Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Grupo DASA / Melioidose à uma doenÃa infecciosa grave causada por Burkholderia pseudomallei, um bacilo Gram-negativo encontrado no solo e na Ãgua. A doenÃa à endÃmica no sudeste asiÃtico e hiperendÃmica no norte da AustrÃlia, onde a letalidade permanece com uma taxa de 21%. No Brasil, à considerada uma doenÃa emergente desde marÃo de 2003. Nos Ãltimos oito anos, 12 casos ocorreram no Estado do Cearà e um notificado pelo Governo holandÃs, por se tratar de um turista que morreu de melioidose, apÃs visita ao CearÃ. Em razÃo da ocorrÃncia clÃnica de melioidose e do isolamento de B. pseudomallei no ambiente do Estado do CearÃ, este trabalho objetivou estudar as cepas clÃnicas e ambientais de B. pseudomallei isoladas no Estado no perÃodo de 2003 a 2011, visando a identificar as cepas por mÃtodos fenotÃpicos e moleculares, determinar o perfil de sensibilidade contra cinco agentes antimicrobianos (amoxicilina/clavulanato, ceftazidima, imipenem, doxicilina e sulfametoxazol/trimetoprim), realizar a genotipagem das cepas pela amplificaÃÃo aleatÃria de DNA polimÃrfico - Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD), detectar o gene de virulÃncia Type Three Secretion System (TTSS), alÃm de avaliar os aspectos clÃnico-epidemiolÃgicos que caracterizaram a emergÃncia desta doenÃa no Brasil. Todas as 20 cepas (dez clÃnicas e dez ambientais) de B. pseudomallei foram precisamente identificadas tanto pela metodologia VITEK2 quanto pelo sequenciamento da regiÃo 16S do DNA, mostraram resultado negativo no teste de assimilaÃÃo de L-arabinose, e exibiram-se positivas para a detecÃÃo do gene de virulÃncia TTSS. As concentraÃÃes inibitÃrias mÃnimas (CIMs), obtidas por microdiluiÃÃo em caldo MÃeller-Hinton, demonstraram que todos os isolados (100%) foram sensÃveis ao imipenem, à doxicilina e ao sulfametoxazol- trimetoprim, no entanto, para amoxicilina/clavulanato e ceftazidima, a sensibilidade foi de 80 e 90%, respectivamente. A tÃcnica de RAPD evidenciou uma variabilidade genÃtica de 63% entre as cepas de B. pseudomallei oriundas do Estado do CearÃ, as quais foram agrupadas em trÃs clusters diferentes. Este trabalho decerto contribuirà para o conhecimento das caracterÃsticas fenotÃpicas e genotÃpicas das cepas de B. pseudomallei isoladas no Cearà e da atualizaÃÃo da vigilÃncia epidemiolÃgica dos casos de melioidose ocorridos no Estado, alÃm de contribuir para a conscientizaÃÃo dos ÃrgÃos de saÃde competentes para a inclusÃo do Cearà como zona endÃmica para esta enfermidade. / Melioidosis is a serious infectious disease caused by Burkholderia pseudomallei, a Gram negative rod, commonly found in soil and water. The disease is endemic in Southeastern Asia and hyperendemic in Northern Australia. Despite the initiation of empiric therapy, mortality remains at 21% in patients with melioidosis in Australia. In Brazil, it is considered an emerging disease, since April 2003, when it was first diagnosed in Ceara, Northeastern Brazil. In the last eight years, thirteen cases were reported, twelve local cases and one case reported by the Dutch government because of a tourist who died of melioidosis after a visit to Ceara. Considering the occurrence of melioidosis in CearÃ, this work aimed at studying these clinical and environmental strains of Burkholderia pseudomallei isolated from Cearà from 2003 to 2011, focusing on the bacterial and molecular identification; determining the susceptibility profile against five antimicrobial agents (amoxicillin/clavulanate, ceftazidime, imipenem, doxycycline and trimethoprim/sulfamethoxazole); genotyping through Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD), detecting the virulence gene Type Three Secretion System (TTSS); and analyzing epidemiological and clinical aspects that characterized the emergence of this disease in Brazil. All 20 strains (10 clinical and 10 environment) from B. pseudomallei were accurately identified by both VITEK2  and sequencing of the 16S DNA, showed to be negative for the assimilation of L-arabinose and were positive results for the detection of the virulence gene TTSS. The minimum inhibitory concentrations (MICs) obtained through microdilution in MÃeller-Hinton broth, showed that all (100%) isolates were sensitive to imipenem, doxycycline and trimethoprim-sulfamethoxazole, however, the susceptibility rate to amoxicillin/clavulanate and ceftazidime was of 80 and 90%, respectively, with no differences between clinical and environmental strains. RAPD-PCR showed a genetic relatedness of 63% among the B. pseudomallei strains from the State of CearÃ, which were grouped in two different clusters. This work will contribute to the knowledge of phenotypic and genotypic characteristics of B. pseudomallei strains isolated in Cearà and the update of epidemiological surveillance of melioidosis cases in the state, also contribute to the awareness of agencies health authority for inclusion of Cearà State as an endemic area for this disease.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:5007 |
| Date | 04 November 2011 |
| Creators | Tereza de Jesus Pinheiro Gomes Bandeira |
| Contributors | Josà JÃlio Costa Sidrim, Marcos FÃbio Gadelha Rocha, Raimunda SÃmia Nogueira Brilhante |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Microbiologia MÃdica, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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