As espécies da família Annonaceae são amplamente utilizadas na medicina popular para diversos fins terapêuticos. Pesquisas têm demonstrado que o marolo (Annona crassiflora Mart.) contém muitas classes de fitoquímicos biologicamente ativos. Neste contexto, este estudo teve por objetivo realizar as análises fitoquímicas e avaliar as atividades antimicrobianas, leishmanicidas, antioxidantes e antidiabéticas do extrato hidroetanólico 70% (v/v), das frações hidroetanólicas e do extrato acetato de etila. A obtenção do extrato hidroetanólico 70% (v/v) ocorreu por percolação, às frações hidroetanólicas por cromatografia em coluna (Sephadex LH-20) e o extrato acetato de etila por maceração. As folhas de Annona crassiflora Mart foram o material de escolha para esse estudo. Inicialmente, realizou-se uma triagem fitoquímica preliminar, por meio da Cromatografia em Camada Delgada, tanto dos extratos como das frações, que permitiram a detecção de compostos como: alcaloides, flavonoides, taninos, terpenos, ácidos fenólicos e catequinas. Posteriormente, os extratos e as frações foram analisados em espectrômetro de massas, no modo full scan negativo e positivo, podendo sugerir alguns constituintes químicos, baseando-se na massa molecular e nos mecanismos de fragmentação propostos pela literatura, como os flavonoides, ácidos fenólicos, procianidinas e alcaloides. As análises químicas quantitativas demonstraram que os teores de fenóis no extrato seco hidroetanólico 70% (v/v) (262,02 ± 0,20 mg EAG/g) foram superiores à concentração obtida nas frações hidroetanólicas. Os teores de flavonoides também foram superiores no extrato hidroetanólico 70% (v/v) (27,56 ± 0,40 mg EQ/g). Nas avaliações da atividade antioxidante observou-se que o pontecial das frações hidroetanólicas demonstraram resultados mais significativos em relação ao extrato hidroetanólico e acetato de etila, sendo que a fração hidroetanólica FHsdx2: 12-17 apresentou os melhores resultados. A atividade antioxidante in vivo foi realizada pelo método da peroxidação lipídica, no homogeneizado renal e hepático, através da determinação das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico. A administração do extrato hidroetanólico 70% (v/v) reduziu a peroxidação lipídica no fígado e rins de animais tratados. A análise da atividade antimicrobiana revelou que o extrato hidroetanólico 70% (v/v) teve menores valores de concentração inibitória mínima (MIC) obtidos para Candida albicans (7,81 µg.mL-1), Candida tropicali (15,62 µg.mL-1), Candida glabrata (3,90 µg.mL-1) e Candida parapsilosis (7,81 µg.mL-1). A Candida krusei foi mais susceptível a fração hidroetanólica FHsdx2: 70-104, apresentando MIC de 3,90 µg.mL-1. Para avaliar o possível efeito da espécie Annona crassiflora em ratos diabéticos, determinou-se os níveis glicêmicos, as concentrações de frutosamina, uréia, creatinina, ASL e ALT em amostras de soro de animais tratados com 300 mg/kg do extrato hidroetanólico 70% (v/v). Essas análises bioquímicas foram realizadas em aparelho automatizado Humanstar 80. Com base nos resultados obtidos, pode-se avaliar que o a administração do extrato, conforme o protocolo adotado, não alterou os parâmetros bioquímicos analisados no soro de ratos normais e diabéticos. A atividade leishmanicida foi realizada utilizando placas de 96 poços. Na atividade leishmanicida, o extrato acetato de etila apresentou-se ativo contra as formas promastigotas e amastigotas de Leishmania amazonensis com IC50 respectivamente de 4,35 µg.mL-1 e 42,50 µg.mL-1. Utilizou-se o método colorimétrico MTT para avaliação da citotoxicidade do extrato acetato de etila frente aos macrófagos peritoniais de ratos Wistar. Os resultados mostraram redução de 86 % dos macrófagos. Por fim, os resultados obtidos podem fornecer informações relevantes, não somente para os estudos relacionados à prevenção e/ou tratamento de patologias associadas ao estresse oxidativo, leshmanioses e antimicrobianas, como também para assegurar o consumo racional de plantas medicinais. / The species of Annonaceae family are broadly used in popular medicine for several therapeutic purposes. In this context, this study aimed to perform chemical analysis and evaluate the antimicrobial, leishmanicidal, antioxidant and anti-diabetic activiteis of hydroethanolic extract 70% (v/v), of hydroethanolic fractions and extract ethyl acetate. A obtaining of extract hydroethanolic 70% (v/v) by percolation, of hydroethanolic fractions obtained by chromatography (Sephadex LH-20) and of ethyl acetate extract by maceration. The leaves of Annona crassiflora Mart. were material of choice for this study. Initially, the phytochemical’s screening preliminary was performed by Thin Layer Chromatography, thus the extracts as fractions, it allowing the detection of compounds such as: alkaloids, flavonoids, tannins, terpenes, phenolic acids and catechins. Subsequently, the extracts and fractions was analyzed in mass spectrometer, in full scan mode negative and positive, some chemical constituents can been suggest, based in molecular mass and fragmentation mechanisms proposed in the literature such as flavonoids, phenolic acids, procyanidins and alkaloids. Quantitative chemical analyses have showed that phenol contents in the dry extract hydroethanolic 70% (v/v) (262.02 ± 0.20 mg GAE/g) was higher than the concentration obtained in hydroethanolic fractions. The flavonoid levels were also higher in hydroethanolic extract 70% (v/v) (27.56 ± 0.40 mg EQ/g). it was observed in the evaluations of antioxidant activity that the pontecial the hydroethanolic fractions and ethyl acetate showed results more significant in regarding the hydroethanolic extract, where in the fractions hydroethanolic FHsdx2: 12-17 showed the best results. The antioxidant activity in vivo was realized by the method of lipid peroxidation, in kidney and liver homogenized, through determination of reactive substances to thiobarbituric acid. The administration of the hydroethanolic extract 70% (v/v) reduced the lipid peroxidation in liver and kidneys of animals treated. The analysis of antimicrobial activity revealed that the hydroethanolic extract 70% (v/v) had lower values of the minimum inhibitory concentration (MIC) obtained for Candida albicans (7.81 µg.mL-1), Candida tropicalis (15.62 µg.mL-1), Candida glabrata (3.90 µg.mL-1) and Candida parapsilosis (7.81 µg.mL-1). Candida krusei was more susceptible to hydroethanolic fraction FHsdx2: 70-104, with MIC of 3.90 µg.mL-1. To evaluate the possible effect of Annona crassiflora Mart. species, in diabetic rats, blood glucose levels, concentrations of fructosamine, urea, creatinine, ASL and ALT was determined in serum samples from animals treated with 300mg/kg of hydroethanolic extract 70 % (v/v) of the sheets. These biochemical analyzes was performed by automated apparatus Humanstar 80. Based on the results obtained in this study, the administration of the extract could be evaluated, as the protocol adopted, don’t change the biochemical parameters analyzed in the serum of normal and diabetic rats. The antileishmanial activity was performed using 96-well plates. In leishmanicidal activity, the ethyl acetate extract up showed active against Leishmania amazonensis promastigotes and amastigotes forms with IC50 respectively 4.35 µg.mL-1 and 42.50 µg.mL-1. We used the method colorimetric MTT for evaluating the cytotoxicity of the ethyl acetate extract front of peritoneal macrophages from Wistar rats. The results showed a reduction of 86% of macrophages. Finally, the results can provide relevant information, not only for studies related to the prevention and/or treatment of diseases associated with oxidative stress, leishmaniasis and diseases caused by yeast, as well to human ensure and rational use of medicinal plants. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:10.254.254.39:tede/704 |
| Date | 31 July 2015 |
| Creators | ROSA, Carla Pereira |
| Contributors | SILVA, Marcelo Aparecido da, http://lattes.cnpq.br/7701899980027791, ROCHA, Cláudia Quintino da, SOUZA, Thiago Corrêa de |
| Publisher | Universidade Federal de Alfenas, Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Brasil, UNIFAL-MG, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UNIFAL, instname:Universidade Federal de Alfenas, instacron:UNIFAL |
| Rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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