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Francionamento bioguiado e caracterização química de compostos com atividade antimicrobiana de geoprópolis de Uruçu nordestina: abelha indígena sem ferrão Melipona scutellarisCARTAXO, Rodrigo Teodoro 15 May 2012 (has links)
Séculos de relatos históricos dedicados à reverência por distintas civilizações emergem dos últimos 25 anos de estudos científicos sobre abelhas sem ferrão, espécies nativas eusociais de habitat tropical e subtropical, em contraste com a extensão das pesquisas voltadas aos atributos comerciais de Apis mellifera. Diferenças das abelhas melíferas incluem arquiteturas de ninhos peculiares, contendo a estrutura comum em cera e resinas vegetais, reforçadas com amálgamas de pólen, sementes ou so lo para produzir o geoprópolis, que compartilha a mesma atividade prevalente de própolis contra bactérias gram- positivas, atribuível a derivados terpênicos. O trabalho teve como objetivo empregar um esquema de técnicas aplicadas ao fracionamento bioguiado, para obtenção de compostos ativos contra Staphylococcus aureus de geoprópolis da abelha sem ferrão Melipona scutellaris. Entre os extratos etanólicos de seis lotes de geoprópolis coletados, aleatoriamente, de um meliponário da Bahia durante um ano, a variedade “marrom-escura” destacou-se pelo poder antiestafilocócico com a mesma atividade apresentada por sua fração acetato de etila (C IM 62,5-31,25 µg/mL), a qual revelou 6 compostos-alvo através da bioautografia, na medida em que conservou o perfil cromatográfico por CLAE-FR-DAD durante a etapa de purificação, motivando o fracionamento do extrato por cromatografia em coluna de sílica, que levou, em vista da baixa eficiência de separação verificada para a fração F1 selecionada (C IM 1,95- 0,98 μg/mL), às sub-frações SF2 (3,90-1,95 µg/mL) e SF3 (7,81-3,90 µg/mL) por CLAE-FR-DAD semi-preparativa. Apesar da resistência ao isolamento, os perfis de fragmentação dos compostos em frações, sub-frações e extratos de geoprópolis, determinados por CLAE-FR-ESI-TQ-EMn, revelaram componentes intimamente relacionados à estrutura comum de um núcleo diterpênico ligado a um resíduo de ácido cinâmico, coerente com as varreduras espectrais no UV homólogas e ao espectro de 1H-RMN da fração F2 (7,81-3,90 µg/mL), relativamente mais purificada. Amostras de geoprópolis consistiram, ao contrário, na variabilidade dos espectros de massas, ressaltando características das abelhas nativas, ao mimetizar as Apis mellifera, quanto aos comportamentos de coleta heterogêneos relacionados às fontes de resi nas disponíveis. Ensaios antibacterianos envolvendo bioautografias e determinações da concentração inibitória/bactericida mínima (CIM/CBM) por microdiluição e revelação com resazuri na biomonitoraram as etapas do fracionamento, enquanto triagens por CIM/CBM comporam o perfil antimicrobiano do extrato “marrom-escuro” e seus derivados mais ativos contra S. aureus, em que um painel de linhagens bacterianas patogênicas padronizadas delineou espécies gram- positivas, em especial de Micrococcus, Bacillus e Staphylococcus, inclusive MRSA, como altamente susceptíveis, em detrimento das gram-negativas, demonstrando o potencial promissor de geoprópolis como repositório de produtos naturais indeléveis aos desafios precursores de fármacos na terapêutica. / Long historical records of reverence by distinct ci vilizations emerge from the last 25 years of scientific studies on stingless bees, native eusocial species inhabiting the tropical and subtropical areas of the world, over extensive documentation devoted to the globally widespread Apis mellifera. Differences from the honeybees include peculiar nest strengthened arquictetures built in beeswax and plant resi ns, amalgamated with pollen, seeds or soil material to produce geopropolis, compositionally dissociated of traditional propolis, even sharing a prevailing activity against gram-positi ve bacteria, attributable to terpenic derivatives. A bioassay-guided fractionation technique was aimed to separate active compounds against Staphylococcus aureus in geopropolis from Melipona scutellaris, concerni ng its potential biological relevance. Among the ethanolic extracts of the six lots of geopropolis ramdomly collected from a meliponary settled in the Bahia State of Brazil, during a year, the “dark-brown” variety was highlighted by the same antistaphylococcal acti vity of ethyl acetate fraction (MIC 62,5-31,25µg/mL), which unveiled at least si x target compounds from bioautography in the purification step, even because their chromatographic profiles by RP-HPLC-PDA remained equivalent to the original extract, motivating its chromatographic fractionation by Low-Pressure Silica Gel Column Chromatography, followed by preparative RP-HPLC-PDA of the poorly resolved fraction F1 (MIC 1,95 – 0,98 μg/mL), yelding sub-fractions SF2 (3,90- 1,95 µg/mL) and SF3 (7,81-3,90 µg/mL). Although escaping from the isolation purpose, the fragmentation profiles of compounds in fractions, sub-fractions and extracts, determined by RP-HPLC-ESI-TQ-MSn, allowed propositions of components closely related to the structure of a diterpenic core bonded to a cinnamic acid group, consistent with the homologous UV spectral scans, associated to the 1H-NMR spectra of fraction F2 (7,81-3,90 µg/mL), relatively the most purified one available. Differing extracts consisted, in contrast, of the variability of mass spectra, suggesting mimics of Apis mellifera heterogeneous collecting behavior in the choice for resin sources by native bees. Antibacterial assays involving bioautography and resazurin microtitre plate-based minimum inhibitory, followed by bactericidal, concentrations (MIC/MBC) methods conducted the fractionation process, whilst the screening by MIC/MBC composed the antimicrobial profile of “dark brown” extract and its most active derivatives against S. aureus, displaying a panel of standardized human pathogenic bacterial strains, recongni zed as highly susceptible gram-positive species, in particular Micrococcus, Bacillus and Staphylococcus, includi ng the selected MRSA isolate, over the gram-negative ones, demonstrating the promising potential of geopropolis as a repository of natural products candidates to the challenges of drugs development in the course of health claims. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
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Estudo farmacognóstico e avaliação das atividades Anti-inflamatória e analgésica das folhas do nabo forrageiro (Raphanus sativus L. var. oleifera Metzg.)PAULA, Bruno Faria de 25 August 2014 (has links)
As plantas medicinais são comumente utilizadas pela população a fim de substituir ou auxiliar os processos de cura. Dentro deste contexo, o nabo forrageiro, Raphanus sativus L. var. oleiferus Metzg., pertencente à família Brassicaceae, também chamada por crucifera, é uma planta que apresenta conhecidas classes de compostos bioativos, assim como o próprio Raphanus sativus L. Neste trabalho, foram realizados estudos com a finalidade de se obterem parâmetros físico-químicos da droga vegetal como granulometria, cinzas totais e insolúveis em ácido, perda por dessecação e substâncias extrativas e estudos para o conhecimento do seu potencial bioativo e fitoquímico, sendo os testes de analgesia e inflamação e a triagem fitoquímica complementada à espectrometria de massas do extrato seco. Os parâmetros físico-químicos revelaram pela granulometria que a droga possui particulas moderadamente grossas, e com valores de cinzas totais e insolúveis em ácido de 16,69 e 0,025% respectivamente. A perda por dessecação foi de 6,96% e as substâncias extrativas representam 25% do total de massa da droga. A triagem fitoquímica revelou a presença de importantes classes farmacognósticas como flavonoides, esteroides-triterpenos e taninos, que puderam ser extensivamente associados à atividade biológica. Adicionalmente, foram propostas estruturas para os flavonóides encontrados no extrato seco de R. sativus, como sendo o canferol, e a quercetina além do glicosinolato glicorrafenina. Os ensaios biológicos mostraram: ausência de toxicidade aguda nas concentrações testadas; uma atividade anti-inflamatória para o teste de peritonite comparável à do padrão Indometacina nas concentrações de 30, 100 e 300 mg/kg do extrato seco. Já no teste de edema de pata, as concentrações mais ativas e com atividade comparável à do padrão foram de 30 e 300 mg/kg. O teste de analgesia feito pela metodologia da formalina mostrou melhor atividade do extrato para a concentração de 300 mg/kg enquanto que a atividade nas outras duas concentrações (30 e 100 mg/kg) não evidenciou efeito significativo. O teste da placa quente, porém, não mostrou resultado antinociceptivo favorável do extrato seco. / Medicinal plants are commonly used by the population to replace or assist the healing process. Within this surrounding context, the wild radish, Raphanus sativus L. var. oleiferus Metzg., wich belongs to the Brassicaceae family, also known as crucifera, is a plant with known classes of bioactive compounds, as well as the Raphanus sativus L itself. In this work, studies were conducted to obtain physico-chemical parameters of the drug as grain size, total and acid insoluble ashes, loss on drying and extractive substances, and studies to the knowledge of its bioactive and phytochemical potential, with tests such as analgesia and inflammation and phytochemical screening complemented with mass spectrometry of dry extract. The physico-chemical parameters classified the drug as moderately coarse size particles, and values of total and acid insoluble ashes of 16.69 and 0.025% respectively. The loss on drying was 6.96% and extractive substances representing 25% of the total mass of drug. Phytochemical screening revealed the presence of important pharmacognostic classes such as flavonoids, steroids, triterpenes and tannins, which could be extensively associated with biological activity. In addition, chemical structures were proposed for the flavonoids and other compounds found in dry extract of R. sativus, as the kaempferol and quercetin as the flavonoids and glicorrafenine as a glucosinate. The biological tests showed: absence of acute toxicity at the tested concentrations; an anti-inflammatory activity comparable to indomethacin in the standard concentrations of 30, 100 and 300 mg/kg of dry extract peritonitis test. You paw edema test, the most active and comparable to the standard activity concentrations were 30 and 300 mg/kg. The analgesia test made by the methodology of formalin better activity of the extract at the concentration of 300 mg/kg whereas the activity of the other two concentrations (30 and 100 mg/kg) showed no significant effect. The hot plate test, however, showed no antinociceptive favorable result of dry extract. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
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Caracterização fitoquímica e avaliação das atividades biológicas dos extratos obtidos das folhas de Eugenia florida DC. (Myrtaceae)BASTOS, Renan Gomes 19 February 2016 (has links)
As plantas medicinais correspondem às mais antigas estratégias empregadas pelo homem no tratamento de enfermidades de todos os tipos. Devido à grande diversidade vegetal com potencial terapêutico, ao histórico e à cultura do povo brasileiro, plantas com potencial antioxidante, antidiabético, antimicrobiano e leishmanicida têm sido alvo de estudo por uma gama de pesquisadores. Com base nessas informações, a espécie vegetal Eugenia florida DC. é uma candidata promissora para tais estudos. Desta forma, o presente trabalho teve como objetivos identificar e/ou determinar os compostos químicos presentes no extrato hidroetanólico 70% (v/v) e nos macerados em metanol, acetato de etila, acetona e hexano das folhas da espécie em questão, bem como a avaliação das atividades antirradicalar, antimicrobiana, leishmanicida e antidiabética destes extratos. Inicialmente, fez-se uma triagem fitoquímica preliminar, por meio de cromatografia em camada delgada nos extratos secos, que permitiram a detecção de compostos como flavonoides, taninos, ácidos fenólicos, saponinas e triterpenos. Posteriormente, os extratos foram analisados em espectrômetro de massas, no modo negativo, o que possibilitou a identificação de alguns constituintes químicos da classe dos fenóis, dos terpenoides e das saponinas, baseando-se na massa molecular e nos padrões de fragmentação de algumas das moléculas. As análises químicas quantitativas demonstraram que os extratos hidroetanólico (EB) e o macerado em acetato de etila (M-EtOAc) foram os que apresentaram os maiores teores de compostos fenólicos, enquanto que EB e o macerado em metanol (M-MeOH) foram os que demonstraram conter a maior quantidade de flavonoides e taninos. Na determinação da atividade antirradicalar, o valor de CE50 para EB apresentou-se bem próximo ao obtido com o padrão de quercetina, indicando uma excelente atividade. Os macerados apresentaram atividade antirradicalar bem menor. Nas análises de atividade antimicrobiana, o M-MeOH foi o que se mostrou mais ativo contra as leveduras testadas, mas todos eles foram pouco efetivos para as bactérias usadas. Nenhum dos extratos foi efetivo para inibir o crescimento das formas promastigotas de Leishmania amazonensis utilizadas no teste. Na avaliação dos parâmetros bioquímicos de ratos diabéticos tratados com EB, observaram-se diminuições significativas nos níveis séricos de glicose, frutosamina e triglicerídeos, bem como o aumento dos níveis de colesterol HDL. A administração do EB não apresentou efeitos sobre a função renal, na atividade de AST e ALT e nos demais parâmetros do perfil lipídico. Porém, ocorreu melhora nos danos hepáticos e renais nos animais diabéticos tratados, através da redução do malondialdeído (MDA). Dessa forma, concluiu-se que a espécie E. florida DC. apresenta um potencial biológico interessante, devido, principalmente, aos seus metabólitos secundários bioativos, que demonstraram promissora atividade sobre os parâmetros bioquímicos em modelos de ratos diabéticos. / The medicinal plants correspond to the earliest strategies employed by man in the treatment of diseases of all types. Due to the great plant diversity with therapeutic potential, the history and culture of the Brazilian people, plants with potential antioxidant, antidiabetic, antimicrobial and leishmanicidal have been the study by a range of researchers. Based on this information, the plant species Eugenia florida DC. is a promising candidate for such studies. Thus, this study aimed to identify and/or determine the chemical compounds present in hydroethanolic extract 70% (v/v) and macerated in methanol, ethyl acetate, acetone and hexane of species leaves in question, and evaluating the antiradical, antimicrobial, antidiabetic and leishmanicidal activities. Initially, there was a preliminary phytochemical screening by means of thin layer chromatography in dry extracts, which allowed the detection of compounds such as flavonoids, tannins, phenolic acids, terpenoids and saponins. Subsequently, the extracts were analyzed in a mass spectrometer in negative mode, which allowed the identification of some chemical constituents of phenolics, terpenoids and saponins, based on the molecular weight and fragmentation mechanisms of some of the molecules. Quantitative chemical analysis showed that hydroethanolic extracts (EB) and macerated in ethyl acetate (M-EtOAc) were those with the highest levels of phenolic compounds, while EB and macerated in methanol (M-MeOH) were the demonstrated that contain the greater amount of flavonoids and tannins. In determining the antiradical activity, the EC50 value for EB presented very close to that obtained with standard quercetin, indicating an excellent activity. The macerated showed much lower antiradical activity. In the analysis of antimicrobial activity, the M-MeOH was more active against the yeast tested, but they were ineffective for bacteria used. None of the extracts was effective to inhibit the growth of promastigotes of Leishmania amazonensis used in the test. In evaluating the biochemical parameters of diabetic rats treated with EB, there were significant decreases in serum glucose, fructosamine and triglyceride levels and increasing HDL cholesterol levels. EB's administration has had no effect on renal function, in AST and ALT activity and other parameters of lipid profile. However, there was an upgrade in liver and kidney damage in diabetic animals treated through reduction of malondialdehyde (MDA). Thus, it was concluded that the species E. florida DC. presents an interesting biological potential, mainly due to its bioactive secondary metabolites, which have demonstrated promising activity on biochemical parameters in models of diabetic rats. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
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Própolis de abelha nativa sem ferrão da espécie Frieseomelitta varia: determinação da composição química e atividades biológicasHIPÓLITO, Taciane Maíra Magalhães 04 March 2013 (has links)
O auxílio terapêutico exercido pelas própolis de abelhas Apis mellifera é conhecido desde tempos imemoriais e suas propriedades têm sido amplamente estudadas. Contudo, as própolis produzidas por abelhas sem ferrão foram ainda pouco investigadas. Desta forma, este trabalho se propôs a avaliar algumas características químicas e atividades biológicas de própolis de abelhas sem ferrão da espécie Frieseomelitta varia obtidas em épocas e locais diferentes. Para tanto, obtiveram-se extratos etanólicos de própolis coletadas na região de Alfenas-MG (Fv1, Fv2 e FvA), os quais foram avaliados quanto ao perfil de absorção da luz UV visível, composição por flavonoides (com base em quercetina), compostos fenólicos (com base em ácido gálico) e perfil químico por cromatografia em camada delgada (CCD). Adicionalmente, Fv1, Fv2 e FvA foram submetidos a testes in vitro que analisaram suas atividades antimicrobiana, antioxidante e antiproliferativa. O espectro de absorção da luz UV visível apresentou picos característicos de fenólicos e flavonoides e os testes quantitativos mostraram baixos valores destes compostos fitoquímicos. A CCD, por sua vez, revelou a presença de terpenoides em todas as amostras. Quanto às propriedades biológicas, verificou-se baixa atividade antioxidante. As atividades antimicrobiana e antiproliferativa, no entanto, foram bastante relevantes. A amostra Fv1 mostrou capacidade para inibir totalmente o crescimento de células de câncer de ovário multirresistente a drogas em uma concentração de 7,6µg/mL, valor inferior ao necessário do padrão Doxorrubicina para inibir esta mesma linhagem celular. Nos testes de atividade antimicrobiana, Fv1 também se destacou por sua ação bactericida sobre Streptococcus agalactiae em concentração contida entre 15,62-31,25µg/mL, valor também inferior ao obtido com o padrão Cloranfenicol. Os resultados encontrados nesta pesquisa evidenciam o grande potencial biológico das própolis de Frieseomelitta varia, que pode se modificar conforme local e época de coleta. / The therapeutic aid exercised by propolis of honeybee Apis mellifera is known since immemorial times and their properties have been widely studied. However, the stingless bee propolis has been little investigated. In this way, this work proposed to assess some chemical characteristics and biological activities of propolis produced by Frieseomelitta varia stingless bees. The samples (Fv1, Fv2 and FvA) were obtained in different times and places in the city of Alfenas-MG. Extraction were made with them in ethanol and the resultant extracts were submitted to some evaluations: UV-visible absorption profile, composition by flavonoids (quercetin), phenolic compounds (based on Gallic acid) and chemical profile by thin-layer chromatography (TLC). Additionally, Fv1 Fv2 and FvA were examined by in vitro biological assays, such as antimicrobial, antioxidant and antiproliferative activities. The absorption spectrum of UV-visible light showed characteristic peaks of phenolic compounds and flavonoids, on the other hand, the quantitative tests showed low values of these phytochemicals. The TLC result revealed the presence of terpenoides in all the samples. With regard to biological properties, low antioxidant activity was found. However, the antimicrobial and antiproliferative results, were quite relevant. The sample Fv1 showed ability to inhibit fully the growth of ovarian cancer cells resistant to drugs at a concentration of 7.6µg/mL, below the required value of the standard Doxorubicin to inhibit this same cell line. In the antimicrobial assays, Fv1 also stood out for its bactericidal action on Streptococcus agalactiae in concentration contained between 15.62 -31.25µg/mL, also lower than the value obtained with the standard Chloramphenicol. The results found in this research show the great biological properties of Frieseomelitta varia propolis, which can change according to location and time of collection. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
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Caracterização química e avaliação biológica dos extratos hidroetanólicos obtidos do caule, folhas, glomérulo e raízes de Leonotis nepetifolia (L.) R. Br (Lamiaceae)OLIVEIRA, Diego Pinto de 06 February 2013 (has links)
A espécie Leonotis nepetifolia é amplamente distribuída no Brasil e no mundo, é uma erva daninha utilizada com diversas finalidades terapêuticas pela população, porém há poucos estudos a cerca de sua composição química e atividade biológica. O presente estudo tem a finalidade de caracterizar quimicamente os extratos hidroetanólicos de caule, folhas, glomérulo e raízes de L. nepetifolia e avaliar a atividade biológica destes. A caracterização química foi realizada em cromatógrafo líquido de alta eficiência acoplado ao detector de arranjo de diôdos. Quanto o perfil químico dos extratos, foi quantificado o teor de fenóis e flavonoides totais. A atividade antirradicalar foi avaliada pelos testes de DPPH˙ e poder redutor dos extratos. A atividade antimicrobiana foi avaliada pelo teste de microdiluição em placa para fungos e bactérias. Foi realizada a triagem dos extratos quanto a atividade antileishmania, atividade antiamastigota e antipromastigota em Leishmania amazonensis. A atividade citotóxica dos extratos foi avaliada em macrófagos peritoneais murinos. Os cromatogramas e os espectros em UV/vis revelaram a presença de polifenóis e flavonoides em maior abundancia nos extratos das folhas e glomérulo, comparados com as raízes e caule. Os extratos de folhas e glomérulos apresentaram maior atividade antirradicalar, poder redutor e concentrações quantificadas de compostos polifenólicos e flavonoides. Todos os extratos inibiriam o crescimento de 50% da população bacteriana sendo que extrato do caule apresentou maior atividade frente a bactérias Gram-positivas, principalmente para Bacillus cereus. Todos os extratos foram capazes de inibir o crescimento de 50% e 100% da população fúngica, os extratos das folhas e raízes demonstraram maior atividade contra formas promastigotas e amastigotas de L. amazonensis sendo que o extrato das raízes apresentou maior potencial citotóxico em macrófagos murinos. Os extratos brutos de L. nepetifolia apresentaram atividades significantes que se relacionam com os metabólitos secundários presentes na espécie principalmente os polifenóis e flavonoides caracterizados no presente estudo. / The specie Leonotis nepetifolia is widely distributed in Brazil and worldwide, is a weed treatments used for various purposes by the population, but there are few studies about its chemical composition and biological activity. The purpose of this study is to characterize chemically hydroethanolic extracts of stem, leaves, inflorescences glomerulus and roots of Leonotis nepetifolia and evaluate the biological activity of these. The chemical characterization was performed in HPLC - UV on the chemical profile of the extracts was quantified the level of total phenols and flavonoids. The antioxidant activity was assessed for DPPH˙ and reduce power of the extracts. The microbial activity test was used for broth microdilution methods for bacteria and fungi. We performed screening of the extracts and the activity against promastigotes e amastigotes forms of Leishmania amazonensis. The cytotoxic activity of the extracts was evaluated in murine peritoneal. The chromatograms and UV spectra revealed the presence of polyphenols and flavonoids in greater abundance in extracts of leaves and inflorescences glomerulus, compared with the roots and stem the quantitative analyses showed the same result. The extracts of the stem showed higher activity against Gram positive bacteria, mainly Bacillus cereus, all extracts inhibited the growth of 50% of the bacterial population , all extracts were able to inhibit the growth of 50% and 100% of the extract showed no fungal growth and extracts of the leaves and roots showed greater activity against promastigotes and amastigotes forms of L. amazonensis and the roots extracts showed greater cytotoxic potential in murine macrophages. The crude extracts from Leonotis nepetifolia showed significant activities that relate to the secondary metabolites present in the species mainly polyphenols and flavonoids, performed int this study. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG
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Estudo da composição química e avaliação da atividade biológica de Annona crassiflora Mart. (Annonaceae).ROSA, Carla Pereira 31 July 2015 (has links)
As espécies da família Annonaceae são amplamente utilizadas na medicina popular para diversos fins terapêuticos. Pesquisas têm demonstrado que o marolo (Annona crassiflora Mart.) contém muitas classes de fitoquímicos biologicamente ativos. Neste contexto, este estudo teve por objetivo realizar as análises fitoquímicas e avaliar as atividades antimicrobianas, leishmanicidas, antioxidantes e antidiabéticas do extrato hidroetanólico 70% (v/v), das frações hidroetanólicas e do extrato acetato de etila. A obtenção do extrato hidroetanólico 70% (v/v) ocorreu por percolação, às frações hidroetanólicas por cromatografia em coluna (Sephadex LH-20) e o extrato acetato de etila por maceração. As folhas de Annona crassiflora Mart foram o material de escolha para esse estudo. Inicialmente, realizou-se uma triagem fitoquímica preliminar, por meio da Cromatografia em Camada Delgada, tanto dos extratos como das frações, que permitiram a detecção de compostos como: alcaloides, flavonoides, taninos, terpenos, ácidos fenólicos e catequinas. Posteriormente, os extratos e as frações foram analisados em espectrômetro de massas, no modo full scan negativo e positivo, podendo sugerir alguns constituintes químicos, baseando-se na massa molecular e nos mecanismos de fragmentação propostos pela literatura, como os flavonoides, ácidos fenólicos, procianidinas e alcaloides. As análises químicas quantitativas demonstraram que os teores de fenóis no extrato seco hidroetanólico 70% (v/v) (262,02 ± 0,20 mg EAG/g) foram superiores à concentração obtida nas frações hidroetanólicas. Os teores de flavonoides também foram superiores no extrato hidroetanólico 70% (v/v) (27,56 ± 0,40 mg EQ/g). Nas avaliações da atividade antioxidante observou-se que o pontecial das frações hidroetanólicas demonstraram resultados mais significativos em relação ao extrato hidroetanólico e acetato de etila, sendo que a fração hidroetanólica FHsdx2: 12-17 apresentou os melhores resultados. A atividade antioxidante in vivo foi realizada pelo método da peroxidação lipídica, no homogeneizado renal e hepático, através da determinação das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico. A administração do extrato hidroetanólico 70% (v/v) reduziu a peroxidação lipídica no fígado e rins de animais tratados. A análise da atividade antimicrobiana revelou que o extrato hidroetanólico 70% (v/v) teve menores valores de concentração inibitória mínima (MIC) obtidos para Candida albicans (7,81 µg.mL-1), Candida tropicali (15,62 µg.mL-1), Candida glabrata (3,90 µg.mL-1) e Candida parapsilosis (7,81 µg.mL-1). A Candida krusei foi mais susceptível a fração hidroetanólica FHsdx2: 70-104, apresentando MIC de 3,90 µg.mL-1. Para avaliar o possível efeito da espécie Annona crassiflora em ratos diabéticos, determinou-se os níveis glicêmicos, as concentrações de frutosamina, uréia, creatinina, ASL e ALT em amostras de soro de animais tratados com 300 mg/kg do extrato hidroetanólico 70% (v/v). Essas análises bioquímicas foram realizadas em aparelho automatizado Humanstar 80. Com base nos resultados obtidos, pode-se avaliar que o a administração do extrato, conforme o protocolo adotado, não alterou os parâmetros bioquímicos analisados no soro de ratos normais e diabéticos. A atividade leishmanicida foi realizada utilizando placas de 96 poços. Na atividade leishmanicida, o extrato acetato de etila apresentou-se ativo contra as formas promastigotas e amastigotas de Leishmania amazonensis com IC50 respectivamente de 4,35 µg.mL-1 e 42,50 µg.mL-1. Utilizou-se o método colorimétrico MTT para avaliação da citotoxicidade do extrato acetato de etila frente aos macrófagos peritoniais de ratos Wistar. Os resultados mostraram redução de 86 % dos macrófagos. Por fim, os resultados obtidos podem fornecer informações relevantes, não somente para os estudos relacionados à prevenção e/ou tratamento de patologias associadas ao estresse oxidativo, leshmanioses e antimicrobianas, como também para assegurar o consumo racional de plantas medicinais. / The species of Annonaceae family are broadly used in popular medicine for several therapeutic purposes. In this context, this study aimed to perform chemical analysis and evaluate the antimicrobial, leishmanicidal, antioxidant and anti-diabetic activiteis of hydroethanolic extract 70% (v/v), of hydroethanolic fractions and extract ethyl acetate. A obtaining of extract hydroethanolic 70% (v/v) by percolation, of hydroethanolic fractions obtained by chromatography (Sephadex LH-20) and of ethyl acetate extract by maceration. The leaves of Annona crassiflora Mart. were material of choice for this study. Initially, the phytochemical’s screening preliminary was performed by Thin Layer Chromatography, thus the extracts as fractions, it allowing the detection of compounds such as: alkaloids, flavonoids, tannins, terpenes, phenolic acids and catechins. Subsequently, the extracts and fractions was analyzed in mass spectrometer, in full scan mode negative and positive, some chemical constituents can been suggest, based in molecular mass and fragmentation mechanisms proposed in the literature such as flavonoids, phenolic acids, procyanidins and alkaloids. Quantitative chemical analyses have showed that phenol contents in the dry extract hydroethanolic 70% (v/v) (262.02 ± 0.20 mg GAE/g) was higher than the concentration obtained in hydroethanolic fractions. The flavonoid levels were also higher in hydroethanolic extract 70% (v/v) (27.56 ± 0.40 mg EQ/g). it was observed in the evaluations of antioxidant activity that the pontecial the hydroethanolic fractions and ethyl acetate showed results more significant in regarding the hydroethanolic extract, where in the fractions hydroethanolic FHsdx2: 12-17 showed the best results. The antioxidant activity in vivo was realized by the method of lipid peroxidation, in kidney and liver homogenized, through determination of reactive substances to thiobarbituric acid. The administration of the hydroethanolic extract 70% (v/v) reduced the lipid peroxidation in liver and kidneys of animals treated. The analysis of antimicrobial activity revealed that the hydroethanolic extract 70% (v/v) had lower values of the minimum inhibitory concentration (MIC) obtained for Candida albicans (7.81 µg.mL-1), Candida tropicalis (15.62 µg.mL-1), Candida glabrata (3.90 µg.mL-1) and Candida parapsilosis (7.81 µg.mL-1). Candida krusei was more susceptible to hydroethanolic fraction FHsdx2: 70-104, with MIC of 3.90 µg.mL-1. To evaluate the possible effect of Annona crassiflora Mart. species, in diabetic rats, blood glucose levels, concentrations of fructosamine, urea, creatinine, ASL and ALT was determined in serum samples from animals treated with 300mg/kg of hydroethanolic extract 70 % (v/v) of the sheets. These biochemical analyzes was performed by automated apparatus Humanstar 80. Based on the results obtained in this study, the administration of the extract could be evaluated, as the protocol adopted, don’t change the biochemical parameters analyzed in the serum of normal and diabetic rats. The antileishmanial activity was performed using 96-well plates. In leishmanicidal activity, the ethyl acetate extract up showed active against Leishmania amazonensis promastigotes and amastigotes forms with IC50 respectively 4.35 µg.mL-1 and 42.50 µg.mL-1. We used the method colorimetric MTT for evaluating the cytotoxicity of the ethyl acetate extract front of peritoneal macrophages from Wistar rats. The results showed a reduction of 86% of macrophages. Finally, the results can provide relevant information, not only for studies related to the prevention and/or treatment of diseases associated with oxidative stress, leishmaniasis and diseases caused by yeast, as well to human ensure and rational use of medicinal plants. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
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Isoeleuterol e isoeleuterina: potenciais marcadores químicos da tintura de Eleutherine plicata Herb (Iridaceae) e atividades microbiológica e antioxidanteMALHEIROS, Luiz Claudio da Silva 30 December 2008 (has links)
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Previous issue date: 2008 / A espécie Eleutherine plicata Herb. é uma Iridaceae, conhecida popularmente como marupazinho, muito utilizada pela população para o tratamento de diarréias. Com o bulbo da planta prepara-se um chá, que é utilizado
no tratamento de infestações causadas por ameba. O material vegetal utilizado
neste estudo foi coletado em Belém do Pará e sua identificação botânica foi realizada por comparação de exsicata depositada no Museu Paraense Emílio
Goeldi sob nº 10543. O extrato etanólico (EE) foi preparado por percolação a
partir do bulbo previamente seco e moído. Após a secagem o extrato etanólico foi
suspenso em uma solução hidroalcóolica (1:1) e submetida a partição com
solventes de polaridades crescente. Com o extrato etanólico e as frações foram
realizados 18 testes para detectar classes de metabólitos secundários. O extrato
etanólico e as frações hexânica e clorofórmica apresentaram resultado positivo
para naftoquinonas, antraquinonas e esteróides e triperpenos. As análises por
cromatografia em camada delgada do extrato etanólico e frações hexânica e
clorofórmica mostraram zonas sensíveis à solução metanólica de KOH 10%,
indicando a presença de quinonas nestas amostras. A avaliação da atividade
antimicrobiana do referido extrato e frações com cepas de C. albicans, S. aureus,
E. coli e P. aeruginosa demonstrou que a fração clorofórmica é a mais ativa,
apresentando os maiores halos de inibição de crescimento microbiano,
possivelmente, contendo uma maior concentração de constituintes ativos. Da
fração clorofórmica foram isolados os constituintes químicos isoeleuterol e
isoeleuterina, os quais foram caracterizados quimicamente através de
ressonância manética nuclear de hidrogênio (RMN1H) e carbono 13 (RMN 13C),
em comparação com os dados da literatura. O extrato etanólico, isoeleuterol e
isoeleuterina foram submetidos a avaliação de suas atividades antioxidantes, os
quais apresentaram fraca atividade quando comparado com o padrão BHT. / Eleutherine plicata Herb. is an Iridaceae, popularly known as marupazinho,
widely used by people to treat diarrhea. With the bulb of the plant is about a cup of
tea, which is used to treat infestations caused by amoeba. The plant material used
in this study was collected in Belém do Pará and their identification by comparison
of botany was deposited in exsiccates Paraense Emilio Goeldi Museum under nº
10543. The ethanol extract was prepared by percolation from the bulb previously
dried and crushed. After drying the ethanol extract was suspended in a solution
hydroalcoholic (1:1) and subjected to partition with solvents of increasing polarity.
With the ethanol extract and the fractions were performed eighteen tests to detect
classes of secondary metabolites. The ethanol extract and the fractions hexanic
and chloroform, showed a positive result for naphthoquinones, anthraquinones
and steroids and triperpenoids. The analysis by thin-layer chromatography
fractions of ethanol extract and hexane and chloroform, showed areas susceptible
to methanolic solution of KOH 10%, indicating the presence of quinones in these
samples. The evaluation of the antimicrobial activity of ethanol extract and
fractions hexanic and chloroform with strains of C. albicans, S. aureus, E. coli and
P. aeruginosa, showed that the chloroform fraction is the most active, presenting
the largest halos of inhibition of microbial growth, possibly containing a higher
concentration of active constituents. The chemical constituents isoeleutherol and
isoeleutherine were isolated from chloroform fraction, and were characterized
chemically using RMN 1H e 13C, compared with the literature. The ethanol extract,
isoeleutherol and isoeleutherine were submitted to evaluation of their antioxidant
activies, and showed weak activity when compared with BHT.
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Caracterização farmacognóstica, química, físico-química e estudos preliminares de pré-formulação da Arrabidaea chica (Humb. & Bonpl.) B. Verlt. / The physical, chemical, physico-chemical and preformulations characterizing of Arrabidaea chica (Humb. & Bonpl.) B. Verlt.ALVES, Mauro Sérgio Marques 22 October 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2011-03-23T21:19:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Item created via OAI harvest from source: http://www.bdtd.ufpa.br/tde_oai/oai2.php on 2011-03-23T21:19:37Z (GMT). Item's OAI Record identifier: oai:bdtd.ufpa.br:270 / This work aimed the physical, chemical, physico-chemical and preformulations characterizing of Arrabidaea chica (Humb. & Bonpl.) B. Verlt., belonging to the family of Bignoniacae, which receives several denominations, and in the Amazon region is known popularly as pariri, that is widely used in popular medicine for the treatment of many diseases, such as skin infirmities caused by dermatitis and eczema. The use of natural products from vegetal origin requires the pharmaco-botanical quality control and pureness analysis which sets the species technical specifications. Therefore, it was made an anatomical description of the young and mature leaves of the plant from observations made at the optic microscope in histological cuts. The pharmacological tests included the determination of the granulometrical distribution of the plants powder, determination of the humidity purport and of total ashes and, about the dyeing, it was made pH, relative density and solids purport determinations, and also it was made the chemical prospection, the chromatographic profile by thin-layer chromatography (TLC) and the highperformance liquid chromatography (HPLC), besides the valuation of its microbial activity. To the powder as well as the dyeing of the A. chica observed the profiles by spectroscopy in the infrared region and thermal profiles by TGA and DTA. Some studies of preformulation were made by spectroscopy in the infrared region and thermal analysis (TGA and DTA) of the binary mixtures of the formula adjuvants suggested to spread the dye, with the purpose to evaluate possible incompatibilities between the dye and these elements. The results obtained evidenced that the A. chica dye demonstrated to adjust to the aim demanded, moreover it assured the compatibility to the tested adjuvants to constitute the proposed formula, once none clue of physical or chemical incompatibilities were observed among them. The studies provided relevant basis to the development of the proposed formula, seeking to obtain quick results with the wished accuracy. / Realiza estudos de caracterização química, físico-química e de pré-formulação de Arrabidaea chica (Humb. & Bonpl.) B. Vert., pertencente à família Bignoniaceae, a qual recebe várias denominações, sendo que na região amazônica ela é conhecida popularmente como pariri, amplamente utilizada na medicina popular para o tratamento de várias doenças, dentre elas as enfermidades da pele causadas por dermatomicoses. A utilização de produtos naturais de origem vegetal implica no controle de qualidade farmacobotânico e em ensaios de pureza que compõem as especificações técnicas da espécie. Para isso, foi realizada a descrição anatômica das folhas jovens e maduras da planta a partir de observações realizadas ao microscópio óptico em cortes histológicos. Os testes Farmacopéicos incluíram a determinação da distribuição granulométrica do pó da planta, determinação do teor de umidade e de cinzas totais, e para a tintura foram realizadas determinações de pH, densidade aparente e teor de sólidos, sendo realizadas ainda a prospecção química, o perfil cromatográfico por CCO e CLAE, além da avaliação da sua atividade antimicrobiana. Tanto para o pó quanto para a tintura de A.chica foram observados os perfis por espectroscopia na região do infravermelho e perfis térmicos por TG e OTA. Foram realizados ainda, os estudos de pré-formulação através de espectroscopia na região de infravermelho e análise térmica (TG e OT A) das misturas físicas dos adjuvantes da formulação proposta para veicular a solução extrativa, com a finalidade de avaliar possíveis incompatibilidades da solução extrativa com os mesmos. Os resultados obtidos evidenciaram que a tintura de A. chica se adequa ao fim pretendido, além de ter assegurado a compatibilidade com os adjuvantes testados para constituírem a formulação proposta, já que não foi observado indícios de incompatibilidade física ou química entre os mesmos. Os estudos forneceram dados relevantes para o desenvolvimento da formulação proposta, visando obter resultados rápidos e com a precisão desejada.
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Avaliação da atividade antimicrobiana de plantas utilizadas na medicina popular da Amazônia / Evaluation of the antimicrobial activity of plants used in the popular medicine of the AmazôniaRIBEIRO, Christian Miranda 24 July 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2011-03-23T21:19:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Item created via OAI harvest from source: http://www.bdtd.ufpa.br/tde_oai/oai2.php on 2011-03-23T21:19:37Z (GMT). Item's OAI Record identifier: oai:bdtd.ufpa.br:272 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The study of medicinal plants it makes possible the discovery of new bioactive components in the search for promising drugs. The increase of infections and the appearance of the microbial resistance strengthen this research. The Objective of this study it was evaluate the antimicrobial activity of the extracts of six medicinal plants of the Amazonia: Psidium guajava (guava), Bryophyllum calycinum Salisb (pirarucu), Eleutherine plicata Herb (marupazinho), Uncaria guianensis (Cats claw), Arrabideae chica (pariri) e Mansoa alliacea (Lam.) A.H. Gentry (cipó d'alho) against ATCC strains of fungi and bacteria.The collection and the identification of the plant were performed in EMBRAPA/CPATU and the phytochemical analysis in the Laboratory of FACFAR/UFPA and CESUPA in agreement with the methodologies established in these laboratories. The crude ethanolic extract of leaves and the underground parts of marupazinho were submitted to the antimicrobial activity evaluation though the ágar disc diffusion method and determination of minimum inhibitory concentration (MIC) though microdilution in plate and ágar disc diffusion methods. The extracts were used in concentrations of 500, 250, 125, 62,5 and 31,25 mg/mL using as solvent Dimethyl Sulfoxide (DMSO). The Guava extract was effective against S. aureus, P. aeruginosa and C. albicans (MIC 125mg\mL), pirarucu was effective against S aureus (MIC= 500 mg/mL) and P. aeruginosa (MIC= 250 mg/mL), marupazinho against S.aureus (MIC= 500mg/mL) and C. albicans (MIC= 250mg/mL), Cats claw against S. aureus (MIC= 62,5mg/mL) and pariri was effective against S. aureus (MIC= 62,5 mg/mL), E. coli (MIC=250 mg/mL) and C. albicans (MIC 500 mg/mL). The fractions of U. guianensis extracts was obtained though fractioned dissolution methods and show that only the methanolic fraction presented antimicrobial activity. The results show that Amazonia medicinal plants presents antimicrobial activity and. This promissory extracts open the possibility of finding new clinically effective antimicrobial compounds. / O estudo de plantas medicinais possibilita a descoberta de novos compostos bioativos na procura de drogas promissoras. O aumento de infecções e o aparecimento da resistência microbiana reforçam essa pesquisa. O objetivo do trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana de extratos de seis espécies de plantas medicinais que ocorrem na Amazônia: Psidium guajava (goiabeira), Bryophyllum calycinum Salisb (pirarucu), Eleutherine plicata Herb (marupazinho), Uncaria guianensis (unha-de-gato), Arrabideae chica (pariri) e Mansoa alliacea (Lam.) A.H. Gentry (cipó d'alho) frente a cepas ATCC de bactérias e fungos. A coleta e a identificação das plantas foram realizadas na EMBRAPA/CPATU e a análise fitoquímica no Laboratório de Fitoquímica da FACFAR/UFPA e CESUPA obedecendo às metodologias estabelecidas nestes laboratórios. Os extratos etanólicos seco das folhas frescas das plantas e bulbo do marupazinho foram submetidos à avaliação da atividade antimicrobiana pelo método de disco difusão em ágar e determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) através do método de microdiluição em placas e disco difusão em ágar. Os extratos foram utilizados em concentrações de 500, 250, 125, 62,5 e 31,25 mg/mL utilizando como solvente o Dimetil-Sulfóxido (DMSO). O extrato de goiabeira teve atividade frente a S. aureus, P. aeruginosa e C. albicans (CIM125mg\mL), o de pirarucu frente a S. aureus (CIM= 500 mg/mL) e P.
aeruginosa (CIM= 250 mg/mL), o de marupazinho para S. aureus (CIM= 500mg/mL) e C. albicans (CIM= 250mg/mL), o de unha-de-gato contra S. aureus (CIM= 62,5 mg/mL) e o de pariri inibiu S. aureus (62,5 mg/mL), E. coli (250 mg/mL) e C. albicans (500 mg/mL). O fracionamento do EEB de U. guianensis através da técnica de dissolução fracionada demonstrou que a fração metanólica teve ação antimicrobiana. Os resultados comprovaram que estas plantas possuem atividade antimicrobiana. Estes extratos abrem uma possibilidade de descobertas de novos compostos antimicrobianos clinicamente efetivos.
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Isolamento e quantificação de flavonóides e abordagem das atividades antioxidante e antimicrobiana de Jatropha gossypiifolia L.VEIGA, Andrex Augusto Silva da 30 December 2008 (has links)
Submitted by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br) on 2011-05-03T12:26:17Z
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Previous issue date: 2008 / Jatropha gossypiifolia L. (Euphorbiaceae), conhecida no Pará como pião-roxo, é utilizada no tratamento de hemorróidas, queimaduras, dores estomacais, entre outras doenças. Diante da importância do vegetal na região torna-se necessária a sua investigação visando contribuir para o seu aproveitamento no desenvolvimento de fitoterápicos. Para tanto, buscou-se determinar o perfil cromatográfico do extrato etanólico bruto (EEB), por cromatografia de camada delgada (CCD) e por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), o teor de flavonóides totais e dos flavonóides isolados no extrato. Foram realizados também ensaios de atividade antimicrobiana com o EEB e as frações obtidas a partir dele (frações hexânica, clorofórmica, acetato de etila e residual). A atividade antioxidante do extrato e suas frações também foi caracterizada. O material vegetal foi coletado no horto de plantas medicinais da EMBRAPA – Amazônia oriental e com ele preparou-se, por percolação, o EEB; utilizando um evaporador rotativo a baixa pressão, obteve-se o extrato seco que, posteriormente, foi fracionado por partição líquido-líquido sucessivamente com hexano, clorofórmio e acetato de etila. As frações obtidas foram também concentradas a baixa pressão. A fração acetato de etila foi novamente fracionada fornecendo uma fração acetona (FAct-II), uma nova acetato de etila (FA-II), metanólica (FM-II) e resíduo sólido (RS-II). FAct-II foi submetida a cromatografia líquida a média pressão obtendo-se as subfrações Fr SAc1-II e Fr SAc3-II denominadas de Jg1 e Jg2, respectivamente. A prospecção química no extrato e nas frações dos metabólitos foi realizada em triplicata, sendo evidenciada a presença dos seguintes polifenóis: taninos catéquicos e flavonóides. A análise por CCD foi realizada utilizando-se o eluente acetato de etila/ácido fórmico/ácido acético glacial/água (100:11:11:26), sobre gel de sílica de fase normal, sendo observadas zonas com fator de retenção 0,65, 0,72 e 0,77, reativas à solução de FeCl3. O cromatograma por CLAE do EEB apresentou três picos significativos (valores médios de tr: 13,24 min, 15,02 min e 16,00 min) cujos espectros são característicos de flavonóides. No calculo do teor de flavonóides, aplicando-se a média das leituras de absorvância (A: 0,874), chegou-se ao teor de 2,04%. A concentração encontrada para cada substância isolada foi de 340 μg para Jg1 e 406 μg para Jg2 por mililitro da solução de extrato. Quanto às atividades biológicas testadas, FA-I e FR-I inibiram o crescimento de S. aureus e C. albicans como também apresentaram maior potencial antioxidante. Os resultados fornecem parâmetros acerca de polifenóis adequados para o controle de qualidade como marcadores químicos, e teor de destes possíveis marcadores. / Jatropha gossypiifolia L (Euphobeaceae), known in Pará as “Pião roxo” is used for treatment of hemorroids, burns, stomach pains among other diseases, the importance of this plant to this region has led to its research in order to improve its phytotherapeutic development. During the analysis, the chromatographic profiles of its Crude Ethanolic Extract (CEE)was determined using Thin Layer chromatography (TLC) and High Performance Liquid Chromatography (HPLC) methods. The total and isolated flavonoids quantities were determined. Antimicrobial activity essays of the crude ethanolic extract were also conducted and the fractions obtained (hexanic, chloroform, ethyl acetate and residual fractions). The antioxidant activities of the extract and the fractions were also characterized. The plant materials were collected from EMBRAPA medicinal plants garden in the east Amazon and then extracted through percolation to obtain crude ethanolic extract. The dry extract was obtained using low pressure rotative evaporator followed by liquid-liquid partition with hexane, chloroform and ethyl acetate successively. The fractions obtained were also concentrated at low pressure, The ethyl acetate fractions were re-fractioned, giving rise to acetone fraction (ActF-II), a new ethyl acetate (AF-II), methanolic fraction (MF-II) and a solid residue (SR-II). ActF-II was submitted to liquid chromatography at average pressure, resulting in sub-fractions like Fr ActS-II and Fr ActS3-II called Jg1 and Jg2, respectively. Chemical prospection of the Extract and the metabolite fractions were conducted in triplicates, leading to the observation of the presence of the following polyphenols: Catechines, Tannins and flavonoids. The analysis by thin Layer Chromatography (TLC) was conducted using eluent of ethyl acetate/formic acid/glacial acetic acid/water at (100:11:11:26) on a normal phase silica gel, showing the retention factors in the following zones:0.65, 0.72, and 0.77 in reaction to Fecl3 solution . The HPLC chromatogram of ethanolic crude extract presented three significant peaks with average values of RT: 13.2 min, 15.02 min, and 16.00 min whose spectra are characteristics of flavonoids. On calculating the flavonoid quantity using the average absorbance reading (A=0.874), 2.02% flavonoid was found. The concentrations for each isolated substances was 340ug for Jg1 and 406 ug for Jg2 per milliliter of extract solution. Regarding the biological activity tested AF-1 and Fr-1 inhibited growths of S. aureus and C.albicans and also manifested a great antioxidant potential. These results provide adequate polyphenol parameters for quality control serving as chemical markers and their possible quantities.
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