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Efeitos de uma dieta com teores baixo de carboidratos e elevado de proteínas e lipídeos no fígado de ratas / Análise bioquímica, histológica e por citometria de fluxo

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Maria Emília Lopes.pdf: 20093800 bytes, checksum: 9bb89700f8b88159431e067064afe7dd (MD5) / Made available in DSpace on 2018-01-12T16:10:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Maria Emília Lopes.pdf: 20093800 bytes, checksum: 9bb89700f8b88159431e067064afe7dd (MD5) / Há algumas décadas, dietas cetogênicas como a preconizada pelo Dr. Atkins,
composta por 0% a 20% da oferta energética fornecida por carboidratos, 55% a 65%
por proteínas e 25% a 35% por lipídeos são usadas visando ao emagrecimento. Mais
recentemente, a indicação foi ampliada para algumas doenças neurológicas. A hipótese
deste estudo é que, como o fígado recebe diretamente macronutrientes da absorção
intestinal, as modificações na composição desses componentes da dieta possam levar
à lesão dos hepatócitos. O objetivo geral do estudo é verificar o efeito de uma dieta com
teores baixo de carboidratos e elevado de proteínas e lipídeos no fígado de ratas por
análise bioquímica plasmática, histologia e citometria de fluxo do fígado. Vinte ratas,
divididas em dois grupos, receberam dieta controle e dieta experimental. Os animais
controles receberam dieta AIN-93M e os experimentais, dieta baseada na do Dr. Atkins,
com carboidrato (8,44%), proteínas (57,19%), lipídeos (34,36%) e água, ad libitum, por
oito semanas. As ratas no estro em jejum foram anestesiadas e pesadas, a glicemia
capilar foi dosada e a coleta de sangue foi realizada para avaliar transaminases, ureia,
creatinina, triacilglicerol, colesterol, lipoproteína de alta densidade, lipoproteína de baixa
densidade, β-hidroxibutirato, malondialdeído, glucagon, insulina, interleucina-6 e fator
de necrose tumoral. Seis fragmentos do fígado foram retirados e colocados em solução
fisiológica a 0,9% para citometria de fluxo, e o restante do órgão colocado em solução
de formalina neutra tamponada a 10% para microscopia óptica. O tecido adiposo
branco periovariano bilateral foi retirado e pesado. Os resultados foram apresentados,
como média e desvio padrão para a comparação, o teste t de Student, não pareado, e o
teste ANOVA, seguido do teste de Tukey. Utilizou-se o teste de Pearson para estudos
de correlação, sendo p<0,05 com significância. As médias de peso dos dois grupos
aumentaram, sem diferença estatística no início e ao final. A média da ingestão de água
foi 1,6 vezes maior no experimental. A média do consumo de dieta sempre foi
significativamente menor no experimental, exceto na segunda semana. O peso do
tecido adiposo foi menor no grupo experimental. Houve diferença estatística nas
seguintes dosagens: transaminases, ureia, triacilglicerol, malondialdeído, e β-
hidroxibutirato. Com exceção do triacilglicerol, todos foram maiores no grupo
experimental. O peso do tecido adiposo periovariano foi menor no grupo de dieta
experimental. A média do peso do fígado foi maior no grupo experimental. O aspecto
macroscópico do fígado foi normal em ambos os grupos, e o estudo histológico do
grupo experimental demonstrou sinusoides hepáticos alargados, hepatócitos de
tamanho diminuído e glicogênio hepático diminuído. Não foi identificada autofagia
dependende de Blimp-1 no estudo. A citometria de fluxo demonstrou que, o grupo
experimental apresentou 30,85 ± 2,20% de células inviáveis; e no controle 13,22 ±
1,43%, com p<0,05. Houve correlação positiva entre o percentual de células inviáveis e
malondialdeído plasmático, e negativa com triacilglicerol plasmático, o que pode sugerir
serem estes possíveis indicadores plasmáticos de lesão hepática, associados à dieta
experimental. Conclui-se que a dieta experimental levou à lesão hepática (apoptose) no estudo. / For many decades, ketogenic diets as Atkins diet, composed of 0% - 20% calories
from carbohydrate, 55% - 65% protein and 25% - 35% lipids have been used to
weight loss. More recently, the indication was expanded to some neurological
diseases. The overall objective of the study is to assess the effect of a lowcarbohydrate,
high-protein and lipids diet on the liver of rats by plasma biochemical
analysis, histology and cytometric liver flow study.The hypothesis is that as the liver
gets directly absorption of macronutrients, low- carbohydrates, high-protein and lipids
diets can injure hepatocytes. Twenty female rats were divided into control diet group
and experimental diet group. The control group received an AIN-93M diet and the
experimental one a diet based on the Atkins's diet with carbohydrates (8.44%),
protein (57.19%), lipids (34.36%) and water, ad libitum, for eight weeks. The rats in
estrous cycle were anesthetized, weighted, capillary glucose was dosed and blood
was collected for measurement of transaminases, urea, creatinine, triglycerides,
cholesterol, high-density lipoprotein, low-density lipoprotein, β-hydroxybutyrate,
malonaldehyde, glucagon, insulin, interleukin-6 and tumor necrosis factor. Six liver
fragments were removed and placed in physiological solution at 0.9% for flow
cytometry and the rest of the organ was put in a neutral buffered formalin 10%
solution for optical microscopy. The white adipose tissue bilateral periovarian was
pulled out and weighted. The results were presented as a mean and standard
deviation, and the comparison between the average with Student's t-test unpaired,
and ANOVA followed by Tukey test. Pearson's test was used for correlation studies.
It was considered a statistically significant difference at p <0.05. The average weight
of the two groups increased during the study. At the beginning and in the end of the
study, there was no statistical difference in mean weight. The average water intake
was 1.6 times higher in the experimental group. The average dietary intake was
significantly lower in the experimental group, except in the second week. There was
a statistical difference between the groups in only the following dosages:
transaminases, urea, triglycerides, malondialdehyde, and β-hydroxybutyrate. Adipose
tissue weight was smaller in the experimental group. The mean weight of liver was
greater in the experimental. The macroscopic appearance of the liver was normal in
both groups and the histological study demonstrated that the experimental group had
an extended hepatic sinusoid, decreased the size of hepatocytes and decreased liver
glycogen. Autophagy has not been identified. Flow cytometry showed statistical
significance, in the experimental group 30.85% ± 2.20% were inviable cells while in
the control group 13.22 ± 1.43% were, with p <0.05. There was a positive correlation
between the percentage of non-viable cells and plasma malondialdehyde and a
negative with plasma triglycerides suggesting that they are possible plasma
indicators of hepatic injury associated with the experimental diet. Based on these
results, it can be concluded that a low-carbohydrate and high-protein and lipids diet
leads to liver damage, and apoptosis is the main cell injury process

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:https://app.uff.br/riuff:1/5499
Date12 January 2018
CreatorsMonteiro, Maria Emília Lopes
ContributorsSoares, Rosa Leonôra Salerno, Cruz Filho, Rubens Antunes da, Bezerra, Flávia Fioruci, Braulio, Valeria Bender, Xavier, Analúcia Rampazzo, Azeredo, Vilma Blondet
PublisherNiterói
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFF, instname:Universidade Federal Fluminense, instacron:UFF
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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