Šio darbo tikslas: ištirti sukatžolių ekstrakto sudėtyje esančių veikliųjų medžiagų (chlorogeno rūgšties, viteksino, izoviteksino, rutino, kvercetino, hiperozido, izokvercetino, liuteolino, ursolo rūgšties) įtaką žiurkių izoliuotų kraujagyslių lygiųjų raumenų ir endotelio funkcijai. / Thesis goal: to investigate the effect of Leonurus cardiaca herb extract active substances (flavanoids, chlorogenic and ursolic acid) to vascular function.

Made available in DSpace on 2016-03-15T14:17:05Z (GMT). No. of bitstreams: 2 2.pdf: 2354876 bytes, checksum: b870b9f5322d8473f9ec787dd8eaf90b (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2013 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Fármacos/Farmanguinhos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / As espécies do gênero Passiflora são ricas em flavonóides que apresentam atividade ansiolítica, dentre outras. P. incarnata L. é a espécie mais estudada tanto por sua composição química quanto por seus efeitos farmacológicos. Contudo, atividades biológicas semelhantes às de P. incarnata tem sido relatadas para espécies brasileiras deste gênero botânico, constituindo uma fonte alternativa para a formulação de fitoterápicos. Um estudo preliminar comparativo dos aspectos macroscópicos e microscópicos de quatro espécies nativas, P. pedata L., P. nitida Kunth e P. quadriglandulosa Rodschield, associado à morfologia da folha de P. edulis Sims descrita na Farmacopéia Brasileira, foi realizado para a avaliação de possíveis problemas na identificação da espécie de interesse, ou mesmo pela adulteração da droga vegetal proveniente de P. incarnata. Os resultados demonstraram grande diversidade morfológica entre P. pedata, P. nitida e P. quadriglandulosa, entretanto foi observada semelhança entre as folhas de P. edulis e P. incarnata, pois ambas apresentaram limbo trilobado. Não obstante, elas foram diferenciadas pela análise de suas principais características anatômicas. O objetivo deste trabalho foi desenvolver uma formulação fitoterápica contendo como ingrediente ativo extrato de P. incarnata e identificar o marcador da espécie, vitexina, segundo a legislação vigente. Amostras de extratos desta espécie, obtidas de fornecedores comerciais, foram analisadas por espectrofotometria e cromatografia a fim de identificar e quantificar o marcador. Concomitantemente, foram preparadas formulações farmacêuticas isentas de sacarose a partir destes extratos. As amostras de extratos e formulações foram processadas e analisadas por cromatografia em camada delgada. O cromatograma, após a revelação com reagente químico característico, apresentou manchas relacionadas à vitexina e outras bandas características de flavonóides. As análises obtidas por cromatografia líquida de alta e ultra eficiência (CLAE e CLUE) mostraram diferenças significativas no que tange a quantidade de amostra, sensibilidade, rapidez, delineamento dos sinais e dos respectivos espectros UV. Por meio da CLUE foi possível verificar a presença do principal marcador (vitexina, M-1 de 431 daltons) no produto contendo extratos de Passiflora e uma amostra padrão deste flavonóide. / Species of Passiflora are rich in flavonoids which have anxiolytic activity, among other activities. P. incarnata L. is the most studied species by its chemical composition and its pharmacological effects. However, biological activities similar to those described for P. incarnata have been reported to other Brazilian species of the same genus, providing an alternative source for the formulation of herbal medicines. A comparative preliminary study on macroscopic and microscopic aspects about four native species, P. pedata L., P. nitida Kunth and P. quadriglandulosa Rodschield, associated to the leaf morphology of P. edulis Sims described in the Brazilian Pharmacopoeia, was performed to evaluate possible difficulties in the identification of the species of interest, or even adulteration of the vegetal drug P. incarnata. Results showed important morphological differences among P. pedata, P. nitida and P. quadriglandulosa, however there was similarity in the trilobed lamina of P. incarnata and P. edulis leaves. On the other hand, both species can be distinguished by the analysis of its main anatomical characteristics. The aim of this work was to develop an herbal formulation containing extract of P. incarnata as active ingredient, and to identify the marker of the species, vitexin, according to actual law of Brazil. Sample extracts of P. incarnata obtained from commercial suppliers were analyzed in order to identify and quantify the marker. Concomitantly, pharmaceutical formulations free of sucrose were prepared with these extracts. Extracts and formulations were processed and analyzed by thin layer chromatography. The chromatogram, revealed by characteristic chemical reagent, showed bands of vitexin and other flavonoids. The high and ultra performance liquid chromatography (HPLC and ULPC) analysis presented significative differences about the sample amount, sensibility, quickness, peaks delineation and respective UV spectra. Using UPLC, it was possible to verify the presence of the main marker (vitexin, M-1 of 431 daltons) in the product obtained with the extracts of P. incarnata and vitexin standard.

Um método confiável e eficiente por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) foi desenvolvido para o controle de qualidade de extratos de P. incarnata. O método desenvolvido inclui uma estratégia original para identificação preliminar da espécie e operação simples baseada no modo de eluição isocrático. Este método foi validado para os flavonoides C-glicosilados vitexina e isovitexina, considerados marcadores da espécie e, aplicado na análise qualitativa e quantitativa de quatorze formulações comerciais com insumo vegetal composto exclusivamente de P. incarnata As análises foram realizadas com uma coluna C18 e à temperatura ambiente. Os comprimentos de onda de detecção foram 330 (vitexina e isovitexina) e 254 nm (rutina, marcador de contaminação). O método analítico foi linear para vitexina no intervalo de 5 - 40 ug/mL e para isovitexina no intervalo 5 - 60 ug/mL. Das quatorze amostras analisadas, oito eram em forma farmacêutica líquida (FFL) e seis em forma farmacêutica sólida (FFS). Seis amostras comerciais em FFL e seis amostras em FFS apresentaram perfil compatível com P. incarnata. As concentrações obtidas para as FFL foram vitexina 17,87 - 29,13 ug/mL e isovitexina 27,47 - 65,07 ug/mL, respectivamente. As FFS apresentaram concentração de vitexina entre 10,0 - 32,26 ug/mL e isovitexina 36,16 - 100,83 ug/mL. O método demonstrou ser confiável e eficiente para análise qualitativa e quantitativa de vitexina e isovitexina nos extratos; por esta razão foi considerado viável para a prática diária do controle de qualidade. A análise por cromatografia de líquida de alta eficiência acoplada com detector de espectroscopia de massas (CLAE-EM) foi realizada para investigar os principais fitoconstituintes, sete picos do extrato puderam ser resolvidos; e, forneceram fortes evidências sobre a composição química do extrato de P. incarnata. / A reliable and efficient method of high-performance liquid chromatography was developed for the quality control of Passiflora incarnata extracts. The quality control includes an original preliminary identification of this species and simple operation process based on isocratic elution. This method was validated for vitexin and isovitexin, C-glycoside flavonoids, considered markers of this species and applied to qualitative and quantitative analysis of fourteen commercial herbal medicines of P. incarnata extracts. Analysis was achieved on reversed-phase C18 column at ambient temperature. The wavelengths used for detection were 330 nm (vitexin and isovitexin) and 254 nm (rutin, a marker of contamination). Method was linear over vitexin concentration range of 540 g/mL and isovitexin 560 g/mL. Among of fourteen samples, eight were in liquid dosage form (LDF) and six in solid dosage form (SDF). Six commercial samples in LDF and six samples in SDF showed profile compatible with P. incarnata. Concentrations were determined for LDF vitexin 17.87  29.13 g/mL and isovitexin 27.47  65.07 g/mL. While SDF samples showed vitexin concentration range 10.00  32.26 g/mL and isovitexin 36.16  100.83 g/mL. The method demonstrated to be reliable and efficient for assay and qualitative analysis of vitexin and isovitexin in P. incarnata extracts; for that reason for practical application on quality control. Analysis were performed through high-performance liquid chromatography coupled with mass spectrometer detector (LC/MS) to investigate the main phytoconstituents, seven peaks from P. incarnata extract could be resolved; and provided strong evidences about the chemical composition of extracts.

Um método confiável e eficiente por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) foi desenvolvido para o controle de qualidade de extratos de P. incarnata. O método desenvolvido inclui uma estratégia original para identificação preliminar da espécie e operação simples baseada no modo de eluição isocrático. Este método foi validado para os flavonoides C-glicosilados vitexina e isovitexina, considerados marcadores da espécie e, aplicado na análise qualitativa e quantitativa de quatorze formulações comerciais com insumo vegetal composto exclusivamente de P. incarnata As análises foram realizadas com uma coluna C18 e à temperatura ambiente. Os comprimentos de onda de detecção foram 330 (vitexina e isovitexina) e 254 nm (rutina, marcador de contaminação). O método analítico foi linear para vitexina no intervalo de 5 - 40 ug/mL e para isovitexina no intervalo 5 - 60 ug/mL. Das quatorze amostras analisadas, oito eram em forma farmacêutica líquida (FFL) e seis em forma farmacêutica sólida (FFS). Seis amostras comerciais em FFL e seis amostras em FFS apresentaram perfil compatível com P. incarnata. As concentrações obtidas para as FFL foram vitexina 17,87 - 29,13 ug/mL e isovitexina 27,47 - 65,07 ug/mL, respectivamente. As FFS apresentaram concentração de vitexina entre 10,0 - 32,26 ug/mL e isovitexina 36,16 - 100,83 ug/mL. O método demonstrou ser confiável e eficiente para análise qualitativa e quantitativa de vitexina e isovitexina nos extratos; por esta razão foi considerado viável para a prática diária do controle de qualidade. A análise por cromatografia de líquida de alta eficiência acoplada com detector de espectroscopia de massas (CLAE-EM) foi realizada para investigar os principais fitoconstituintes, sete picos do extrato puderam ser resolvidos; e, forneceram fortes evidências sobre a composição química do extrato de P. incarnata. / A reliable and efficient method of high-performance liquid chromatography was developed for the quality control of Passiflora incarnata extracts. The quality control includes an original preliminary identification of this species and simple operation process based on isocratic elution. This method was validated for vitexin and isovitexin, C-glycoside flavonoids, considered markers of this species and applied to qualitative and quantitative analysis of fourteen commercial herbal medicines of P. incarnata extracts. Analysis was achieved on reversed-phase C18 column at ambient temperature. The wavelengths used for detection were 330 nm (vitexin and isovitexin) and 254 nm (rutin, a marker of contamination). Method was linear over vitexin concentration range of 540 g/mL and isovitexin 560 g/mL. Among of fourteen samples, eight were in liquid dosage form (LDF) and six in solid dosage form (SDF). Six commercial samples in LDF and six samples in SDF showed profile compatible with P. incarnata. Concentrations were determined for LDF vitexin 17.87  29.13 g/mL and isovitexin 27.47  65.07 g/mL. While SDF samples showed vitexin concentration range 10.00  32.26 g/mL and isovitexin 36.16  100.83 g/mL. The method demonstrated to be reliable and efficient for assay and qualitative analysis of vitexin and isovitexin in P. incarnata extracts; for that reason for practical application on quality control. Analysis were performed through high-performance liquid chromatography coupled with mass spectrometer detector (LC/MS) to investigate the main phytoconstituents, seven peaks from P. incarnata extract could be resolved; and provided strong evidences about the chemical composition of extracts.

Um método confiável e eficiente por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) foi desenvolvido para o controle de qualidade de extratos de P. incarnata. O método desenvolvido inclui uma estratégia original para identificação preliminar da espécie e operação simples baseada no modo de eluição isocrático. Este método foi validado para os flavonoides C-glicosilados vitexina e isovitexina, considerados marcadores da espécie e, aplicado na análise qualitativa e quantitativa de quatorze formulações comerciais com insumo vegetal composto exclusivamente de P. incarnata As análises foram realizadas com uma coluna C18 e à temperatura ambiente. Os comprimentos de onda de detecção foram 330 (vitexina e isovitexina) e 254 nm (rutina, marcador de contaminação). O método analítico foi linear para vitexina no intervalo de 5 - 40 ug/mL e para isovitexina no intervalo 5 - 60 ug/mL. Das quatorze amostras analisadas, oito eram em forma farmacêutica líquida (FFL) e seis em forma farmacêutica sólida (FFS). Seis amostras comerciais em FFL e seis amostras em FFS apresentaram perfil compatível com P. incarnata. As concentrações obtidas para as FFL foram vitexina 17,87 - 29,13 ug/mL e isovitexina 27,47 - 65,07 ug/mL, respectivamente. As FFS apresentaram concentração de vitexina entre 10,0 - 32,26 ug/mL e isovitexina 36,16 - 100,83 ug/mL. O método demonstrou ser confiável e eficiente para análise qualitativa e quantitativa de vitexina e isovitexina nos extratos; por esta razão foi considerado viável para a prática diária do controle de qualidade. A análise por cromatografia de líquida de alta eficiência acoplada com detector de espectroscopia de massas (CLAE-EM) foi realizada para investigar os principais fitoconstituintes, sete picos do extrato puderam ser resolvidos; e, forneceram fortes evidências sobre a composição química do extrato de P. incarnata. / A reliable and efficient method of high-performance liquid chromatography was developed for the quality control of Passiflora incarnata extracts. The quality control includes an original preliminary identification of this species and simple operation process based on isocratic elution. This method was validated for vitexin and isovitexin, C-glycoside flavonoids, considered markers of this species and applied to qualitative and quantitative analysis of fourteen commercial herbal medicines of P. incarnata extracts. Analysis was achieved on reversed-phase C18 column at ambient temperature. The wavelengths used for detection were 330 nm (vitexin and isovitexin) and 254 nm (rutin, a marker of contamination). Method was linear over vitexin concentration range of 540 g/mL and isovitexin 560 g/mL. Among of fourteen samples, eight were in liquid dosage form (LDF) and six in solid dosage form (SDF). Six commercial samples in LDF and six samples in SDF showed profile compatible with P. incarnata. Concentrations were determined for LDF vitexin 17.87  29.13 g/mL and isovitexin 27.47  65.07 g/mL. While SDF samples showed vitexin concentration range 10.00  32.26 g/mL and isovitexin 36.16  100.83 g/mL. The method demonstrated to be reliable and efficient for assay and qualitative analysis of vitexin and isovitexin in P. incarnata extracts; for that reason for practical application on quality control. Analysis were performed through high-performance liquid chromatography coupled with mass spectrometer detector (LC/MS) to investigate the main phytoconstituents, seven peaks from P. incarnata extract could be resolved; and provided strong evidences about the chemical composition of extracts.