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Previous issue date: 2014-11-18 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Os cisteinil-leucotrienos (CisLT) são importantes mediadores da asma, que induzem broncoconstrição, secreção de muco e efeitos regulatórios no infiltrado de populações leucocitárias, especialmente de eosinófilos. A asma sensível à aspirina, ou induzida por aspirina (AIA), tem sido vista como resultante de um aumento da produção de CisLT conseqüente ao desvio do ácido araquidônico para a via da 5-lipoxigenase (5-LO), na ausência de ciclo-oxigenase (COX) ativa. Como os inibidores de COX, aspirina e indometacina, aumentam a eosinopoiese dependente de IL-5 em cultura de medula óssea murina, nós avaliamos a participação dos CisLT no mecanismo de ação destes moduladores em cultura líquida de medula óssea. As culturas foram estabelecidas com medula óssea de camundongos BALB/c, C57BL/6 e deficientes do receptor de CisLT do tipo 1 (CysLT1R - em background BALB/c e C57BL/6) na presença de IL-5, por 7 dias. CisLTs (LTC4, LTD4 and LTE4) aumentaram a produção de eosinófilos com eficiência comparável (efeito máximo entre 10-7 e 10-8M). Estes efeitos foram comparáveis, tanto nos números como na morfologia dos eosinófilos, aos obtidos com aspirina (10-8M) e indometacina (10-7M). O inibidor da proteína ativadora de 5-lipoxigenase (FLAP), MK-886, bloqueou o efeito de ambas, aspirina e indometacina, mas não dos CisLT. Por outro lado, os antagonistas competitivos de CysLT1R, MK-571 e Montelukast, bloquearam os efeitos do LTD4, da indometacina e da aspirina
Todos os três agentes foram capazes de proteger eosinófilos em desenvolvimento da apoptose induzida por Prostaglandina E2 (PGE2). A medula óssea de camundongos CysLT1R (-/-) não respondeu ao LTD4, à indometacina e à aspirina. A capacidade dos inibidores de COX de proteger eosinófilos em desenvolvimento dos efeitos do produto pré-formado da COX, PGE2, indicam que estas drogas atuam pela promoção da produção de CisLT, mais do que pelo bloqueio à sintese de PGE2. Além disso, o efeito citoprotetor é abolido se a medula óssea é incubada com inibidores de COX associados com o MK-886 e Montelukast. Em conjunto, estes resultados sugerem que, na presença dos inibidores de COX, CisLT são formados e promovem eosinopoiese atuando em CisLT1R. CisLT igualmente medeiam os efeitos citoprotetores dos inibidores de COX. O mecanismo de ação dos inibidores de COX na eosinopoiese murina é, portanto, basicamente semelhante ao mecanismo de desvio proposto para AIA / Cysteinyl-Leukotrienes (CysLT) are impor
tant mediators of asthma, which
induce bronchoconstriction, mucus secretion
and a variety of regulatory effects on
the infiltrating leukocyte populations,
especially eosinophils. Increased CysLT
production resulting from the
shunting of arachidonic acid towards the 5-lipoxygenase
(5-LO) pathway in the absence of acti
ve cyclooxygenase (COX) is a one mechanism
proposed to explain the fisiopatology of Aspiri
n-sensitive, or aspirin-induced, asthma
(AIA). Because the COX inhibitors, aspi
rin and indomethacin, increase Interleucin-5-
dependent eosinophilopoiesis in murine bone-ma
rrow culture, we evaluated the
participation of CysLT in the
mechanism of action of both agents in this model. Liquid
bone-marrow cultures were establis
hed from BALB/c, C57BL/6 and CysLT
1
R
deficient mice (in both the BALB/c and C57B
L/6 genetic background) in the presence
of interleucin-5, for 7 days. CysLTs (LTC
4
, LTD
4
and LTE
4
) increased eosinophil
production (maximum effect at 10
-7
-10
-8
M). Their effects were comparable, in number
as well as morphology of the eosi
nophils, to those of aspirin (10
-8
M) and
indomethacin (10
-7
M). The 5-lipoxygenase activating pr
otein (FLAP) inhibitor, MK-
886, blocked the effects of both aspiri
n and indomethacin, but not those of the
CysLT. On the other hand, t
he competitive antagonists of t
he CysLT receptor type 1
(CysLT
1
R), MK-571 and Montelukast, bl
ocked the effects of LTD
4
, indomethacin and
aspirin. All three agents were capable of
protecting developing eosinophils from the
apoptosis-inducing actions of prostaglandin E
2
(PGE
2
). Bone-marrow from CysLT
1
R
deficient mice did not respond to LTD
4
, indomethacin or aspirin. The ability of COX
inhibitors to protect developing eosinophils
from the effects
of a preformed COX
derivative (PGE
2
) further indicates that these
drugs act by promoting CysLT
production rather than preventing synthesis of PGE
2
. Furthermore, this cytoprotective
effect is abolished if bone-marrow is incubated
with COX inhibitors in association with
FLAP or CysLT
1
R inhibitors, or with LTD
4
in association with CysLT
1
R inhibitors.
Taken together, these findings suggest that,
in the presence of COX inhibitors,
CysLT are formed which promote eosinophil
opoiesis by acting on high affinity
CysLT
1
R. CysLT equally mediate the cytoprotecti
ve effects of COX inhibitors. The
mechanism of action of COX inhibitors
on murine eosinophilopoiesis is, therefore,
similar in its essential features to
the shunting mechanism, one of mechanisms
involved with fisiopatology of AIA.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/9097 |
| Date | January 2007 |
| Creators | Pinto, Tulio Queto de Souza |
| Contributors | Machado, Marcelo Pelajo, Assreuy, Jamil, Benjamim, Claudia Farias, Elsas, Maria ignez Capella Gaspar, Elsas, Pedro Pedro |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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