Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Las vacunas basadas en células dendríticas (DCs) han surgido como una
herramienta prometedora en la inmunoterapia contra el cáncer debido a su
capacidad para estimular la respuesta inmune antitumoral. Recientemente, se
ha mostrado que DCs estimuladas con un lisado celular derivado de tres
líneas tumorales de melanoma alogénicas (TRIMEL) sometidas a heat shock,
inducen una potente respuesta inmunológica en pacientes con melanoma. El
lisado TRIMEL funciona tanto como una fuente de antígenos asociados a
tumor (TAA), así como induciendo la maduración de las DCs mediante
patrones moleculares asociados a daño, del inglés damage-associated
molecular patterns molecules (DAMPs). Dada las características de este
lisado, se identificó el perfil proteómico de TRIMEL con y sin heat shock (HS),
dando como resultado 71 proteínas diferencialmente sobreexpresadas por
efecto del HS. Luego de aplicar criterios adicionales, se seleccionaron las
proteínas Haptoglobina (HP), EIF4e y Anexina IV (ANX4), como candidatas a
DAMPs desconocidos que puedan explicar, al menos en parte, la capacidad
del lisado TRIMEL en la activación de DCs. Por lo anterior, el objetivo de este
trabajo fue evaluar el efecto de estas proteínas sobre distintos marcadores de
maduración en DCs humanas.
Se generaron DCs a partir de células mononucleares de sangre periférica
(PBMC) de ocho donantes sanos. HP, EIF4e y ANX4 se utilizaron como
estímulo de maduración por si solas o en combinación con TRIMEL sin HS.
Mediante citometría de flujo se evaluó la expresión de diversas moléculas de
superficie asociadas a DCs maduras: MHC-I, MHC-II, CD80, CD83, CD86 y
CCR-7.
Los resultados obtenidos en esta tesis mostraron que al estimular DCs con
EIF4e y HP se produce un incremento significativo en la expresión de los
marcadores de superficie MHC-I, CD80, CD83, CD86 y CCR7, sugiriendo que
estas proteínas podrían actuar como DAMPs de manera independiente. Sin
embargo, es necesario evaluar otros parámetros de funcionalidad celular
como el perfil de citoquinas secretado por las DCs estimuladas, capacidad
migratoria y la interacción con linfocitos T (LT), los cuales podrían demostrar
de forma más concluyente la actividad de estas proteínas como DAMPs. / Adscrito a Proyecto Fondecyt 11130607
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/147235 |
| Date | January 2016 |
| Creators | Lavín Flores, Francisca Dayane |
| Contributors | González Bergas, Fermín, Budini, Mauricio |
| Publisher | Universidad de Chile |
| Source Sets | Universidad de Chile |
| Language | Spanish |
| Detected Language | Spanish |
| Type | Tesis |
| Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Chile, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/ |
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