)s. Par ailleurs, la recherche de soutien social, stratégie la plus significative à l'endroit de la qualité de vie au travail, bénéficie de l'effet médiateur du soutien du supérieur et dans une moindre mesure, de la cohésion entre les pairs. Ces résultats confirment le rôle essentiel joué par le supérieur hiérarchique à l'endroit de la qualité de vie au travail perçue par les infirmier(e)s de cette étude. Bien qu'ils ne puissent être généralisés à l'ensemble de la population infirmière, ces résultats permettent néanmoins de poser l'importance de la dimension relationnelle dans les environnements de travail contraignants.

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l’Université de Montréal. / Methodology was developed for synthesizing chemical libraries for discovering new peptide honnone receptor ligands. In particular, a combinatorial strategy was used for library synthesis of neruokinin and somatostatin receptor ligand candidates. This strategy was based on the design and synthesis of indolizidin-2-one amino acid scaffolds and their subsequent incorporation into a series of amido amides (88-140) using a novel solid-phase approach. Dipeptide mimic 7-benzylindolizidinone amino acid 48 was synthesized on a gram scale by a literature procedure and then introduced into a library of candidates (88-140) to discover new somatostatin and nemokinin receptor ligands. A combinatorial strategy was employed for their synthesis which featured oxime resin as solid support. 7-Benzylindolizidinone AL(BOC) amino acid 48 was coupled to oxime resin. The library members were then obtained by a sequence featuring deprotection of the BOC group, free basing and coupling to the amine with 5 different carboxylic acids, followed by displacement with 9 different primary amines to give amido amide targets. (J A second scaffold was conceived and synthesized in the second part of the thesis. Enantiopure 7^-(BOC)amino-7-[3-azidopropyl]mdolizidm-2-one acid 141 has been synthesized by displacement of the methanesulfonate of its 7- hydroxypropyl counterpart 151 with sodium azide and subsequent ester hydrolysis. ^V-(BOC)Amino-7-[3-hydroxypropyl]indolizidin-2-one ester 151 was obtained from a sequence commencing with the alkylation of (2S,SS)-di-tertbutyl 5-oxo-2,8-di-[^-(PhF)amino]azelate 75 (PhF = 9-(9-phenylfluorenyl)). Stereoselective allylation of 75, regioselective olefin hydroboration, selective primary alcohol protection as a silyl ether and oxidation of the secondary alcohol gave (2S,4R,SS)-di-tert-buty\ 4-[3-tër/-butyldimethylsiloxypropyl]-5-oxo-2,8-din [AL(PhF)amino]azelate 149 as a pure diastereomer in 33% overall yield. Linear ketone 149 was then converted into the indolizidinone heterocycle by a route featuring reductive amination, lactam cyclization and isolation by way of a silyl ether which provided the (6>S',7^?)-isomer of 151. Enantiopure 7V-(BOC)amino-7- (3-azidopropyl)indolizidin-2-one acid 141 was also achieved by converted 151 to its respective methanesufonate followed by displacement with sodium azide. In summary, this thesis provides first an introduction into the importance of the peptide hormones Substance P and somatostatin. The combinatorial strategy is then illustrated by the introduction of 7-benzylindolizidin-2-one 48 into a focused library. Finally, methodology is presented for preparing alternative 7-alkylindolizidin-2-one amino acid scaffolds. / Une méthodologie a été développée pour la synthèse d'une librairie de molécules dans le but de mettre au point de nouveaux ligands pour les récepteurs d'hormones peptidiques. En particulier, une stratégie combinatoire a été utilisée dans la synthèse d'une librairie de ligands potentiels aux récepteurs de la neurokinine et de la somatostatine. Cette stratégie est basée sur le design et la synthèse des acides aminés indolizidin-2-one comme squelettes et leur incorporation dans une série d'amido amides utilisant une nouvelle approche sur support solide. Le peptidomimétique 7-benzylindolizidinone 48 a été synthétisé sur une échelle multigramme selon un protocole de la littérature et a ensuite été incorporé dans une librairie de ligands potentiels aux récepteurs de la somatostatine et de la neurokinine. L'approche combinatoire utilisée pour la synthèse fait appel à la résine d'oxime comme support solide. L'acide aminé 7- benzylindolizidinone N-(BOC) 48 a été couplé à la résine. La librairie moléculaire a ensuite été obtenue par la déprotection du groupe BOC, l'obtention de la base libre et le couplage de l'amine avec cinq différents acides carboxyliques, suivi du déplacement avec neuf aminés primaires différentes pour donner les amido amides ciblés. Un deuxième squelette a été conçu et synthétisé dans la deuxième partie du projet. L'acide ^V-(BOC)amino-7-[3-azidopropyl]mdolizidm-2-one énantiopur 141 a été synthétisé par le déplacement du méthanesulfonate du 7-hydroxypropyl 151 avec l'azoture de sodium suivi de l'hydrolyse de l'ester. L'ester N- (BOC)amino-7-[3-hydroxypropyl]indolizidin-2-one 151 fût obtenu par une séquence de réactions commençant par l'alkylation du (25', SS)-di-tert-butyï-5- oxo-2,8-di-[^-(PhF)amino]azélate 75 (PhF = 9-(9-phénylfluorényl)). L'allylation stéréosélective de 75 , suivi de l'hydroboration régiosélective de l'oléfme, de la IV protection sélective de l'alcool primaire sous forme d'ether silylé puis de l'oxidation de l'alcool secondaire a donné le (25', 4R, SS)-di-tert-bvtyl-4-[3-tertbutyldiméthylsiloxypropyl]- 5-oxo-2,8-di-[AL(PhF)amino]azélate 149 comme seul diastéréoisomère dans un rendement global de 33%. La transformation de la cétone 149 en hétérocycle indolizidinone a par la suite été réalisée par une amination reductive, une cyclisation à la lactame et l'isolation sous forme d'ether silylé pour donner l'isomère (65, 77?) de 151. L'acide 7^-(BOC)amino-7-[3- azidopropyl]indolizidm-2-one 141 énantiopure a aussi été synthétisé par la conversion de 151 au méthanesulfonate correspondant suivi du déplacement avec l'azoture de sodiuni. En résumé, ce mémoire donne premièrement une introduction à l'importance des hormones peptidiques que sont la substance P et la somatostatine. La stratégie utilisée est ensuite illustrée par l'introduction du 7- beiizylindolizidin-2-one 48 dans une librairie de molécules. Finalement, la méthodologie pour préparer différents acides aminés 7-alkylindolizidin-2-one est présentée.

Thèse numérisée par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal. / Cette étude biosystématique a pour but de déterminer la composition, la nomenclature et l évolution de la section Conyzopsis. Les diverses hypothèses rapportées dans la documentation mentionnent la présence de deux, quatre ou cinq taxons reliés aux genres Aster, Erigeron, Conyza ou Brachyaçtis selon les auteurs consultés. Notre démarche expérimentale consiste à établir la morphologie, la distribution, l écologie, le nombre chromosomique, le mode de reproduction, la possibilité d'hybridation artificielle et les électrophorégrammes des taxons afin de connaître la distance génétique et les facteurs d'isolement entre les espèces. Nos travaux de recherche ont contribué largement à la connaissance de la biologie du groupe. Nos études taxonomiques traditionnelles nous ont permis d'établir la présence de trois taxons dans la section: Aster frondosus, A. brachyactis et A. Laurentianus. Ces trois espèces se caractérisent par des différenées morphologiques ténues mais nettes et des préférences écologiques distinctes. La culture de ces espèces dans des conditions uniformes, a confirmé la stabilité des caractères diagnostiques et révélé des différences dans le développement et la floraison de l'A. laurentianus. Cependant, les variétés de l A. laurentianus et les sous-espèces de l A. brachyactis ne sont pas reconnues. La cytologie nous a informés que la section Conyzopsis est composée d'espèces diploides à 2n = 14 chromosomes. L'étude de la reproduction nous a révélé que le groupe est autocompatible. L'A. brachyactis et l'A. laurentianus sont des espèces fortement autofécondes alors que l A. frondosus peut aussi se reproduire par fécondation croisée. Nos expériences d'hybridation artificielle ont démontré une interfécondité unididirectionnelle entre les espèces (A. brachyactis (♀) x A. frondosus (♂); A. laurentianus (♀) x A. frondosus (♂); A. laurentianus (♀) x A. brachyactis (♂)). Quoique des hybrides fertiles puissent être produits expérimentalement, l'isolement des espèces en nature est assuré par l'autofécondation de l A. brachyactis et de l'A. laurentianus. La production d'hybrides A. frondosus (♀) x A. modestus (♂) a confirmé les relations étroites du groupe étudie avec le genre Aster. Les analyses électrophorétiques ont mis en évidence une grande similarité génétique entre l'A. brachyactis et l'A. laurentianus et une distance plus considérable de l A. frondosus. L ensemble de nos résultats suggère une lignée évolutive caractérisée par deux spéciations rapides et successives: A. frondosus → A. brachyactis → A. laurentianus. La position ancestrale de l A. frondosus reflète une origine nord-américaine pour la section Conyzopsis.

Dès sa création en 1966, l’ERAP s’est fixé pour but d’accroître la production du pétrole « franc », en diversifiant ses sources d’approvisionnement. Un tel objectif prend une tournure cruciale dès lors que les rapports tendus entre le groupe français et les autorités algériennes semblent menacer ses acquis dans le Sahara. Toutefois, se tailler une place sur le marché mondial semble à cette époque une tâche ardue, voire improbable, puisque les espaces les plus pétrolifères sont déjà occupés par les grandes sociétés, dites Majors. Néanmoins, la société d’État française réussit à s’implanter dans plusieurs pays producteurs, dont l’Irak en 1968, jusqu’alors considéré comme la chasse gardée de la Compagnie française des pétroles (CFP). Aussi, l’expérience irakienne, suite à l’insuccès en Algérie, incite Elf ERAP à se concentrer dans les pays pétroliers de l’Afrique subsaharienne et en Mer du Nord. Le 3 février 1968, Elf ERAP signe un accord avec la compagnie d’État pétrolière, INOC, pour se charger de la prospection et de l’exploitation d’une partie du territoire confisqué par l’État irakien à la puissante Iraq Petroleum Company (IPC). En contrepartie de ses apports financiers et techniques, Elf ERAP sera rémunérée par un approvisionnement garanti en pétrole irakien : il s’agit d’un nouveau genre de partenariat, dit « contrat d’agence ». Ce dernier succède au système classique des concessions et vaut à la société d’État un franc succès dans son projet de pénétration au Moyen Orient. Très vite, les prospections donnent lieu à la découverte de gisements. La production démarre en 1976 et s’élève à 5 millions de tonnes en 1977. Dès lors, Elf ERAP, devenue la SNEA, peut envisager avec optimisme son avenir énergétique, puisque sa sécurité d’approvisionnement est, en partie, assurée par le marché irakien. Mais, contre toute attente, le groupe d’État français se retire de l’affaire en mai 1977, laissant place à l’INOC, qui prend en charge le projet deux ans avant la date prévue par le contrat initial de 1968. Ce sujet de recherche consiste à éclaircir le rôle d’opérateur joué par l’ERAP en Irak, entre 1968 et 1977. Pour tenter d’expliquer le départ prématuré d’Elf Irak, il nous faut identifier les facteurs endogènes et exogènes qui ont pu motiver une telle décision. Autrement dit, la société d’État aurait-elle subi les revers de ses propres choix énergétiques ou un tel dénouement serait-il imputable à la politique pétrolière irakienne? Quelles sont les implications de la conjoncture pétrolière internationale dans le cas d’un tel retrait? Aidée des archives historiques d’Elf et de TOTAL, nous sommes arrivée à la conclusion que la compression du marché pétrolier, entre distributeurs et producteurs, au cours des années 1970, a considérablement nui à la rentabilité des contrats intermédiaires du type agence. / Ever since its creation in 1966, ERAP aimed to increase oil from the “franc” zone by diversifying its supply sources. Such an aim became all the more crucial as its acquisitions in the Sahara seemed threatened by tense relations between the French group and Algerian authorities. Still, to secure a share of the world market at that time seemed to a difficult if not an impossible task, the biggest oil-producing spaces having already been occupied by the big corporations called Majors. However, the French state company managed to settle in several oil-producing countries, including Iraq in 1968, until then viewed as a private hunting ground for the Compagnie française des pétroles (CFP). Also, following its failure in Algeria, the Iraq experiment prompted Elf ERAP to set its sights on oil-rich subsaharian African countries and the North Sea. On February 3rd 1968, Elf ERAP signed an agreement with the state oil company INOC to take charge of exploration and exploitation of a part of the territory that was confiscated by the Iraqi government from the powerful Iraq Petroleum Company (IPC). In return for this financial and technical input/support, Elf ERAP would be rewarded with steady supply of Iraqi oil. It was a new kind of partnership termed « service contract ». The latter replaced the old system of concessions and helped the state company succeed in its attempt to penetrate the Middle East. Exploration quickly led to the discovery of oil fields. Production started in 1976 and reached 5 million tons in 1977.This allowed the Elf ERAP, renamed the SNEA, to look with optimism at its energy supply future, the latter being provided in considerable part by the Iraqi market. Surprisingly, however, the French state company backed away from the deal in May 1977, and was replaced by the INOC which took over the project two years before the date planned by the initial contract of 1968. This research project seeks to clarify the operator role played by ERAP in Iraq between 1968 and 1977. To explain the premature departure of Elf Iraq, one needs to determine both the endogenous and exogenous factors that might have motivated such a move. In other words, did the state company suffer the repercussions of its own energy choices, or was the Iraqi oil policy responsible for such an outcome? To what extent was the withdrawal attributable to the international oil situation? With the help of Elf and TOTAL archives, we have come to the conclusion that the compression of the oil market uniting distributors and producers greatly affected the profitability of intermediary contracts « service contracts».

Depuis quelques années, il y a émergence de souches de Salmonella enterica sérovar Typhimurium multirésistantes causant une septicémie et la mort chez le porc. Ceci constitue un problème majeur pour l’industrie porcine et possiblement pour la santé publique. L’objectif de ce projet était de comparer et de caractériser une souche capable de causer une septicémie chez le porc et une souche commensale, en observant l’interaction avec des cellules épithéliales, des macrophages humains et d’identifier des gènes exprimés par les souches septicémiques et les souches commensales. Tout d’abord, l’infection de cellules épithéliales permet d’observer l’adhérence et l’invasion des bactéries, pour ainsi mettre en évidence la capacité des souches à coloniser le tractus gastro-intestinal. La souche commensale possède un pouvoir d’adhésion supérieur à la souche septicémique. Par la suite, l’infection de macrophages permet de caractériser le niveau de phagocytose et de survie. L’importance de la survie dans les macrophages pourrait permettre de faire un lien avec la septicémie. Toutefois, aucune différence n’est observable dans les conditions qui ont été testé. Ensuite, la technique SCOTS (Selective Capture of Transcribed Sequences) est utilisée pour capturer des gènes uniques à la souche septicémique et un autre SCOTS est fait pour capturer les gènes spécifiques à la souche commensale. Finalement, les gènes sont clonés, leur spécificité face aux souches est analysé par dot blot et ils sont identifiés par séquençage suivient d’une analyses bioinformatiques. Les gènes identifiés par SCOTS, lors des captures pour la souche septicémique et la souche commensale, se trouvent à être des gènes communs aux Salmonella. Toutefois, la différence de pathologie causée par les deux souches, n’est peut-être pas l’acquisition de nouveaux gènes, mais plutôt une différence d’expression entre les deux souches. / For many years, there has been an emergence of new multi-drug resistant Salmonella enterica serovar Typhimurium strains responsible for high mortality rates in regards to swine infections. This represents a major problem for the swine industry and also for public health. The objective of this project was to characterize an isolate capable of creating swine septicemic illness and another which is naturally present in this host’s intestinal tract. The study conducted here includes observations of bacteria-epithelial cell interactions, bacteria-macrophage interactions and identification of genes expressed during different epithelial cell infections. Bacterial adherence and invasion of cells were observed after epithelial cell infection. This type of assay underlines the ability of the isolates to colonize the intestinal tract. The commensal strain has a better adherence then the other. Macrophage infections allowed characterization of bacterial phagocytosis and intracellular survival. Survival within macrophages reflects the capacity of the bacterial isolates to infect and survive in the host. There’s no difference between the two strains with the condition we test. A technique termed SCOTS (Selective Capture of Transcribed Sequences) was used to capture unique transcripts from the isolate which caused illness during swine infection. SCOTS was also used to find unique genes expressed by the commensal isolate. The captured fragments were cloned, their strain specificity was analyzed by dot blot and the genes transcribed were identified by direct sequencing followed by bioinformatic analysis. SCOTS carried out with the septicemic and the commensal isolates was done. During the SCOTS conducted with the strain isolated from a sick swine or with the isolate from healthy swine, common Salmonella genes were found. Thus, even though these two isolates cause different pathologies, virulence of the strains does not rely on the acquisition of new genes, but perhaps on differential gene expression among both.

Les vertébrés, du poisson à l'homme, possèdent un potentiel membranaire médié en partie par les ions chlorure (Cl-). L’une des premières formes d’activité neuronale lors du développement est la dépolarisation médiée par les ions chlorures extrudés par les canaux glycinergiques (GlyR) et GABAergiques. Cette dépolarisation est rendu possible grâce à l’expression retardée du co-transporteur d’ions chlorure et de potassium KCC2 lors du développement qui génère un gradient hyperpolarisant postnatalement chez les mammifères. Le rôle de cette dépolarisation précoce paradoxale durant le développement est inconnu. En injectant l’ARNm de KCC2 dans des embryons de poissons zébrés nouvellement fertilisé, nous avons devancé l’expression de ce co-transporteur rendant ainsi la glycine hyperpolarisante dans tous les neurones dès les premières phases du développement. Nous avons aussi ciblé le récepteur glycinergique directement en bloquant son activité et son expression à l’aide d’une drogue spécifique, la strychnine et d’un morpholino antisens (Knockdown). Dans les trois cas (KCC2, strychnine et GlyR KD), les perturbations de l’activité neuronale ont provoqués des erreurs dans la neurogenèse, en particulier une diminution du nombre d’interneurones sans avoir d’effets sur les motoneurones et les neurones sensoriels. De plus, en bloquant les canaux calciques activés à bas voltage dans le développement avec la drogue nifedipine, il y a des erreurs dans la neurogénèse semblables à celles remarquées dans les trois conditions précédentes. Nous concluons que la dépolarisation précoce par la glycine permet l’entrée du calcium et l’activation de la neurogénèse chez les interneurones. / Vertebrates, from fish to man, have a membrane potential mediated in part by chloride ions (Cl-). One of the first neuronal activity during development of the zebrafish spinal cord is cell depolarisation mediated by chloride extrusion via glycinergic receptors (GlyRs) and GABAergic receptors. This depolarisation is due to the absence of chloride-potassium cotransport channel KCC2, whose expression comes later in development, creating a hyperpolarising gradient. The role of this paradoxal depolarisation period during early stages of development is still unknown. By injecting KCC2 mRNA in newly fertilised zebrafish embryos, we expressed this co-transporter channel in neurons causing glycine to hyperpolarize in early phases of development. We also directly targeted the glycine receptor (GlyR) itself by blocking its activation with a chronic treatment of Strychnine, a specific drug, and by knocking down the expression of this receptor with an antisense morpholino injection. In those three conditions (KCC2, Strychnine and GlyR KD), perturbation of neuronal activity provoked major defects in neurogenesis, particulary in development of interneurons, without affecting other types of cells like motoneurons and sensory neurons. In addition, blocking low-voltage activated calcium channels with nifedipine provoked similar phenotypes. We conclude that the early glycine-mediated depolarisation allow calcium entry, thus activating certain aspects of interneurons neurogenesis.

Contexte: Le centrosome est un petit organite bien connu pour son rôle dans l'établissement du fuseau bipolaire pendant la division cellulaire. Les déficiences de la fonction du centrosome donnent souvent lieu à des maladies humaines, y compris le cancer et la formation de kystes rénaux. Nous sommes intéressés à étudier la fonction d'une nouvelle protéine centrosomale nommée CEP78, identifiée dans un criblage protéomique pour de nouveaux composants centrosomaux. Méthodes et résultats : Le traitement des cellules avec le nocodazole, un agent qui dépolymérise spécifiquement les microtubules cytoplasmiques mais pas les microtubules stabilisés du centrosome, a montré que CEP78 est un composant centrosomal stable. La colocalisation de cette protéine avec d'autres marqueurs centrosomaux tels que CEP164, SAS6, Centrine, tubuline polyglutamylée et POC5, à différentes phases du cycle cellulaire a indiqué que CEP78 est précisément à l'extrémité distale des centrioles, mères et filles. Il existe deux pointts CEP78 au cours de l’interphase et les cellules passent par la mitose, procentrioles maturent, et le nombre de points de CEP78 augmente à 4 par cellule et, à la fin de la télophase chaque cellule fille possède 2 points CEP78. La caractérisation des domaines fonctionnels de CEP78 a montré que des répétitions riches en leucine sont nécessaires pour la localisation centrosomale de la protéine. En outre, nous avons constaté que la surexpression de CEP78 ne change pas le nombre de mères/procentrioles mais diminue le nombre et l'intensité des points de CEP170 (protéine d'appendice sous-distal) sans diminution du niveau d'expression de cette protéine. D'autres études ont montré qu'il n'y a pas d'interaction entre ces deux protéines. Enfin, la surexpression de CEP78 protège des microtubules contre la dépolymérisation en présence de nocodazole, ce qui suggère qu'il possède la capacité de lier les microtubules. Conclusion : Nos résultats suggèrent que CEP78 est destiné à l'extrémité distale des centrioles matures par ses répétitions riche en lecuine, où il pourrait être impliqué dans la maturation ou la régulation de l'assemblage ou de la rénovation de l'appendice sous-distal centriolaire, une structure connue dans la nucléation des microtubules et d'ancrage. Comprendre la fonction de Cep78 contribuera à éclaircir le rôle du centrosome dans le cycle cellulaire. / Background: The centrosome is a tiny organelle well-known for its role in establishing the bipolar spindle during cell division. Defects in centrosome function often give rise to human diseases including cancer and kidney cyst formation. We are interested in studying the function of one novel centrosomal protein named CEP78, identified in a proteomic screen for novel centrosomal components. Methods and results: Treatment of cells with nocodazole, a microtubule-depolymerizing agent that specifically depolymerizes cytoplasmic microtubules but not the stabilized centrosome microtubules, showed that CEP78 is a stable centrosomal component. Colocalization of this protein with other centrosomal markers such as CEP164, SAS6, Centrin, Polyglutamylated tubulin and POC5 at different phases of the cell cycle indicated that CEP78 specifically localizes to the distal end of the mother and daughter centrioles. There are 2 CEP78 dots during the interphase and as the cells go through mitosis, procentrioles mature, and the number of CEP78 dots increases to 4 dots per cell and by the end of telophase each daughter cell has 2 CEP78 dots. Characterization of CEP78 functional domains showed that Leucine-rich repeats are necessary for centrosomal localization of the protein. In addition, we found that overexpression of CEP78 did not change the number of centrioles and centrosomes but decreased the number and intensity of CEP170 dots (sub-distal appendage protein) without a decrease in the expression level of this protein. Further studies showed that there is no interaction between these 2 proteins. Finally, overexpression of CEP78 protects microtubules from depolymerization in the presence of nocodazole, suggesting its ability to bind microtubules. Conclusion: Our findings suggest that CEP78 is targeted to the distal end of mature centrioles via its lecuine-rich repeats, where it could be involved in centriolar maturation or regulation of sub-distal appendage assembly and/or remodeling, a structure known to nucleate and anchor microtubules. Understanding the function of CEP78 will shed light on the role of the centrosome in cell cycle.