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Previous issue date: 2017-02-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Treatment with antimonials has several limitations, among them the progressive emergence of parasites resistant to these drugs. In this situation, recent evidence suggests that the parameters antimonial resistance and virulence may be correlated in Leishmania sp. have been published in the literature. In this context, this work aimed to investigate whether there is a correlation between virulence and resistance to trivalent antimonial (SbIII) from two clinical isolates of Leishmania (Viannia) braziliensis, named AF and JCTS. Promastigote forms of these parasites resistant to SbIII were selected, obtaining cultures with a resistance level corresponding to 14 and 13 times the wild-type IC50 (sensitive to SbIII)
for the isolates AF and JCTS, respectively. When analyzing the stability of the phenotype of acquired resistance, it was verified that both clinical isolates presented an unstable profile, with progressive reversion of resistance after successive passages in drug absence. In morphological analysis, it was observed that two cultures resistant to SbIII presented higher amount of promastigote forms with metacyclic characteristics when compared to sensitive cultures. However, the growth in culture medium
was similar for sensitive and resistant cultures of both clinical isolates. In stationary phase of growth,
the percentage of serum that caused 50% of cellular lysis (EC50) of the AF culture sensitive to SbIII was
2.3%, whereas the corresponding drug resistant culture presented EC50 9.4%. Similarly, the sensitive
and SbIII resistant JCTS cultures showed EC50 2.5% and 18.4%, respectively. Thus, cultures resistant
to SbIII from both clinical isolates were more resistant to complement-mediated lysis than drug-sensitive
cultures SbIII resistant cultures also showed greater in vitro virulence on murine macrophages when
compared to the corresponding sensitive cultures. The infection rate determined for sensitive and
resistant SbIII AF was 260 and 593. For sensitive and resistant SbIII JCTS was 115 and 207,
respectively. In the model of infection in vivo in swiss mice, no significant virulence was evident in any
culture of L. braziliensis. Thus, we conclude that there is a correlation between parameters of in vitro
virulence and resistance to SbIII in L. braziliensis. / O tratamento com os antimoniais possui várias limitações, dentre elas o crescente surgimento de
parasitos resistentes a estas drogas. Agravando esta situação, recentes evidências de que os parâmetros
resistência a antimoniais e virulência possam estar correlacionados em Leishmania sp. têm sido
publicadas na literatura. Dentro deste contexto, este trabalho objetivou investigar se existe correlação
entre os parâmetros de virulência e resistência ao antimonial trivalente (SbIII) a partir de dois isolados
clínicos de Leishmania (Viannia) braziliensis denominados AF e JCTS. Foram selecionadas formas
promastigotas destes parasitos resistentes ao SbIII, obtendo-se culturas com um nível de resistência
correspondente a 14 e 13 vezes a IC50 da cultura selvagem (sensível ao SbIII) para os isolados AF e
JCTS, respectivamente. Ao analisar a estabilidade do fenótipo de resistência adquirido, verificou-se que
ambos os isolados clínicos apresentaram um perfil instável, com progressiva reversão da resistência
após sucessivos repiques na ausência da droga. Em análise morfológica, foi possível observar que as
duas culturas resistentes ao SbIII apresentaram maior quantidade de formas promastigotas com
características de metacíclicas quando comparado com as culturas sensíveis. Contudo, o perfil de
crescimento em meio de cultivo foi semelhante para as culturas sensíveis e resistentes de ambos os
isolados clínicos. Em fase estacionária de crescimento, a porcentagem de soro que causou 50% de lise
celular (EC50) da cultura AF sensível ao SbIII foi de 2,3%, enquanto que a correspondente cultura
resistente à droga apresentou EC50 de 9,4%. De modo semelhante, as culturas JCTS sensível e resistente
ao SbIII apresentaram EC50 de 2,5% e 18,4%, respectivamente. Assim, as culturas resistentes ao SbIII,
de ambos os isolados clínicos, foram mais resistentes à lise mediada pelo sistema complemento do que
as culturas sensíveis à droga. As culturas resistentes ao SbIII também apresentaram maior virulência in
vitro sobre macrófagos murinos quando comparadas às correspondentes culturas sensíveis. O índice de
infecção determinado para AF sensível e resistente ao SbIII foi de 260 e 593. Para JCTS sensível e
resistente ao SbIII foi de 115 e 207, respectivamente. No modelo de infecção in vivo em camundongos
suíços não foi evidenciada virulência significativa em nenhuma das culturas de L. braziliensis. Dessa
forma, conclui-se que há uma correlação entre parâmetros de virulência in vitro e resistência ao SbIII
em L. braziliensis.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede.biblioteca.ufpb.br:tede/9398 |
| Date | 16 February 2017 |
| Creators | Cordeiro, Laísa Vilar |
| Contributors | Oliveira, Márcia Rosa de |
| Publisher | Universidade Federal da Paraíba, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular, UFPB, Brasil, Biologia Celular e Molecular |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFPB, instname:Universidade Federal da Paraíba, instacron:UFPB |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 8198246930096637360, 600, 600, 600, 600, -3980196097130618266, -1634559385931244697, 2075167498588264571 |
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