Magister en Bioquímica área de
especialización en Bioquímica Clínica y
Memoria para optar al título profesional de Bioquímica / En el cáncer ovárico epitelial (COEI), el ovario pierde el control normal de la angiogénesis.
El COE exhibe alta expresión del Factor de Crecimiento Nervioso (NGF), un factor proangiogénico.
Por otro lado, la calreticulina (CRT) es una proteína multifuncional con
propiedades anti-angiogénicas. Su exposición en la cara extracelular de la membrana plasmática
de células tumorales en proceso de muerte celular es necesaria para que éstas sean reconocidas y
fagocitadas por células dendríticas.
El objetivo de este trabajo fue evaluar la expresión de CRT en muestras humanas: ovarios
normales inactivos, tumores benignos, tumores borderline y muestras de cáncer ovárico epitelial.
Además, evaluar si el NGF regula la expresión de CRT en células epiteliales normales de la
superficie ovárica humana (células HOSE) y en una línea celular de cáncer ovárico epitelial
(A2780).
Los niveles de mRNA y proteicos de CRT fueron evaluados mediante RT-PCR, western-blot
e inmunohistoquímica en un total de 67 muestras ováricas humanas. La expresión de CRT
inducida por estimulación con NGF en líneas celulares fue evaluada por RT-PCR, western-blot e
inmunocitoquímica.
Los niveles de mRNA de CRT aumentaron en muestras de cáncer ovárico epitelial
comparado con ovarios normales inactivos, tumores benignos y tumores borderline. Los niveles
proteicos resultaron mayores en cáncer con respecto a tumores benignos y tumores borderline.
Al estimular las líneas celulares HOSE y A2780 con NGF (100 ng/ml) por 30 minutos, no se
observaron cambios estadísticamente significativos en los niveles de mRNA. Sin embargo, a
través de inmunocitoquímica y western-blot se observó un aumento significativo en los niveles
proteicos de CRT al estimular con NGF comparado con la situación control. Este efecto fue
revertido por GW441756, un inhibidor específico del receptor de NGF, TRKA.
Estos resultados sugieren que NGF regula la expresión de CRT en células epiteliales ováricas
mediante la activación de su receptor de alta afinidad TRKA / In epithelial ovarian cancer (EOC), the ovary loses the normal control of angiogenesis. EOC
exhibits high expression of Nerve Growth Factor (NGF), a proangiogenic protein. On the other
hand, calreticulin (CRT) is a multifunctional protein with anti-angiogenic properties. Its
exposure on the cell membrane of dying tumor cells is necessary to promote their recognition
and engulfment by dendritic cells.
The aim of this work was to evaluate CRT expression in human samples: normal inactive
ovaries, benign tumors, borderline tumors and epithelial ovarian cancer samples. Besides, to
evaluate whether NGF regulates CRT expression in human ovarian surface epithelium cells
(HOSE cells) and in an epithelial ovarian cancer cell line (A2780).
Calreticulin mRNA and protein levels were analyzed by RT-PCR, western-blot and
immunohistochemistry in 67 human ovarian samples. CRT expression induced by NGF
stimulation in cell lines was evaluated by RT-PCR, western-blot and immunocytochemistry.
CRT mRNA levels were elevated in epithelial ovarian cancer samples as compared to
inactive normal ovaries, benign tumors and borderline tumors. CRT protein levels, evaluated by
western-blot, were increased in epithelial ovarian cancer with respect to benign and to borderline
tumors. When HOSE and A2780 cell lines where stimulated with NGF (100 ng/ml) for 30
minutes, no significant increase in CRT mRNA levels, evaluated by RT-PCR, was found.
However, by immunocytochemistry and western-blot there was a significant increase in CRT
protein levels after NGF stimulation, as compared to controls. This effect was reverted by
GW441756, a TRKA specific inhibitor, receptor for NGF.
These results suggest that Nerve Growth Factor regulates CRT expression in epithelial
ovarian cells through TRKA activation, its high affinity receptor
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/105209 |
| Date | January 2011 |
| Creators | Vera Castillo, Carolina Andrea |
| Contributors | Romero Osses, Carmen, Ferreira Vigouroux, Luís, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacéuticas |
| Publisher | Universidad de Chile, CyberDocs |
| Source Sets | Universidad de Chile |
| Language | Spanish |
| Detected Language | English |
| Type | Tesis |
| Rights | Vera Castillo, Carolina Andrea |
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