Describe el aislamiento y caracterización molecular de un nuevo flavivirus únicamente de mosquito, aislado de Culex (Melanoconion) occossa colectados en 2009 de un área urbana de Iquitos, Perú, ubicada en la cuenca del Amazonas, en la región noreste del Perú. La evidencia del Flavivirus es detectada mediante ensayo de inmunofluorescencia indirecta (IFI) en sobrenadante de cultivo celular de las células infectadas C6/36 usando anticuerpos policlonales grupo de Flavivirus y confirmada por RT-PCR. En comparación por pares de las secuencias de la región ENV, la más alta de nucleótidos (47,4%) y de aminoácidos (39,8%) la identidad se observa en el virus Nounané (NOUV). En comparación por pares de la región NS5, la identidad de nucleótidos más alta se observa en el virus Spondweni (65,9%), el virus de Iguape (IGUV; 65,7%) y el virus de Kedougou (65,6%); sin embargo, en el nivel de aminoácidos, la más alta identidad en pares de bases se observa en IGUV (69,8%), virus Naranjal (69,6%) y el virus Bussuquara (69,3%). El análisis filogenético utilizando ENV parcial y secuencias de aminoácidos NS5 revela que este Flavivirus forma un clado con NOUV. Para investigar la gama de huéspedes del nuevo Flavivirus, se inoculan una variedad de células de mamíferos (Vero 76, Vero E6, BHK, LLCMK y MDCK) con el tercer pasaje del aislamiento C6/36 y monitorea el efecto citopático (EC). No se detecta EC, y todas las líneas de células de mamífero son negativas para el antígeno Flavivirus por IFI y ARN Flavivirus por RT-PCR luego de catorce días de incubación. Propone que este Flavivirus genéticamente diferente sea llamado Nanay Virus (NANV), debido a la zona de Iquitos, Perú, donde fue detectado por primera vez.

En el Perú se encuentran áreas de alta prevalencia para el virus linfotrópico humano de células T (HTLV). Son pocas las investigaciones realizadas del virus asociado a parásitos en el país por lo que es importante ampliar su conocimiento. Se realizó un estudio sobre la seroprevalencia del virus HTLV I/II en pacientes con diagnóstico clínico y/o serológico de Estrongyloidiosis, Leishmaniosis y Tripanosomiosis con la finalidad de conocer la relación de coinfección entre el virus HTLV I/II y las enfermedades parasitarias mencionadas. Se analizaron 119 muestras de suero, de las cuales 26 correspondieron a pacientes con diagnóstico de Estrongyloidiosis, 17 con Leishmaniosis y 76 con Tripanosomiosis respectivamente. Datos demográficos y factores de riesgo que condicionan la asociación virus-parásito fueron recopilados a través de fichas clínico-epidemiológicas de pacientes atendidos en el Instituto de Medicina Tropical “Daniel Alcides Carrión” UNMSM. El diagnóstico de la infección para el virus HTLV-I/II fue evaluado en dos etapas, utilizando pruebas serológicas que detectan indirectamente la presencia de anticuerpos contra el virus HTLV-I/II. En la primera etapa de tamizaje se empleo la técnica serológica de ELISA HTLV-I/II Vironostika, empleándose como prueba confirmatoria la técnica de Inmunoblot INNOLIATM Innogenetics. Los resultados obtenidos fueron analizados por el paquete estadístico SPPS 12.0 con el test de ANOVA. En las 17 muestras correspondientes a Leishmaniosis no se encontró coinfección viral con HTLV-I/II. Asimismo en las muestras de pacientes con diagnóstico de Estrongyloidiosis se encontró una frecuencia de coinfección de 6.25% (1/16) en los individuos con parasitosis positiva siendo el rango de edad para la infección de 21 a 30 años y la procedencia el departamento de Junín. / Peru is one of the endemic centers of the Human T-cell Lymphotropic Virus (HTLV). Fewer researches about the coinfection of this virus and the parasitic diseases have been made in the country. An study of seroprevalence of the HTLV I/II in patients with clinic and/or serologic diagnostic of Estrongyloidiosis, Leishmaniosis and Trypanosomiosis have been made, with the aim of know the relations of coinfection between the HTLV I/II and the parasitic diseases. 119 serum samples were analyzed (26 correspondant to patients diagnosed with Estrongyloidiosis, 17 with Leishmaniosis and 76 with Tripanosomiosis). Demographic data and risk factors of the association virus – parasite were collected by using clinic epidemiologic histories of patients attended in the Instituto de Medicina Tropical “Daniel Alcides Carrión” UNMSM. Diagnose of the HTLV-I/II infection was evaluated in two steps using serologic test that detected indirectly the presence HTLV-I/II specific antibodies. On the first step (preselection) the serologic technique of ELISA HTLV-I/II Vironostika was used. Then the confirmatory test Inmunoblot INNOLIATM Innogenetics was used. The results obtained were analyzed by the software SPPS 12.0 using the test of ANOVA. In the samples corresponding to Leishmaniosis there was no presence of HTLV-I/II. The serum samples of Strongyloidiosis showed a coinfection frequency of 6.25% (1/16) on the individuals of positive parasitosis, in the age range of 21 to 30 years old from the department of Junín.

En el Perú se encuentran áreas de alta prevalencia para el virus linfotrópico humano de células T (HTLV). Son pocas las investigaciones realizadas del virus asociado a parásitos en el país por lo que es importante ampliar su conocimiento. Se realizó un estudio sobre la seroprevalencia del virus HTLV I/II en pacientes con diagnóstico clínico y/o serológico de Estrongyloidiosis, Leishmaniosis y Tripanosomiosis con la finalidad de conocer la relación de coinfección entre el virus HTLV I/II y las enfermedades parasitarias mencionadas. Se analizaron 119 muestras de suero, de las cuales 26 correspondieron a pacientes con diagnóstico de Estrongyloidiosis, 17 con Leishmaniosis y 76 con Tripanosomiosis respectivamente. Datos demográficos y factores de riesgo que condicionan la asociación virus-parásito fueron recopilados a través de fichas clínico-epidemiológicas de pacientes atendidos en el Instituto de Medicina Tropical “Daniel Alcides Carrión” UNMSM. El diagnóstico de la infección para el virus HTLV-I/II fue evaluado en dos etapas, utilizando pruebas serológicas que detectan indirectamente la presencia de anticuerpos contra el virus HTLV-I/II. En la primera etapa de tamizaje se empleo la técnica serológica de ELISA HTLV-I/II Vironostika, empleándose como prueba confirmatoria la técnica de Inmunoblot INNOLIATM Innogenetics. Los resultados obtenidos fueron analizados por el paquete estadístico SPPS 12.0 con el test de ANOVA. En las 17 muestras correspondientes a Leishmaniosis no se encontró coinfección viral con HTLV-I/II. Asimismo en las muestras de pacientes con diagnóstico de Estrongyloidiosis se encontró una frecuencia de coinfección de 6.25% (1/16) en los individuos con parasitosis positiva siendo el rango de edad para la infección de 21 a 30 años y la procedencia el departamento de Junín. / Peru is one of the endemic centers of the Human T-cell Lymphotropic Virus (HTLV). Fewer researches about the coinfection of this virus and the parasitic diseases have been made in the country. An study of seroprevalence of the HTLV I/II in patients with clinic and/or serologic diagnostic of Estrongyloidiosis, Leishmaniosis and Trypanosomiosis have been made, with the aim of know the relations of coinfection between the HTLV I/II and the parasitic diseases. 119 serum samples were analyzed (26 correspondant to patients diagnosed with Estrongyloidiosis, 17 with Leishmaniosis and 76 with Tripanosomiosis). Demographic data and risk factors of the association virus – parasite were collected by using clinic epidemiologic histories of patients attended in the Instituto de Medicina Tropical “Daniel Alcides Carrión” UNMSM. Diagnose of the HTLV-I/II infection was evaluated in two steps using serologic test that detected indirectly the presence HTLV-I/II specific antibodies. On the first step (preselection) the serologic technique of ELISA HTLV-I/II Vironostika was used. Then the confirmatory test Inmunoblot INNOLIATM Innogenetics was used. The results obtained were analyzed by the software SPPS 12.0 using the test of ANOVA. In the samples corresponding to Leishmaniosis there was no presence of HTLV-I/II. The serum samples of Strongyloidiosis showed a coinfection frequency of 6.25% (1/16) on the individuals of positive parasitosis, in the age range of 21 to 30 years old from the department of Junín.

Busca detectar anticuerpos contra el virus lengua azul en ovinos de doble propósito de una empresa ovejera de la sierra central ubicada a 3800 msnm en el distrito de Canchayllo, provincia de Jauja, Junín (grupo A), y en ovinos de pelo de pequeños criadores de cuatro distritos de la provincia de Chanchamayo, Junín ubicado a 600 msnm (grupo B). Se colectaron muestras de sangre de ovinos (n= 306) mayores a 4 meses de edad de ambos sexos del grupo A e igualmente de ovinos de pelo (n=82) del grupo B de cuatro distintos distritos: Perené (n=56), San Luis de Shauro (n=13), San Ramón (n=8) y Pichanaki (n=5) Chanchamayo, Junín. Los anticuerpos fueron detectados mediante la prueba de ELISA de competición. El 100% de las muestras de los ovinos del grupo A resultaron negativos a anticuerpos contra el VLA, mientras que el 56.1% (46/82) de las muestras de ovinos del grupo B tuvieron anticuerpos contra el virus. Se concluye que no se detectaron ovinos seropositivos a VLA criados a una altitud de 3800 msnm, mientras que el 56.1% de los ovinos situados a 600 msnm presentaron anticuerpos sugiriendo la existencia del vector competente para la transmisión de VLA. / Tesis

Identifica Culicoides spp. como vectores del virus de Lengua Azul (VLA) en granjas de ovinos de la ciudad de Pucallpa, provincia Coronel Portillo, Ucayali. Las granjas se caracterizaron por la presencia de arbustos, árboles, humedales y charcos; así como por la crianza semiextensiva de ovinos de pelo. El estudio fue realizado en tres etapas: la primera consistió en el análisis serológico de 46 muestras de suero de ovinos procedente de tres granjas mediante la prueba de inmunodifusión en gel agar (IDGA) y ELISA de competición (ELISAc) a fin de seleccionar granjas seropositivas a VLA. En la segunda se capturó 7930 Culicoides spp. durante tres días consecutivos con cinco trampas tipo CDC de luz ultravioleta instaladas a 50m aprox de los rebaños desde las 18:00 horas hasta las 06:00 horas del día siguiente; con el fin de determinar la población de especies presentes en las granjas seleccionadas. Por último, se realizó un periodo de captura adicional, obteniendose 11 pools de 100 hembras cada uno (Culicoides insignis : n = 1000 y Culicoides spp.: n = 100) y se obtuvo 15 muestras de sangre de ovino para el análisis molecular por PCR anidado utilizando dos pares de cebadores específicos que amplifican el segmento 7 que codifica la VP7 de VLA. Las tres granjas fueron seropositivas a Orbivirus con frecuencias de 46.7, 81.3, 20%, de las cuales el 96% fueron positivas a VLA. Se identificaron 7930 ejemplares de Culicoides spp., de los cuales 7839 (98.9%) fueron hembras y 91 (1.1%) machos. La principal especie fue Culicoides insignis (94.8%) seguido por C. foxi (3.2%) y C. ocumarensis (1.3%); otras especies como C. pseudodiabolicus, C. hylas y C. leopoldoi fueron capturados en densidades menores de 0.5%. También se registró a Culicoides lutzi aún no reportado en el Perú. De los 11 pool de Culicoides spp. (C. insignis = 10, Culicoides spp.=1), solo en un pool de C. insignis se observó banda a nivel de 1070pb, asimismo una muestra de ovino fue positivo. Se concluye que Culicoides insignis fue la principal especie capturada, y se ha demostrado la presencia del ARN del VLA en Culicoides insignis y en ovinos seropositivos de las granjas en estudio. / Tesis

Los virus del grupo C (GRCV) son un complejo que pertenecen al género Orthobunyavirus, de la familia Peribunyaviridae (anteriormente denominado Bunyaviridae). Estos virus están asociados con enfermedades febriles en humanos que generalmente habitan en áreas tropicales y subtropicales de América del Sur y América Central. A pesar de que muchos GRCV han sido aislados de mosquitos, animales y seres humanos, los análisis genéticos de estos virus aún son limitados. En el Perú, el centro de investigaciones de enfermedades tropicales de la marina de los Estados Unidos (NAMRU-6) viene conduciendo desde los años noventa una vigilancia pasiva de las enfermedades febriles. Durante este tiempo, se lograron recuperar e identificar mediante la prueba de inmunofluorescencia 65 aislamientos de GRCV de pacientes febriles habitantes del norte y sur de la Amazonía peruana. Para caracterizar estos aislamientos, se secuenciaron una región de 500 pb del segmento S y una región de 750 pb de los segmentos M y L. El análisis de la secuencia de los aislamientos clínicos mostró identidades de nucleótidos que oscilaban entre el 68% y el 100% y las identidades de secuencia de aminoácidos deducidas que oscilaban entre 72% y 100%. Las secuencias se compararon con las siguientes cepas referenciales: virus Caraparu (CARV), virus Murutucu (MURV), virus Oriboca (ORIV), virus Marituba (MTBV), virus Apeu (APEUV) y virus Madrid (MADV). La comparación de secuencias de los segmentos L y S de las cepas clínicas con cepas referenciales mostró dos clados; clado I formado por aislamientos con alta correlación con CARV-MADV y clado II conformado por aislamientos con alta correlación con MURV, ORIV, APEUV y MTBV. Las secuencias del segmento M contiene algunos aislamientos de GRCV diferentes filogeneticamente a los de segmento L y S y su distribución filogenética está altamente relacionada con la microneutralización serológica. Estos resultados demuestran las relaciones genéticas y serológicas de los GRCV que circula en la Amazonía peruana y la divergencia genética de los GRCV en el norte de la Amazonía. / Tesis

Los flavivirus se encuentran distribuidos en las principales zonas tropicales del mundo, nuestra Amazonía es endémica para virus como el dengue; sin embargo, alberga también otros virus que aún no han sido estudiados. El objetivo fue determinar la presencia de anticuerpos neutralizantes contra los virus Rocío, Ilheus y Oeste del Nilo; utilizando la técnica del ELISA como tamizaje para la detección de muestras positivas y la microneutralización como prueba confirmatoria. Se analizaron un total de 400 sueros por ELISA IgG de personas en fase convaleciente de la localidad de Iquitos entre los años 2003 y 2007. 152 sueros fueron negativos y 248 dieron positivo por ELISA IgG, de las cuales se confirmó mediante microneutralización 23 sueros positivos para el virus Ilheus y 7 sueros positivos para el virus Rocío. El valor de reacción cruzada para la prueba de ELISA fue de 87%. Los resultados indican la existencia de anticuerpos neutralizantes contra el virus Ilheus en un 5.75% de los sueros analizados y también la presencia de anticuerpos neutralizantes contra el virus Rocío en un 1.75% de los sueros, afortunadamente las infecciones por estos virus en la localidad de Iquitos no es significativa con respecto a la observada para el virus dengue (34.7%). / The flavivirus are distributed in major tropical areas around the world, our Amazonia is endemic to viruses such as dengue, but also houses many others which have not yet been studied. The aim was to evaluate the presence of neutralizing antibodies against Rocio, Ilheus and West Niles viruses using the technique of ELISA as screening for the detection of positive samples and the microneutralization as confirmatory test. Were analyzed a total of 400 sera by Elisa IgG from people in convalescent phase of the city of Iquitos during the years 2003 - 2007. 152 were negative and 248 were positive by Elisa IgG, of which was confirmed by microneutralization 23 sera positive for the virus Ilheus and 7 sera positive for the virus Rocio. The value of cross-reactivity for the ELISA was 87%. The results indicate the existence of neutralizing antibodies against the Ilheus virus in 5.75% of the sera analyzed and the presence of neutralizing antibodies against the Rocio virus in 1.75% of the sera. Fortunately the presence of these viruses in the city of Iquitos is not significant compared to that observed for the dengue virus (34.7%). / Tesis

Los flavivirus se encuentran distribuidos en las principales zonas tropicales del mundo, nuestra Amazonía es endémica para virus como el dengue; sin embargo, alberga también otros virus que aún no han sido estudiados. El objetivo fue determinar la presencia de anticuerpos neutralizantes contra los virus Rocío, Ilheus y Oeste del Nilo; utilizando la técnica del ELISA como tamizaje para la detección de muestras positivas y la microneutralización como prueba confirmatoria. Se analizaron un total de 400 sueros por ELISA IgG de personas en fase convaleciente de la localidad de Iquitos entre los años 2003 y 2007. 152 sueros fueron negativos y 248 dieron positivo por ELISA IgG, de las cuales se confirmó mediante microneutralización 23 sueros positivos para el virus Ilheus y 7 sueros positivos para el virus Rocío. El valor de reacción cruzada para la prueba de ELISA fue de 87%. Los resultados indican la existencia de anticuerpos neutralizantes contra el virus Ilheus en un 5.75% de los sueros analizados y también la presencia de anticuerpos neutralizantes contra el virus Rocío en un 1.75% de los sueros, afortunadamente las infecciones por estos virus en la localidad de Iquitos no es significativa con respecto a la observada para el virus dengue (34.7%). / The flavivirus are distributed in major tropical areas around the world, our Amazonia is endemic to viruses such as dengue, but also houses many others which have not yet been studied. The aim was to evaluate the presence of neutralizing antibodies against Rocio, Ilheus and West Niles viruses using the technique of ELISA as screening for the detection of positive samples and the microneutralization as confirmatory test. Were analyzed a total of 400 sera by Elisa IgG from people in convalescent phase of the city of Iquitos during the years 2003 - 2007. 152 were negative and 248 were positive by Elisa IgG, of which was confirmed by microneutralization 23 sera positive for the virus Ilheus and 7 sera positive for the virus Rocio. The value of cross-reactivity for the ELISA was 87%. The results indicate the existence of neutralizing antibodies against the Ilheus virus in 5.75% of the sera analyzed and the presence of neutralizing antibodies against the Rocio virus in 1.75% of the sera. Fortunately the presence of these viruses in the city of Iquitos is not significant compared to that observed for the dengue virus (34.7%).