Las nuevas vacunas de subunidades están abriéndose paso dentro de la vacunología
veterinaria y entre ellas, las pseudopartículas virales o VLPs (por su nombre en inglés
“virus-like particles”) son una de las estrategias más atractivas que están abriendo
nuevas fronteras en la vacunación de animales. Las VLPs son estructuras proteicas
rígidas con un tamaño dentro del rango de los nanómetros, que presentan una geometría
muy bien definida y una espectacular uniformidad que mimetiza la estructura de los
virus nativos de los que proceden. Las VLPs tienen importantes ventajas en relación a la
seguridad por el hecho de carecer de genoma viral, que elimina cualquier riesgo
asociado a la replicación viral, reversión, recombinación o reorganizamiento genómico.
La proteína de la cápside del virus de la fiebre hemorrágica del conejo (por su nombre
en inglés “Rabbit haemorrhagic disease virus” o RHDV) es capaz de formar RHDVVLPs
y estas partículas han demostrado poseer una fuerte inmunogenicidad,
protegiendo al hospedador natural tras un desafío mortal. Además, estudios anteriores
apuntaron la posibilidad de usar RHDV-VLPs como vector para mejorar la
inmunoterapia contra el cáncer. Sin embargo, no hay estudios que hayan investigado la
posibilidad de usar las RHDV-VLPs como vector vacunal con epitopos de
enfermedades virales de animales.
El objetivo de esta tesis es estudiar el potencial inmunogénico de las RHDV-VLPs
como vectores vacunales de enfermedades virales en diferentes animales. En los dos
primeros estudios, se investigó la inmunogenicidad de las RHDV-VLPs en el modelo
murino, tanto in vitro como in vivo. Los resultados de estos estudios demostraron que el
epítopo insertado era procesado y presentado mediante MHC-I por células dendríticas y
que la inmunogenicidad dependía de los diferentes sitios de inserción. Las RHDV-VLPs
quiméricas fueron capaces de proteger a los ratones frente a un desafío viral. También,
la respuesta se vio alterada según la ruta de administración del antígeno. El tercer
estudio confirmó los resultados en ratón, pero esta vez en experimentos in vitro con
células de cerdo. Por último, se estudió inmunogenicidad de las RHDV-VLPs
quiméricas en cerdo. Los resultados mostraron que la ruta de administración y el
adjuvante determinaron la respuesta inmune después de la inmunización con las RHDVVLPs
quiméricas y que los animales presentaban muy buena respuesta inmune celular y
humoral, no solo frente a RHDV-VLPs sino frente al epítopo antigénico. Estudios posteriores se tendrán que abordar para demostrar la protección de los cerdos. En
conclusión, en esta tesis se demuestra el potencial de las RHDV-VLPs como
inmunógenos en dos sistemas animales diferentes. / New subunit vaccines are getting a foothold in veterinary vaccinology and virus-like
particles (VLPs) are one of the most appealing approaches opening up frontiers in
animal vaccines. VLPs are robust protein cages in the nanometer range exhibiting welldefined
geometry and remarkable uniformity that mimic the overall structure of the
native virions. VLPs have an important advantage in terms of safety; indeed, lacking the
genome of the virus avoid any of the risks associated with virus replication, reversion,
recombination or re-assortment. Rabbit haemorrhagic disease virus (RHDV) capsid
protein is able to form RHDV-VLPs and these particles showed a strong
immunogenicity and protected the natural host after a lethal challenge. Additionally,
previous studies described the possibility to use RHDV-VLPs as platform for the
insertion of foreign epitopes or for DNA packaging. Nowadays, one study has shown
the possibility to use RHDV-VLPs as carrier for improving cancer immunotherapies but
no studies have investigated the possibility to use RHDV-VLPs as vaccine vectors
carrying epitopes corresponding to viral animal diseases.
This thesis is aimed to study the potential immunogenicity of RHDV-VLPs as epitope
carriers for viral disease in different animal models. In the first two studies, the
immunogenicity of chimeric RHDV-VLPs was investigated in a murine system in vitro
and in vivo. Results from these studies demonstrated that the inserted epitope was
processed and presented in an MHC-I context by dendritic cells (DCs) and that the
different sites of insertion of the epitope influenced the immunogenicity of the VLPs.
Chimeric RHDV-VLPs were able to protect mice from a viral challenge. Also, the route
of antigen delivery influenced the immunogenicity of the particles. The third study
confirmed the initial results but this time in in vitro experiments using porcine cells.
Lastly, chimeric RHDV-VLPs were studied as immunogens in pigs. The results showed
that the delivery route and adjuvant influenced immune responses after chimeric
RHDV-VLP immunization and more importantly that pigs exhibited very good cellular
and humoral immune responses against not only RHDV-VLPs but also against the
antigenic epitope. Further studies have to be performed to prove protection in pigs. In
conclusion, in this thesis we demonstrated the potential of RHDV-VLPs as immunogens
in two different animal systems.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:TDX_UAB/oai:www.tdx.cat:10803/83962 |
| Date | 02 December 2011 |
| Creators | Crisci, Elisa |
| Contributors | Montoya González, María, Segalés Coma, Joaquim, Universitat Autònoma de Barcelona. Departament de Sanitat i d'Anatomia Animals |
| Publisher | Universitat Autònoma de Barcelona |
| Source Sets | Universitat Autònoma de Barcelona |
| Language | English |
| Detected Language | Spanish |
| Type | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis, info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
| Format | 200 p., application/pdf |
| Source | TDX (Tesis Doctorals en Xarxa) |
| Rights | ADVERTIMENT. L'accés als continguts d'aquesta tesi doctoral i la seva utilització ha de respectar els drets de la persona autora. Pot ser utilitzada per a consulta o estudi personal, així com en activitats o materials d'investigació i docència en els termes establerts a l'art. 32 del Text Refós de la Llei de Propietat Intel·lectual (RDL 1/1996). Per altres utilitzacions es requereix l'autorització prèvia i expressa de la persona autora. En qualsevol cas, en la utilització dels seus continguts caldrà indicar de forma clara el nom i cognoms de la persona autora i el títol de la tesi doctoral. No s'autoritza la seva reproducció o altres formes d'explotació efectuades amb finalitats de lucre ni la seva comunicació pública des d'un lloc aliè al servei TDX. Tampoc s'autoritza la presentació del seu contingut en una finestra o marc aliè a TDX (framing). Aquesta reserva de drets afecta tant als continguts de la tesi com als seus resums i índexs., info:eu-repo/semantics/openAccess |
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