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Análisis del efecto antimicótico de los extractos de Bursera linanoe

Calva Ariza, Priscila 13 December 2012 (has links)
El aumento de la frecuencia y la gravedad de los casos con micosis en nuestra sociedad y la aparición de levaduras cada vez más resistentes a los tratamientos utilizados, han llevado al estudio de nuevas formas de medicamentos como los provenientes de productos naturales. En nuestro país hay una enorme cantidad de plantas, pero no las aprovechamos al cien por ciento. Debido a esta situación, el objetivo de este trabajo es analizar el efecto antimicótico de los extractos obtenidos de los tallos de Bursera linanoe con diferentes disolventes: hexano, cloroformo, acetato de etilo, etanol y agua. Se logró establecer que el extracto hexánico y el de acetato de etilo poseen una actividad antifúngica, por lo cual se separaron los compuestos activos presentes en cada uno de ellos por cromatografía en columna. Las fracciones obtenidas fueron probadas contra tres levaduras (dos cepas de Candida albicans y una cepa de Candida melibiosica) y analizadas por resonancia magnética nuclear. De todas las fracciones con actividad antimicótica se aislaron, purificaron e identificaron los compuestos y se probaron con las mismas cepas para verificar su efecto. Se obtuvieron 4 compuestos puros: linalol, acetato de linalol, acetato de β-amirina y β-sitosterol; de los cuales solo dos tuvieron un efecto antimicótico: linalol y acetato de linalol, aunque el β-sitosterol también mostró un ligero efecto. Estos resultados nos hacen pensar que los compuestos linalol y acetato de linalol son fuertes antimicóticos que pueden llegar a ser un tratamiento eficaz contra la micosis. Los otros compuestos puros no tuvieron efecto, por lo que podemos concluir que su efecto es gracias a la combinación de diferentes metabolitos que al ser separados disminuyen o pierden su actividad. Para concluir dos aspectos importantes: Los extractos de la planta, los hexánicos y los de acetato de etilo, tienen un efecto antimicótico notable; y se lograron purificar cuatro compuestos (linalol, acetato de linalol, acetato de β-amirina y β-sitosterol), de los cuales linalol y acetato de linalol poseen actividad antifúngica. SUMMARY The increased frequency and severity of cases with mycosis in our society and the emergence of increasingly resistant yeast to treatments have led to the study of new forms of drugs, such as natural products. In our country there are huge amounts of plants, but we don´t use them as much as we should. Due to this situation, the aim of this study is to analyze the antifungal effect of the extracts obtained from Bursera linanoe with different solvents: hexane, chloroform, ethyl acetate, ethanol and water. The results showed that the extract obtained with hexane and ethyl acetate possess antifungal activity, so both of them were separated by column chromatography to obtain the active compounds present in each of them. The fractions obtained were tested against three yeasts (two strains of Candida albicans and one strain of Candida melibiosica) and analyzed by nuclear magnetic resonance. Of all the fractions with antifungal activity, the purified compounds were identified and tested with the same strains to verify the effect. Four pure compounds were obtained: linalool, linalool acetate, ethyl β-amyrin and β-sitosterol, of which only two of them showed an antifungal effect: linalool and linalool acetate, although β-sitosterol also showed a slight effect. These results suggest that compounds linalool and linalool acetate are a strong antifungal that can become an effective treatment for mycosis. Even though the others pure compounds had no effect, we can conclude that this situation is due to the combination of different metabolites and when they are separated they lose or decrease their activity. To summarize, there are two important aspects: the first one is that the plant extracts, the one obtained with hexane and those obtained with ethyl acetate, have a remarkable antifungal effect, and the second one is that Bursera linanoe purification was achieved with four compounds (linalool, linalool acetate, ethyl β-amyrin and β-sitosterol), and two of them (linalool and ethyl linalool) presented antifungal activity.
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Análisis de la expresión de la isoforma DNMT3B3Δ5 en respuesta a la desmetilación por 5-azacitidina en linfocitos humanos y la línea celular HCT116

Flores León, Manuel 17 May 2013 (has links)
No description available.
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Aplicação de metodos fotoquimicos e bioquimicos na detecção do cancer

Gisler, Gastão Cruz 17 July 2018 (has links)
Orientador : Nelson Eduardo Duran Caballero / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-17T02:54:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gisler_GastaoCruz_M.pdf: 4159634 bytes, checksum: 43f2ad231f6289cfd80818e79b0745fe (MD5) Previous issue date: 1982 / Mestrado
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Proteômica de Paracoccidioides brasiliensis : uma análise quantitativa das fases miceliana e leveduriforme e da transição dimórfica

Rezende, Tereza Cristina Vieira de 11 October 2011 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2011. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2012-02-08T13:54:16Z No. of bitstreams: 1 2011_TerezaCristinaVieiraRezende.pdf: 7799530 bytes, checksum: ac6b8b811bee8d8f780e0d60ae6f7bc8 (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2012-02-15T11:45:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_TerezaCristinaVieiraRezende.pdf: 7799530 bytes, checksum: ac6b8b811bee8d8f780e0d60ae6f7bc8 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-15T11:45:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_TerezaCristinaVieiraRezende.pdf: 7799530 bytes, checksum: ac6b8b811bee8d8f780e0d60ae6f7bc8 (MD5) / Dimorfismo é uma característica importante para sobrevivência fúngica em diferentes ambientes e tem sido relacionado com a virulência. O fungo ascomiceto, Paracoccidioides brasiliensis, agente causador da paracoccidioidomicose, pode crescer nas fases de micélio ou de levedura. A patogenicidade do P. brasiliensis é frequentemente associada com a transição dimórfica, de saprófita a patogênico, mas os mecanismos que regulam esse processo permanecem obscuros. Uma das maneiras de estudar esse fenômeno seria isolar e caracterizar proteínas que são especificamente expressas em um dos estágios do ciclo de vida e/ou durante a diferenciação. Eletroforese bidimensional (2-DE) foi utilizada para comparar o proteoma de micélio e de levedura do isolado Pb01 e após 22 h de transição de micélio para levedura. Os géis corados pela prata de três replicatas biológicas independentes foram digitalizados e as imagens foram analisadas utilizando-se o software Image Master 2D Platinum 6.0 software (GE Healthcare). A detecção dos spots e o pareamento foram realizados. A intensidade dos spots foi normalizada e as análises estatísticas avaliada por one-way ANOVA. Os spots de interesse obtidos dos géis 2-D foram retirados, digeridos com tripsina e os peptídeos foram então analisados por MS e/ou MS/MS. Um total de 100 proteínas/isoformas foi identificado; 81 foram diferencialmente expressas nas três fases do fungo, enquanto que 19 proteínas/isoformas foram constitutivamente expressas. A expressão de proteínas como superóxido dismutase e peroxiredoxina mitocondrial foi mais abundante na fase miceliana. Nos estágios iniciais da transição (22 h) algumas enzimas envolvidas na glicólise, como enolase e fosfoglicomutase, estão aumentadas. Proteínas de choque térmico e ATP sintase também estão significantemente aumentadas durante o evento de transição. Proteínas preferencialmente expressas na fase leveduriforme foram identificadas. Muitas das enzimas da via glicolítica e algumas enzimas do ciclo do glioxalato e metabolismo de lipídeos foram mais abundantes em levedura. Para validar os resultados dos géis 2-D foi realizado western blotting de seis proteínas diferentes, e os resultados foram confirmados. Os resultados foram validados por RT-PCR em tempo real nas três condições estudadas, incluindo conídio e transição de conídio para levedura. Os resultados demonstram uma mudança no metabolismo durante a transição de micélio para levedura; o mesmo padrão foi evidenciado na transição de conídio para levedura. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Fungal dimorphism is important for survival in different environments and has been related to virulence. The ascomycete Paracoccidioides brasiliensis, the causative agent of paracoccidioidomycosis, can grow as mycelia or yeast. The pathogenicity of P. brasiliensis is frequently associated with the dimorphic shift, from a saprobe to a pathogenic lifestyle, but the mechanisms that regulate the process is still poorly understood. One way to study this phenomenon is to isolate and characterize proteins that are specifically expressed in one of the stages of the life cycle and/or during differentiation. Two-dimensional gel electrophoresis we used to investigate the proteins expressed differentially during transition from mycelia to yeast forms of isolate Pb01 after 22 h of temperature shift. Silver-stained gels of three independent biological replicates were digitalized and the images were analyzed using the ImageMaster 2D Platinum 6.0 software (GE Healthcare). Spot detection and matching was performed. Spot intensities were normalized and the statistics analyses were estimated by one-way ANOVA. The spots of interest were excised, in-gel digested with trypsin, and the peptides were then analyzed by MS and/or MS/MS. A total of 100 proteins/isoforms were identified; 81 were differentially expressed in the three phases of the fungus, whereas 19 proteins/isoforms were constitutively expressed. Enzymes such as superoxide dismutase and mitochondrial peroxiredoxin have been detected as abundant in the mycelium phase. After the early stage of transition (22 h) some enzymes involved in glycolysis, such as enolase and phosphoglutomutase, were increased. Heat shock proteins and ATP synthase were also significantly increased in the transition event. Proteins preferentially expressed in the yeast phase were identified. Most of the enzymes of glycolysis, and some of the glyoxylate cycle and lipid metabolism were more abundant in yeast cells. To validate the 2-D gels results we performed western blotting of six different proteins, and the results were confirmed. The results were also validated by real-time RT-PCR in the three studied conditions, including conidia and conidia-yeast transition. The results demonstrated a shift in the metabolism during transition from mycelia to yeast cell; the same patterns were evidenced in the conidia to yeast transition.
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Avaliação Funcional e Estrutural de Variantes Sintéticos do Peptídeo Antimicrobiano do tipo Hairpin MPB-1

Sousa, Daniel Amaro 08 February 2012 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular. 2012. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2012-05-14T15:56:45Z No. of bitstreams: 1 2012_DanielAmaroSousa.pdf: 1935481 bytes, checksum: fa30fabb3a2bd819c71f8cf14a323392 (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2012-05-15T11:52:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_DanielAmaroSousa.pdf: 1935481 bytes, checksum: fa30fabb3a2bd819c71f8cf14a323392 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-15T11:52:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_DanielAmaroSousa.pdf: 1935481 bytes, checksum: fa30fabb3a2bd819c71f8cf14a323392 (MD5) / A escassez de novas ferramentas para controle dos agentes microbianos responsáveis por infecções humanas consiste em um grande desafio nos dias atuais. Muitas pesquisas têm sido focadas na busca e caracterização de peptídeos antimicrobianos, categorizados como modelos promissores de novos fármacos antinfeciosos. Neste sentido as plantas constituem um amplo campo de descoberta para novos peptídeos, que podem ser usados como uma ferramenta para a produção biotecnológica de novos compostos. O peptídeo MBP-1 (Maize Basic Peptide), anteriormente relatado em sementes de milho, faz parte de uma classe de peptídeos antimicrobianos (hairpin-like) que tem chamado atenção devido a um novo tipo de enovelamento descrito, caracterizado pela presença de duas hélices conectadas entre si por duas pontes dissulfeto. Desta forma neste trabalho, o peptídeo MBP-1 foi sintetizado quimicamente e sua atividade antimicrobiana avaliada. O mesmo se apresentou efetivo contra as bactérias Gram-negativas patogênicas humanas Escherichia coli, Klebisiella pneumoniae e Pseudomonas aeruginosa, mas foi ineficiente contra a bactéria Gram-positiva Staphylococcus aureus, assim como contra o fungo Aspergillus fumigatus. O peptídeo apresentou ainda baixa atividade hemolítica nas concentrações testadas. Foram realizados testes com variantes sintéticos do MBP-1 que tiveram suas cisteínas ou triptofano substituídos por alanina a fim de melhor entender seu mecanismo de ação. Este teste demonstrou que a ausência de cisteínas ou triptofano diminui ou anula a atividade do peptídeo, evidenciando assim a importância destes resíduos para atividade. Ao relacionar as atividades de cada peptídeo com os modelos gerados por homologia, pode-se notar que a estabilização das porções terminais das α- hélices por uma ponte dissulfeto parece ser mais importante para atividade bactericida do que estabilizar o interior da molécula. Em geral, estes resultados são úteis para compreensão de algumas características necessárias a atividade do peptídeo MBP-1 e possivelmente dos peptídeos hairpin-like, contribuindo assim com aplicações futuras em ferramentas biotecnológicas que possam ser usadas no tratamento de infecções. ___________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The lack of novel tools for microbial agents control responsible for human infections consists of a great challenge today. Currently, many researches have been focused on the search and characterization of antimicrobial peptides, which have been classified as models for innovative promising anti-infective drugs. In this sense, the plants provide a wide contribution to the field of discovery for unusual peptides that can be used as tools for biotechnological products. The MBP-1 (Maize Basic Peptide), previously reported in corn, is part of a class of antimicrobial peptides (hairpin-like) that has drawn attention due to a new type of folding recently described, characterized by the presence of two -helices connected by two disulfide bonds. Thus, in this work, the MBP-1 was chemically synthesized and its functional characterization activity was further performed. The MBP-1 was active against Gram-negative human pathogenic E. coli, K. pneumoniae and P. aeruginosa but was ineffective against the Gram-positive S. aureus, as well as against the fungus A. fumigatus. The peptide also presented low hemolytic activity at evaluated concentrations. Furthermore, bioassays were performed with MBP-1 synthetic variants that had their cysteines or tryptophan replaced by alanine, in order to better understand the peptide mechanism of action. Those assays demonstrated that the absence of cysteine or tryptophan reduces or suppresses the antimicrobial peptide activity, thus evidencing the importance of these residues for bactericidal activity. By linking the activities of each peptide with the three-dimensional models generated by homology modeling, it can be noted that the stabilization of the terminal portions of α-helices with a disulfide bond seems to be more important for bactericidal activity than to stabilize the interior of the molecule. In general, these results here presented could be useful for a better understanding of some features necessary for activity of MBP-1 and possibly for the hairpin-like peptides, thus contributing to future applications in biotechnology tools that could be used to treat infections.
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Evaluación de respuesta inmune protectora de vacuna oral de subunidad de la proteína inmunológica de superficie de Streptococcus agalactiae en modelo murino

Leyton Galaz, Yessica January 2016 (has links)
Tesis para optar al grado de Magíster en Bioquímica área de Especialización en Bioquímica Clínica / Streptococcus agalactiae (SGB) es una bacteria Gram positiva anaeróbica facultativa capaz de colonizar el tracto genitourinario de un 15 a un 40% de mujeres sexualmente activas. En la mayoría de los casos la infección con este patógeno es asintomática pero en neonatos puede originar sepsis, meningitis y neumonía. A partir del año 1990 el CDC (Center for Disease Control and Prevention) ha implementado una serie de protocolos de prevención dirigidos a mujeres embarazadas los cuales constan de pruebas microbiológicas realizadas entre las 35 y 37 semanas de gestación y la aplicación de antibióticos intraparto en mujeres colonizadas. A pesar de que medidas han tenido un alto impacto en la disminución de la incidencia de la infección por SGB este patógeno persiste como el único y más frecuente aislado desde la sangre o del fluido cerebroespinal de infantes menores de 3 meses de edad y de mujeres con infecciones intraparto en Estados Unidos y en otros países industrializados. Numerosos estudios realizados a neonatos sanos nacidos de madres colonizadas con SGB indican que estos tienen niveles superiores de anticuerpos IgG transferidos transplacentalmente que aquellos que desarrollaron la infección. Basado en este hecho actualmente se trabaja arduamente en el desarrollo de una vacuna capaz proteger a mujeres embarazadas y sus infantes. En la actualidad, vacunas en base a polisacáridos conjugados están en Fase clínica III, con el inconveniente de que la vacuna ensayada será serotipo dependiente y solamente inducirá una respuesta inmune protectora contra los serotipos incluidos en su formulación (3 de 10 serotipos). Vacunas en base a proteínas conservadas de SGB se encuentran en estudio, una de ellas es la proteína SIP (Surface Immunogenic Protein), con la cual se trabaja en la Sección de Biotecnología del ISPCH. En este estudio se evaluará la respuesta inmune protectora de un prototipo de vacuna en base a la proteína recombinante SIP de SGB, evaluando parámetros inmunológicos que permitan demostrar la inducción de inmunidad protectora en modelo ratón
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Expresión de calreticulina y su relación con el factor de crecimiento nervioso en cáncer ovárico epitelial

Vera Castillo, Carolina Andrea January 2011 (has links)
Magister en Bioquímica área de especialización en Bioquímica Clínica y Memoria para optar al título profesional de Bioquímica / En el cáncer ovárico epitelial (COEI), el ovario pierde el control normal de la angiogénesis. El COE exhibe alta expresión del Factor de Crecimiento Nervioso (NGF), un factor proangiogénico. Por otro lado, la calreticulina (CRT) es una proteína multifuncional con propiedades anti-angiogénicas. Su exposición en la cara extracelular de la membrana plasmática de células tumorales en proceso de muerte celular es necesaria para que éstas sean reconocidas y fagocitadas por células dendríticas. El objetivo de este trabajo fue evaluar la expresión de CRT en muestras humanas: ovarios normales inactivos, tumores benignos, tumores borderline y muestras de cáncer ovárico epitelial. Además, evaluar si el NGF regula la expresión de CRT en células epiteliales normales de la superficie ovárica humana (células HOSE) y en una línea celular de cáncer ovárico epitelial (A2780). Los niveles de mRNA y proteicos de CRT fueron evaluados mediante RT-PCR, western-blot e inmunohistoquímica en un total de 67 muestras ováricas humanas. La expresión de CRT inducida por estimulación con NGF en líneas celulares fue evaluada por RT-PCR, western-blot e inmunocitoquímica. Los niveles de mRNA de CRT aumentaron en muestras de cáncer ovárico epitelial comparado con ovarios normales inactivos, tumores benignos y tumores borderline. Los niveles proteicos resultaron mayores en cáncer con respecto a tumores benignos y tumores borderline. Al estimular las líneas celulares HOSE y A2780 con NGF (100 ng/ml) por 30 minutos, no se observaron cambios estadísticamente significativos en los niveles de mRNA. Sin embargo, a través de inmunocitoquímica y western-blot se observó un aumento significativo en los niveles proteicos de CRT al estimular con NGF comparado con la situación control. Este efecto fue revertido por GW441756, un inhibidor específico del receptor de NGF, TRKA. Estos resultados sugieren que NGF regula la expresión de CRT en células epiteliales ováricas mediante la activación de su receptor de alta afinidad TRKA / In epithelial ovarian cancer (EOC), the ovary loses the normal control of angiogenesis. EOC exhibits high expression of Nerve Growth Factor (NGF), a proangiogenic protein. On the other hand, calreticulin (CRT) is a multifunctional protein with anti-angiogenic properties. Its exposure on the cell membrane of dying tumor cells is necessary to promote their recognition and engulfment by dendritic cells. The aim of this work was to evaluate CRT expression in human samples: normal inactive ovaries, benign tumors, borderline tumors and epithelial ovarian cancer samples. Besides, to evaluate whether NGF regulates CRT expression in human ovarian surface epithelium cells (HOSE cells) and in an epithelial ovarian cancer cell line (A2780). Calreticulin mRNA and protein levels were analyzed by RT-PCR, western-blot and immunohistochemistry in 67 human ovarian samples. CRT expression induced by NGF stimulation in cell lines was evaluated by RT-PCR, western-blot and immunocytochemistry. CRT mRNA levels were elevated in epithelial ovarian cancer samples as compared to inactive normal ovaries, benign tumors and borderline tumors. CRT protein levels, evaluated by western-blot, were increased in epithelial ovarian cancer with respect to benign and to borderline tumors. When HOSE and A2780 cell lines where stimulated with NGF (100 ng/ml) for 30 minutes, no significant increase in CRT mRNA levels, evaluated by RT-PCR, was found. However, by immunocytochemistry and western-blot there was a significant increase in CRT protein levels after NGF stimulation, as compared to controls. This effect was reverted by GW441756, a TRKA specific inhibitor, receptor for NGF. These results suggest that Nerve Growth Factor regulates CRT expression in epithelial ovarian cells through TRKA activation, its high affinity receptor
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Participación de la vía WNT/[beta]-catenina en la regulación de la expresión de la isoforma C de la enzima convertidora de endotelina-1 (ECE-1c) y su rol en el fenotipo tumoral invasivo en cáncer de colon

Cataldo Bascuñán, Luis Rodrigo January 2010 (has links)
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Desenho racional e produção de análogos do peptídeo antimicrobiano Hylina a1 com maior potencial terapêutico

Costa, Fabiano José Queiroz 23 January 2012 (has links)
Dissertação (mestrado —Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2012. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2012-05-22T13:20:12Z No. of bitstreams: 1 2012_FabianoJoseQueirozCosta.pdf: 1711681 bytes, checksum: 0d9c0dec152fb69bb8583c87ffdf65ac (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2012-05-24T12:01:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_FabianoJoseQueirozCosta.pdf: 1711681 bytes, checksum: 0d9c0dec152fb69bb8583c87ffdf65ac (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-24T12:01:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_FabianoJoseQueirozCosta.pdf: 1711681 bytes, checksum: 0d9c0dec152fb69bb8583c87ffdf65ac (MD5) / Desde os primórdios da terapêutica antimicrobiana têm-se relatos de microrganismos resistentes às drogas antimicrobianas clássicas. Com o seu uso indiscriminado, cada vez mais vêm surgindo microrganismos resistentes aos antimicrobianos disponíveis. Por mais dinâmicas que sejam as indústrias farmacêuticas na busca por novas drogas, elas não conseguem acompanhar o espantoso fenômeno da multirresistência apresentada por muitos microrganismos. Esta constante mudança nos perfis de sensibilidade dos microrganismos conduz a uma incessante busca por novas drogas antimicrobianas, onde os peptídeos antimicrobianos se destacam como agentes promissores. As secreções cutâneas dos anfíbios são uma riquíssima fonte de peptídeos antimicrobianos. O presente estudo avaliou a atividade biológica de dois análogos sintéticos da Hylina a1, um peptídeo antimicrobiano isolado da espécie de anuro Hypsiboas albopunctatus. Os dois análogos, denominados Ha1_1996 e Ha1_1883, foram produzidos por síntese química manual pela técnica Fmoc, purificados por meio de cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa (HPLC-RP) e sua homogeneidade, bem com, a correção dos produtos produzidos avaliadas por espectrometria de massas tipo MALDI-TOF. Após confirmação da pureza, os análogos foram utilizados em ensaios in vitro com o objetivo de se avaliar suas atividades antibacterianas, fungicidas, micobactericidas e hemolíticas. Os dois análogos apresentaram atividade antimicrobiana contra cepas de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, inclusive frente à cepas de Staphylococcus aureus meticilina-resistente (MRSA) e Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC). Também apresentaram atividade fungicida contra três espécies de Candida, além de atividade micobactericida contra duas cepas de Mycobacterium tuberculosis. Apesar da pronunciada atividade hemolítica frente a eritrócitos humanos (tipo O+) e ao efeito citolítico observado sobre leucócitos humanos, deve ser levado em conta que refinamentos na estrutura desses peptídeos podem levar ao surgimento de análogos com propridedades antimicrobianas melhoradas ou mantidas e perda ou redução da atividade hemolítica. Espera-se com isto que os peptídeos antimicrobianos se constituam em novas armas de um arsenal medicamentoso capaz de combater microrganismos multirresistentes. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Since the beginning of antimicrobial therapy reports of microorganisms resistant to conventional antimicrobial drugs have been described. Due to its indiscriminate use, more resistant microorganisms to the available antimicrobials are emerging. For more dynamic than the pharmaceutical companies are in search for new drugs, they can not keep up the amazing phenomenon of multidrug resistance shown by many microorganisms. This constant change in the sensitivity profiles of microorganisms leads to an endless search for new antimicrobial drugs, where antimicrobial peptides stand out as promising agents. The amphibians’ skin secretions are a rich source of antimicrobial peptides. The present study characterized biologically two synthetic analogues of Hylin a1, an antimicrobial peptide isolated from the anuran species Hypsiboas albopunctatus. Both analogs, named Ha1_1996 and Ha1_1883, were produced by manual chemical synthesis by Fmoc technique, purified by reversed-phase high-performance liquid chromatography (HPLC-RP) and purity assessment, as well as, the quality of the synthetic peptides produced were evaluated by MALDI-TOF mass spectrometry. After confirmation of their purity, these two analogs were tested on in vitro assays to evaluate their antibacterial, fungicidal, hemolytic and mycobactericidal activities. Both analogues showed antimicrobial activity against Gram-positive and Gram-negative bacterial strains, including methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC). They also showed antifungal activity against three species of Candida, and mycobactericidal activity against two strains of Mycobacterium tuberculosis. Despite pronounced hemolytic activity against human erythrocytes (type O+ ) and cytolytic effects on human leukocytes, additional refinements in their structures can lead to the development of analogues with antimicrobial properties improved or maintained and loss or reduction of hemolytic activity. It is thus expected that antimicrobial peptides become a new weapons arsenal able to combat the multiresistant microorganisms.
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Hidratação com soluções eletrolíticas enterais de manutenção contendo diferentes fontes de energia administradas em fluxo contínuo via nasorruminal em bovinos / Fluid therapy with maintenance electrolyte solutions containing different glicaemic precursors administered in continuous flow by nasorruminal route in bovines

Ermita, Pedro Ancelmo Nunes 27 February 2018 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-04-10T14:01:10Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2684709 bytes, checksum: 6aa0509934b41f48c4d6f6a12a738f58 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-10T14:01:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2684709 bytes, checksum: 6aa0509934b41f48c4d6f6a12a738f58 (MD5) Previous issue date: 2018-02-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos de três soluções eletrolíticas enterais sobre o bem-estar, equilíbrio hidroeletrolítico e ácido base em bovinos adultos. O delineamento experimental foi o crossover 6x3 (seis animais x três tratamentos). Os animais foram hidratados via nasorruminal em fluxo contínuo por 12h, a uma dose de 15 mL / kg / h. Todos os animais foram submetidos aos três tratamentos: solução contendo propionato de cálcio (SEPCa) - 4g de NaCl, 0,5g de KCl, 0,3g de MgCl 2 e 10g de propionato de cálcio diluídos em 1000mL de água (osmolaridade mensurada 299 mOsm / L); Solução com glicerol (SEGli) - 4g de NaCl, 0,5g de KCl, 0,3g de MgCl 2 e 10mL de glicerol diluídos em 1000 mL de água (osmolaridade mensurada 287 mOsm / L); Solução contendo propilenoglicol (SEPro) - 4g de NaCl, 0,5g de KCl, 0,3g de MgCl 2 e 15 mL de propilenoglicol diluídos em 1000 mL de água (osmolaridade mensurada 378 mOsm / L). Foi realizado exame físico (frequências cardíaca e respiratória, temperature retal, circunferência abdominal e movimentos ruminais) e obitdas amostras de sangue, urina e fezes a cada três horas de hidratação e uma amostra após 12h após a hidratação. As seguintes análises foram realizadas: sódio, potássio, cloreto, cálcio, magnésio, fósforo, uréia, creatinina, proteínas plasmáticas, glicose, lactato, osmolaridade sérica, densidade urinária, volume e pH urinário. Foram obtidas amostras de sangue em seringas contendo heparina lítio para determinação do pH, concentração de bicarbonato (HCO -3 ), excesso de base (BE), ânion gap e diferença de íons fortes (DIF). Não houveram sinais de estresse ou desconforto, todas as soluções promoveram diminuição do número de eritrócitos, da concentração de hemoglobina e do volume globular, sem causar alterações no leucograma. Houve diminuição das proteínas plasmáticas, da concentração de potássio e magnésio urinários e da densidade urinária. Foi observado aumento na glicemia e nas concentrações de sódio e cloreto urinários. Foram detectadas variações significativas no pH sanguíneo, HCO -3 e BE durante as 12h de hidratação. A solução SEPCa induziu alcalose metabólica discreta e reversível. As três soluções eletrolíticas admnistradas por sonda nasorruminal em fluxo contínuo, mostraram-se capazes de expandir a volemia com mínimos efeitos sobre o bem-estar, sem induzir o aparecimento de distúrbios hidroeletrolíticos. As soluções com propionato de cálcio e propilenoglicol apresentaram os melhores efeitos sobre a glicemia. As soluções SEGli e SEPro não causaram alterações no equilíbrio ácido base, podendo serem utilizadas com segurança na terapia de manuntenção fluidos em bovinos. / The objective of this study was to evaluate the efficacy of three enteral electrolyte solutions on the hydroelectrolytic balance of healthy cattle. The crossover design was 6x3 (six animals x three treatments). The animals were hydrated via nasoruminal in continuous flow for 12h, in a dose rate of 15mL / kg / h. All the animals was submitted to the three treatments: Solution with calcium propionate – 4g of NaCl, 0,5g of KCl, 0,3g of MgCl 2 and 10g of calcium propionate diluted in 1000mL of water (Measured osmolarity: 299 mOsm/L); Solution with Glycerol - 4g of NaCl, 0,5g of KCl, 0,3g of MgCl 2 , 1g of calcium acetate and 10 mL of glycerol in 1000mL of water (Measured osmolarity: 287 mOsm/L); Solution with propylene glycol - 4g of NaCl, 0,5g of KCl, 0,3g of MgCl 2 , 1g of calcium acetate and 15 mL of propylene glycol in 1000mL of water (Measured osmolarity: 378 mOsm/L). Was performed physical evaluation (heart and respiratory rate, rectal temperature, abdominal circumference, ruminal movements, and stool moisture) and blood and urine samples were performed every three hours of fluid therapy and another blood sample 12 hours after the end of fluid therapy. The following analyzes were performed: sodium, potassium, chloride, calcium, magnesium, phosphorus, urea, creatinine, plasma proteins, glucose, lactate, serum osmolarity, urinary density, and urinary volume. There was a decrease in plasma proteins, potassium and magnesium urinary concentration and urinary density. Blood samples were obtained in lithium heparin-containing syringes pH, carbon dioxide partial pressure (pC0 2 ), bicarbonate concentration (HC0 -3 ), base excess (BE), anion gap, difference ion strog (DIF), and urinary pH were determined. No signs of stress or discomfort was observed, all solutions caused a significant decrease in erythrocytes number, hemoglobin concentration and of hematocrit, without cause alterations in the leukogram. There was a decrease in plasma proteins, potassium and magnesium urinary concentration and urinary density. Increased glycemia, urinary sodium and chloride concentrations and urinary volume were registered. Significant changes in blood pH, HC0 -3 and BE during the 12 hours of fluid therapy were detected. The electrolytic solution containing calcium propionate (SEPCa) induced the arising of reversible slight metabolic alkalosis. The three electrolytes solutions administrated by nasogastric tube in continuous flow was showed secure, capable of expand the volemia, with minimal effects in the welfare of the heifers without causing hydroelectrolytic imbalances. Solutions with calcium propionate and propylene glycol had a better effect on glycaemia, The solutions containing glycerol (SEGli) and propylene glycol (SEpro) did not cause alterations in the acid balance balance and could be safely used in maintenance therapy of fluids in cattle.

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