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Comparação por análise molecular da diversidade bacteriana da saliva de pacientes com diferentes índices de higiene bucal

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Previous issue date: 2009-08-26 / The complex microbiota of the oral cavity has been intensively studied and saliva is
characterized by microorganisms which colonize different regions of mouth, such as tongue,
supragengival and subgingival biofilm. Considering this, the purpose of this study was to
evaluate the bacterial diversity of the saliva of patients with different levels of oral hygiene
according to the Silness, Löe index. In this research, two genomic libraries of saliva source
from 15 patients each were constructed. The pooled samples differ in the average index of
Silness, Löe being considered as high or low index within the rate 1.0 to 3.0 and 0 to 0.5,
respectively. The DNA saliva was extracted by phenol / chloroform method and 16S rRNA
gene for the microorganisms of each sample were amplified and cloned. The sequences
obtained were compared to those from sequences of the GenBank NCBI and RDP. The
library resultant from saliva of patients with high level of dental biofilm showed 23 OTUs
grouped as five known genus: Streptococcus, Granulicaella, Gemella, Peptostreptococcus
and Veillonella besides 33.3% of uncultured bacteria. The Library made from saliva of
patients with low level of dental biofilm, was significantly different from its counterpart (p =
0.000) and was composed by 42 OTUs, distributed among 11 known genus: Streptococcus,
Granulicaella, Gemella, Veillonella, Oribacterium, Haemophilus, Escherichia, Neisseria,
Prevotella, Capnocytophaga, Actinomyces, and 24.87% of uncultured bacteria. The genus
Streptococcus was the more prevalent in the two libraries, constituting 79.08% of the first and
73.64% the second. In conclusion, patients with low dental biofilm index have saliva with
higher bacterial diversity than patients with high dental biofilm index, and despite most
uncultivated species aggregate with Steptococcus, they still are new and unknown microorganisms / A complexa microbiota da cavidade bucal tem sido intensivamente estudada e a saliva
destaca-se por apresentar microrganismos de diferentes regiões, como a língua, biofilme
subgengival e supragengival. Diante disto, o objetivo do presente estudo foi avaliar a
diversidade bacteriana da saliva de pacientes com diferentes índices de higiene bucal e para
isto, foram construídas duas bibliotecas genômicas da saliva, que foram constituídas por
amostras de 15 pacientes cada uma, com a média de índice de biofilme de Silness; Löe
diferenciado, sendo a primeira com índice de 1,0 a 3,0 (denominada alto índice) e a segunda,
entre 0 a 0,5 (denominada baixo índice). O DNA da saliva foi extraído pelo método
fenol/clorofórmio e o gene 16S rRNA para cada biblioteca foi amplificado e clonado. As
sequências obtidas foram comparadas com aquelas armazenadas no GenBank do NCBI e
RDP. A biblioteca composta pela saliva de pacientes com Alto índice de biofilme dental
apresentou cinco Gêneros conhecidos: Streptococcus, Granulicaella, Gemella, Veillonella e
Peptostreptococcus e 33,3% de bactérias não-cultivadas, agrupados em 23 OTUs. A
Biblioteca, composta pela saliva de pacientes com Baixo índice de biofilme dental, foi
diferente siguinificativamente da primeira (p=0,000) e foi composta de 42 OTUs, distribuídas
em 11 Gêneros conhecidos: Streptococcus, Granulicaella, Gemella, Veillonella,
Oribacterium, Haemophilus, Escherichia, Neisseria, Prevotella, Capnocytophaga,
Actinomyces, alem de 24,87% de bactérias não-cultivadas. O Gênero Streptococcus foi o
mais prevalente nas duas bibliotecas, constituindo 79,08% da primeira e 73,63% da segunda.
Conclui-se que existe maior diversidade bacteriana na saliva de pacientes com Baixo índice
de biofilme dental em relação à pacientes com Alto índice de biofilme dental e que apesar da
maioria das espécies não-cultivadas agruparem-se com os Streptococcus, ainda contituem-se
de microrganismos novos e desconhecidos

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:http://localhost:tede/3064
Date26 August 2009
CreatorsPereira, Juliana Vianna
ContributorsAstolfi Filho, Spartaco, Leomil, Luciana
PublisherUniversidade Federal do Amazonas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, UFAM, BR, Instituto de Ciências Biológicas
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM, instname:Universidade Federal do Amazonas, instacron:UFAM
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
Relation32215883775770440, 600

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