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Estabelecimento in vitro e análise da variabilidade genética de acessos de espinheira-santa (Maytenus ilicifolia) coletados no Rio Grande do Sul / In vitro establishment and analysis of genetic variability of Maytenus ilicifolia accessions collected at Rio Grande do Sul State, Brazil

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Previous issue date: 2008-07-08 / Maytenus ilicifolia Mart. ex Reis., popularly known as espinheira-santa, is an
autochthonous specie belonging to Celastraceae family. Presents high medicinal
value for treatment of ulcers, chronicle gastritis, dyspepsia and indigestion. Due its
medicinal importance, have been an increase of extractivism in natural
populations. So, this specie is priority for conservation, to avoid the risk of genetic
erosion. The tissue culture is important because allows massive production of
plants free from pathogenic agents and genetically uniforms. The in vitro
establishment is the first phase of the micro propagation process, where the plant
material used can vary according to the finality of the work. Studies evidence that
genetic flux by seeds or pollen grains, and also the environment, mainly the
habitats, has the potential to improve the genetic variability of populations from
one locality. The objective of this work was to establish and evaluate the capacity
of in vitro multiplication of M. ilicifolia plantlet, and also analyze by AFLP the
genetic variability of 20 accessions collected in different localities from Rio Grande
do Sul State. For the in vitro establishment previously disinfected seeds were
inoculated in three different media: MS; MS + Active Coal (1g L-1) and MS +
Vermiculite. The variables analyzed were plantlet height and root length. For the
molecular analysis it was tested eight primers combinations. Values of genetic
similarities were calculated by Simple-matching coefficient and used to generate a
similarity dendrograma by UPGMA method. The analyzed variables showed
significant differences. The greater media for plantlet height (5.06 cm) and root
x
length (3.4 cm) were obtained in the MS medium with Vermiculite. The
morphological aspect of the roots must be considered, because the roots from
plantlets germinated in MS medium was very fibrous and without root hairs,
differently from plantlets germinated the MS medium + Vermiculite, were
presented roots adequate for absorption of nutrients from the medium culture. The
eight primers generate 455 eletrophoretical profiles, obtaining 100% of
polymorphism. The primers E-ACC/M-CAA, E-ACG/M-CTA and E-ACG/M-CTC
presented the greater number of eletrophoretical profile, 71 each, totalizing
46.80% of the total polymorphism. Dendrograma analysis showed a high
coefficient of correlation (r = 0.94), demonstrating high representativity from the
data of genetic similarity and those of groupings. By AMOVA it was verified that
89.33% of the total variability happened among individuals from the same
population. Based on the discussed can be concluded that the more adequate
medium for the in vitro establishment is the MS medium added of Vermiculite and
AFLP molecular markers allow the characterization and genetic variability
estimative of M. ilicifolia populations. / Maytenus ilicifolia Mart. ex Reis., popularmente conhecida como espinheira-santa,
é uma espécie autóctone pertencente à família Celastraceae que apresenta alto
valor medicinal para o tratamento de úlceras, gastrites crônicas, dispepsias e
indigestão. Devido a sua importância medicinal, houve um aumento no
extrativismo em populações naturais, tornando-a prioritária para a conservação, a
fim de evitar o risco de erosão genética. A cultura de tecidos tem importante papel
por proporcionar produção massiva de plantas, livres de agentes patogênicos e
geneticamente uniformes, sendo o estabelecimento in vitro a primeira fase do
processo de micropropagação, onde o material vegetal utilizado pode variar de
acordo com a finalidade do estudo. Estudos evidenciam que o fluxo gênico por
sementes ou dispersão de grãos de pólen, bem como o ambiente, principalmente
o habitat, tem o potencial de aumentar a variabilidade genética de populações de
uma mesma localidade. O objetivo deste trabalho foi estabelecer e avaliar a
capacidade de multiplicação in vitro de plântulas de M. ilicifolia, bem como,
analisar a variabilidade genética de 20 acessos coletados em diferentes
localidades no estado do Rio Grande do Sul, através da técnica AFLP. Para o
estabelecimento in vitro, sementes previamente desinfestadas foram inoculadas
em três meios diferentes: MS; MS + Carvão Ativado (1g L-1) e MS + Vermiculita.
As variáveis analisadas foram altura das plântulas e comprimento de raiz. Para a
viii
análise molecular foram testadas oito combinações de primers AFLP. Os valores
de similaridade genética foram calculados pelo Simple-matching coefficient e
utilizados para gerar o dendrograma de similaridade pelo método UPGMA. As
variáveis analisadas apresentaram diferença significativa, onde as maiores
médias para altura das plântulas (5,06 cm) e comprimento de raiz (3,4 cm), foram
obtidas no meio MS acrescido de Vermiculita. Observou-se que o aspecto
morfológico das raízes deve ser considerado, pois as raízes das plântulas
germinadas em meio MS apresentaram-se bastante fibrosas e com ausência de
pêlos radiculares, diferentemente das plântulas germinadas em meio MS +
Vermiculita, onde apresentaram raízes adequadas para a absorção de nutrientes
do meio de cultura. As oito combinações de primers geraram 455 perfis
eletroforéticos, com 100% de polimorfismo. Os primers E-ACC/M-CAA, E-ACG/MCTA,
E-ACG/M-CTC apresentaram o maior número de perfis eletroforéticos, 71
cada, totalizando 46,80% do polimorfismo total. Na análise do dendrograma foi
observado um alto coeficiente de correlação (r = 0,94), demonstrando elevada
representatividade dos dados de similaridade genética e os de agrupamento. Pela
AMOVA verificou-se que 89,33% da variabilidade total ocorreu entre indivíduos da
mesma população. Com base no exposto conclui-se que o meio mais adequado
para o estabelecimento in vitro é o meio MS acrescido de Vermiculita e
marcadores moleculares tipo AFLP permitem a caracterização e a estimativa da
variabilidade genética de populações de M. ilicifolia.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpel.edu.br:123456789/2024
Date08 July 2008
CreatorsRibeiro, Márcia Vaz
ContributorsCPF:44117337068, http://lattes.cnpq.br/7705049074927773, Barbieri, Rosa Lia, CPF:95709173053, http://lattes.cnpq.br/4561611881845259, Braga, Eugenia Jacira Bolacel
PublisherUniversidade Federal de Pelotas, Programa de Pós-Graduação em Fisiologia Vegetal, UFPel, BR, Biologia
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFPEL, instname:Universidade Federal de Pelotas, instacron:UFPEL
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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