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Previous issue date: 2015-03-31 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Hyaluronic acid (HA) and polymethylmethacrylate (PMMA) are the most used dermal fillers nowadays. The indiscriminate use of such substances has brought to light unwanted adverse effects. Thus biocompatibility studies are a necessity, since the scientific literature does not clarify the etiology of these effects. The current research has evaluated cytotoxic, genotoxic and mutagenic responses from distinct in vitro tests performed in an independent manner. The cytotoxicity potential of the materials was evaluated by the induction of an inhibition halo in a solid yeast cultures. To conduce a preliminary view, the dilutions ranging from 10-2 to 10-5 were verified. For quantitative test, the colonies were counted to estimate the CFU/mL (colony-forming units per milliliter) values. Halo inhibition test showed that only silicone, used as a positive control, was capable of inducing cytotoxicity in this yeast. The preliminary experiment also indicated silicone and HA 16 mg/mL as a cellular toxicity inductor material. Quantitative test indicated that HA 20 mg/mL and 0.1mL volume inhibited cell proliferation (ANOVA, Tukey test, p? 0.05). PMMA was dosedependent to 2 and 10% concentrations (Tukey test, p? 0.05). 30% PMMA showed cell proliferation inhibition similar to the negative control. Silicone proved to inhibit S. cerevisiae cell proliferation (Tukey test, p? 0.05). In a second investigation, in Chinese hamster lung fibroblasts (V79 cells), the cytotoxic, genotoxic and mutagenic potentials of 20 mg/mL HA and 30% PMMA were determined. For testing these effects, clonogenic survival, comet and micronucleus assay were performed. HA and PMMA were able to decrease the colony formation when cultures were exposed to compounds by 24 h followed by 6 days in drug-free media. In addition, no genotoxic effects were detected in the 3 or 24 h of exposure to HA or PMMA. In the same manner, both dermal fillers did not induce increase in the micronucleus frequency in binucleated cells. Taken together, these results suggest that (1) 20 mg/mL HA and 10% PMMA are cytotoxicity inductors for the eukaryotic model S. cerevisiae; (2) 20 mg/mL HA and 30% PMMA have a weak cytotoxic activity in V79 cells; (3) the tested substances do not cause detectable DNA damage and chromosome alterations in V79 cells. / O ?cido hialur?nico (AH) e o polimetilmetacrilato (PMMA) s?o os materiais de preenchimento est?tico mais empregados na atualidade. Seu uso indiscriminado tem evidenciado efeitos indesej?veis nos usu?rios destes produtos, tornando necess?rio o estudo da biocompatibilidade dos mesmos, uma vez que a literatura cient?fica dispon?vel n?o esclarece, de forma conclusiva, a etiologia das rea??es adversas que podem se desenvolver a partir da sua inje??o. A presente pesquisa avaliou a resposta citot?xica, genot?xica e mutag?nica, a partir de testes in vitro distintos e efetuados de maneira independente. Utilizando a levedura Saccharomyces cerevisiae averiguou-se a citotoxicidade do AH (16 mg/mL e 20 mg/mL) e do PMMA (2%, 10% e 30%), por meio de experimentos qualitativos e quantitativos. O primeiro procedeu-se pela indu??o de halo de inibi??o. Para conduzir uma an?lise preliminar, as dilui??es 10-2 a 10-5 foram verificadas. No teste quantitativo, as col?nias formadas foram contadas em UFC/mL (unidades formadoras de col?nias por mililitro). Os dados observados em levedura demonstraram que no teste do halo de inibi??o, o silicone, utilizado como controle positivo, foi o ?nico material capaz de induzir citotoxicidade. O exame preliminar tamb?m indicou o silicone e o AH 16 mg/mL como indutores de toxicidade celular. Na an?lise quantitativa, o AH 20 mg/mL no volume de 0,1 mL inibiu a prolifera??o celular (ANOVA, teste de Tukey, p? 0,05). O PMMA apresentou resposta dose-dependente nas concentra??es de 2% e 10% (teste de Tukey, p? 0,05). Por outro lado, o PMMA 30% exibiu n?veis de crescimento celular semelhantes ao controle negativo. O silicone confirmou o impedimento de prolifera??o celular em S. cerevisiae (teste de Tukey, p? 0,05). Numa segunda investiga??o, em cultura de fibroblastos pulmonares de hamster Chin?s (linhagem V79), foram determinados os potenciais de citotoxicidade, genotoxicidade e mutagenicidade do AH 20 mg/mL e do PMMA 30%. Para esses par?metros, a abordagem envolveu os ensaios clonog?nico, cometa e micron?cleos. O AH e o PMMA foram capazes de diminuir o crescimento de col?nias quando as culturas foram expostas aos produtos por 24 h, seguidos por 6 dias em meio com aus?ncia das drogas. N?o foram detectados efeitos genot?xicos em 3 h ou 24 h de exposi??o ao AH ou PMMA. Da mesma maneira, ambas as subst?ncias n?o induziram aumento na frequ?ncia de micron?cleos em c?lulas binucleadas. Os resultados obtidos permitem sugerir que (1) o AH 20 mg/mL e o PMMA 10% s?o indutores de citotoxicidade em modelo eucarioto S. cerevisiae; (2) o AH e o PMMA possuem fraca citotoxicidade sobre a linhagem V79; (3) os materiais testados n?o provocam danos no DNA e altera??es cromoss?micas detect?veis.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede2.pucrs.br:tede/5981 |
| Date | 31 March 2015 |
| Creators | Borghetti, Ruchielli Loureiro |
| Contributors | Figueiredo, Maria Antonia Zancanaro de |
| Publisher | Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul, Programa de P?s-Gradua??o em Odontologia, PUCRS, Brasil, Faculdade de Odontologia |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da PUC_RS, instname:Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul, instacron:PUC_RS |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | -8096554818733665164, 600, 600, 600, 600, 4673435736271820140, -2070498469879244349, 2075167498588264571 |
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