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Previous issue date: 2015-03-02 / FACEPE; CNPq / Os Flavivírus estão entre os vírus emergentes mais importantes do mundo. Ainda
não há tratamento específico para nenhum membro da família Flaviviridae e novos
casos são continuamente anunciados, com centenas de mortes. Logo, é de
prioridade o desenvolvimento de vacinas, antivirais e métodos de diagnóstico,
precisos e rápidos, principalmente de baixo custo para este gênero. O objetivo deste
trabalho foi desenvolver ferramentas para o uso em diagnóstico sorológico
diferencial de flavivírus, em NB2, através do uso de técnicas de genética reversa e
triagem em larga escala de extratos naturais com atividade antiviral contra flavivírus.
Para o diagnóstico sorológico diferencial, foram construídas três quimeras
substituindo as glicoproteínas estruturais prM/E do vírus da febre amarela (YFV)
pelas dos vírus Ilhéus (ILHV), vírus rocio (ROCV) e vírus encefalite de São Luís
(SLEV). As quimeras construídas apresentaram replicação atenuada em cultivo
celular, quando comparadas ao vírus parental. A quimera YFV-WNV (vírus Oeste do
Nilo), construída anteriormente, foi utilizada para o estabelecimento de um protocolo
de diagnóstico sorológico por ELISA de captura. Analisou-se 164 amostras de soros
de equinos do Estado de Pernambuco para o WNV por ELISA, resultando em 62
amostras positivas. Todos os quatro vírus quiméricos citados foram utilizados na
validação dos resultados por PRNT50. No diagnóstico diferencial por PRNT50, de um
total de 62 amostras positivas no ELISA, observaram-se três amostras positivas para
WNV, 27 positivas para ILHV, quatro para o ROCV, quatro para o SLEV e uma para
YFV17DD. No segundo enfoque do trabalho utilizou-se a linhagem celular BHK-21-
rep-YFV17D-LucNeoIRES, contendo o replicon bicistrônico repórter do YFV e o vírus
repórter YFV-GLuc para triar 5200 extratos, onde foram identificados 73 extratos
naturais com possível atividade antiviral contra o YFV, confirmados por ensaio
utilizando o YFV17DD. Essa técnica inovadora de triagem de drogas, em larga
escala, deve auxiliar o desenvolvimento de antivirais contra flaviviroses, assim como
o protocolo de diagnóstico diferencial deverá auxiliar no correto diagnóstico e no
monitoramento de flavivírus emergentes no Brasil.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/14114 |
| Date | 02 March 2015 |
| Creators | CARVALHO, Amanda Gomes de Oliveira |
| Contributors | GIL, Laura Helena Vega Gonzalez |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Breton |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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