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Previous issue date: 2010-09-10 / A Tuberculose (TB), causada pelo Mycobacterium tuberculosis, permanece entre as principais causas de morte por doen?as infecto-contagiosas no mundo e estima-se que um ter?o da popula??o mundial esteja infectada. A co-infec??o com o HIV e a emerg?ncia de TB resistente a m?ltiplas drogas representam um desafio a sa?de p?blica e tem estimulado a pesquisa por novos e mais efetivos agentes terap?uticos contra a doen?a. Os nucleot?deos pirimid?nicos s?o mol?culas essenciais em in?meras rea??es bioqu?micas e suas rotas de bioss?ntese s?o indispens?veis a progress?o da TB. Nesse contexto, a prote?na UMP quinase de M. tuberculosis (MtUMPK), que catalisa a fosforila??o de UMP a UDP, ? um alvo promissor para o desenho racional de drogas anti-TB. Neste trabalho ? reportado a clonagem da regi?o codificante do gene pyrH, a express?o da prote?na recombinante em E. coli e a purifica??o da enzima. Al?m disso, confirmaram-se a identidade e a atividade biol?gica da MtUMPK. Cromatografia de exclus?o por tamanho indicou que a prote?na ? um tetr?mero em solu??o e estudos cin?ticos revelam um comportamento alost?rico, sugerindo que a MtUMPK participa na regula??o de s?ntese de purinas versus pirimidinas. Experimentos atrav?s da t?cnica de calorimetria de titula??o isot?rmica (ITC) revelaram que o mecanismo cin?tico para os substratos ? sequencial ordenado, onde a mol?cula de ATP liga-se na enzima livre, seguido da liga??o do UMP, e que a libera??o dos produtos ADP e UDP ocorre de forma aleat?ria.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede2.pucrs.br:tede/5381 |
| Date | 10 September 2010 |
| Creators | Rostirolla, Diana Carolina |
| Contributors | Santos, Di?genes Santiago |
| Publisher | Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul, Programa de P?s-Gradua??o em Biologia Celular e Molecular, PUCRS, BR, Faculdade de Bioci?ncias |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da PUC_RS, instname:Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul, instacron:PUC_RS |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 8198246930096637360, 600, 600, 36528317262667714 |
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