CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Endometriose à uma doenÃa caracterizada pela presenÃa de glÃndulas e estroma endometriais for a da cavidade uterina e do miomÃtrio. Clinicamente pode causar tumores, dor (dor pÃlvica crÃnica, dispareunia e dismenorrÃia) e infertilidade. EvidÃncias correntes indicam que as cÃlulas endometriais ectÃpicas durante a menstruaÃÃo (menstruaÃÃo retrÃgrada) jogadas a cavidade peritoneal em mulheres com endometriose, implantam e proliferam ectÃpicamente no peritÃnio e em outros ÃrgÃos, uma aÃÃo que està associada com a mobilizaÃÃo de cÃlulas do sistema imune para a cavidade peritoneal e com uma profunda resposta imune e local. Um aumento na quantidade do lÃquido peritoneal à um achado caracterÃstico na endometriose e està associado com a presenÃa aumentada de cÃlulas imunes como os macrÃfagos assim como um sem numero de substancias solÃveis derivadas daqueles macrÃfagos como prostaglandinas, interleucinas, TNF, fatores de crescimento e espÃcies reativas de oxigÃnio. à provÃvel por isso que novas medicaÃÃes para essa doenÃa evoluam no futuro prÃximo, para isso devem-se elucidar os mecanismos de todas essas substÃncias na patogÃnese da endometriose. Os objetivos desse trabalho sÃo verificar: (i) os efeitos de drogas inibidoras seletivas da enzima ciclooxigenase tipo 1 (COX-1) responsÃvel pelos eventos fisiolÃgicos do organismo e pela induzida COX-2, envolvida nos processos inflamatÃrios; (ii) os efeitos do L-NAME, um antagonista competitivo do Ãxido nÃtrico assim como a atividade da NO-sintase avaliada pelo ensaio da citrulina marcada (3H-labelled citrulline from labelled L-arginine) e (iii) os efeitos da drogas moduladoras de TNF-alfa (Talidomida e pentoxifilina) sobre o desenvolvimento da endometriose experimental e suas repercussÃes sobre a dor e a fertilidade em ratas. Endometriose experimental foi desenvolvida em ratas Wistar e os animais foram divididos em grupos testes. O tratamento foi dado do 5o ao 15o dia da induÃÃo da endometriose para verificar os efeitos sobre o crescimento dos endometriomas avaliados pelo peso Ãmido e histopatologia e agudamente 30 minutos antes do estÃmulo nociceptivo para avaliar a dor (contorÃÃes abdominais) e a fertilidade investigada pela percentagem de ratas grÃvidas e pelo numero de embriÃes por corno uterino. Aspirina (30mg/kg - um inibidor de seletividade intermediÃria entre as COXs); piroxicam (1mg/kg) e indometacina (2mg/kg), um inibidor seletivo especÃfico da COX-1 e nabumetona (5 e 15mg/kg) e meloxicam (0,4mg/kg) inibidor seletivo relativo da COX-2 foram usados por via oral. Todos os tratamentos realizados diminuÃram significativamente a dor quando avaliadas pelo teste de contorÃÃes. A mÃdia dos pesos Ãmidos dos endometriomas (g%) sÃo mostrados (Controle endometriose: 0,595Â0,085; Aspirina: 0,122Â0,019; piroxicam: 0,766Â0,35; indometacina: 2,05Â0,96 e para Nabumetona 5mg: 0,52 0,032; Nabumetona 15mg: 0,135Â0,03 e meloxicam: 0,387Â0,04). Com relaÃÃo à fertilidade, a percentagem de ratas grÃvidas foi: Controle endometriose, 40%; controle intacto, 100%; Falso-operado, 100%; Indometacina, Zero%; meloxicam, 60%; Aspirina, 60% e Nabumetona 5 e 15, 50 e 58% respectivamente. Os tratamentos com Aspirina e Nabumetona diminuÃram significativamente o desenvolvimento dos endometriomas assim como contribuÃram para o alivio da dor e incrementaram a fertilidade. Estes resultados sugerem o papel da COX-1 e -2 na fisiopatologia da dor relacionada a endometriose assim como a infertilidade e o crescimento dos endometriomas. A atividade da sintase de Ãxido nÃtrico realizada atravÃs da citrulina marcada dada em pmol de citrullina/mgxproteÃna/min à expressa nos endometriomas. A iNOS no 5o dia: 1,94+0,5; 10o dia: 2,46Â0,2 e no dia 15: 1,17Â0,3 assim como com a cNOS que diminui de forma tempo-dependente (5 dia: 2,48Â0,7; 10 dia: 1,8Â0,19; e dia 15: 0,78Â0,3). Essa diminuiÃÃo da atividade da cNOS à provavelmente devida a descamaÃÃo endometrial que ocorre normalmente com a evoluÃÃo da doenÃa assim como devida a fibrose que circunda os endometriomas e o aumento da iNOS pelo processo inflamatÃrio peritoneal encontrado na endometriose. O uso do L-NAME tambÃm fez diminuir os pesos Ãmidos dos endometriomas assim como melhorou a fertilidade e aliviou a dor de forma dose-dependente. A Pentoxifilina (30mg/Kg/day) administrada entre o 5 e o 14 dia da induÃÃo da endometriose foi efetiva na diminuiÃÃo da expressÃo da sintase de Ãxido nÃtrico, ambas constitutiva como induzida. Os resultados desse estudo sugerem o envolvimento do Ãxido nÃtrico no desenvolvimento da endometriose experimental assim como nas suas repercussÃes: dor e infertilidade. Os nÃveis peritoneais de TNF-alfa em ratas intactas foram de 28,95Â1,18ng/ml. Os nÃveis de TNF-alfa aumentaram no lÃquido peritoneal de ratas endometriÃticas de forma tempo dependente. Drogas que modulam o TNF foram efetivas em reduzir o crescimento de endometriomas experimentais: Controle: 0,595Â0,085g%; pentoxifilina (30 mg/Kg): 0,06Â0,008g%; talidomida (5mg/Kg): 0,20Â0,049g% e dexametasona (0,2mg/Kg): 0,145Â0,02g%. Essas drogas tambÃm aliviaram a dor e incrementaram a fertilidade. Esses resultados sugerem o envolvimento do TNF na fisiopatologia da endometriose. / Endometriosis is a disease characterized by the presence of endometrial glands and stroma out of the uterine cavity and of the myometrium. It may cause tumor, pain (chronic pelvic pain, dyspareunia and dysmenorrhea) and infertility. Currently available evidence indicates that endometrial cells misplaced during menses into the peritoneal cavity in women with endometriosis, implant and proliferate in the ectopic locations, an action that is associated with mobilization of the immune cells into the peritoneal cavity and a profound local and systemic immune response. An increase in the amount of peritoneal fluid is a characteristic finding in endometriosis and associated with improved presence of immune cells like macrophages as well as a wide range of soluble substances derived from those macrophages like prostaglandins, interleukins, TNF, growth factors and reactive oxygen species. It is likely the role of medication for this disease will expand in the future. Also the mechanisms of all these substances must be elucidated in the pathogenesis of endometriosis. The purpose of this study is to verify: (i) the drugs effects that selectively inhibits one of the enzymes ciclooxigenase type 1 (COX-1) responsible for the physiologic events of the organism and the induced COX-2, involved in the inflammatory process; (ii) the effects of L-NAME, a competitive antagonist of nitric oxide as well as NO synthase actvity assayed by 3H-labelled citrulline from labelled L-arginine and (iii) the effects of TNF-alfa modulating drugs (Thalidomide and pentoxifilline) on the development of experimental endometriosis and on its related pain and infertility in female rats. Experimental endometriosis was developed in female Wistar rats and the animals were divided into tests groups. The treatment was given from the 5th to the 14th day of endometriosis induction to verify the effects on growth of endometriomas evaluated by its wet weight and histopathology and acutely 30 minutes before the nociceptive stimulus in order to evaluating pain (writhing test) and fertility was assessed through the percentage of pregnant rats. Aspirin (30mg/kg - an inhibitor of intermediate selectivity among COXs); piroxicam (1mg/kg) and indomethacin (2mg/kg), specific selective inhibitors of COX-1 and nabumetone (5 and 15mg/kg) and meloxicam (0.4mg/kg) relative selective inhibitors against COX-2 were used per os. All the accomplished treatments decreased significantly the pain as evaluated by the writhing test. The mean wet weights of the endometriomas (g%) were as shown [Endo control: 0.595  0.085; Aspirin: 0.122  0.019; piroxicam: 0.766  0.35; indomethacin: 2.058  0.96 and for Nabumetone 5mg: 0.252  0.032; Nabumetone 15mg: 0.135  0.03 and meloxicam: 0.387  0.04]. As to fertility, the percentage of pregnant animals were as follows: Endo control, 40%; intact control, 100%; Sham operated, 100%; Indomethacin, Zero%; meloxicam, 60%; Aspirin, 60% and Nabumetone 5 and 15, 50 e 58% respectively. The treatments with Aspirin and Nabumetone had decreased the development of the endometriomas significantly as well as contributed to the relief of the pain and increasing fertility. These results suggest the role of COX-1 and -2 in the pathophysiology of endometriosis related pain, fertility and on its growth. NO synthase actvity assayed by 3H-labelled citrulline from labelled L-arginine. The nitric oxide synthase was expressed as pmol of citrulline/mg protein/min. The endometriomas expressed iNOS at the: 5th day: 1.94 + 0.5; 10th day: 2.46  0.2 and day 15: 1.17  0.3 as well as cNOS that decreased in a time-dependent way (5th day: 2.48  0.7; 10th day: 1.8  0.19; and day 15: 0.78  0.3). This decreasing activity of cNOS was probably found by the endometrial shedding that occurs normally in the course of this disease as well as by the fibrosis that surrounds the endometriomas and the increasing iNOS by the inflammatory peritoneal and tissue reaction that is frequently found in endometriosis. The use of L-NAME also decreased the wet weight of endometriomas as well as ameliorates the pain and fertility in a dose dependent fashion. Pentoxifylline (30mg/Kg/day) administered subcutaneously for 10 consecutive days during the established phase of endometriosis (days 5-14 post induction) was effective in decreasing the expression of nitric oxide synthase, both induced and constitutive. The results of the present study as those previously shown suggest the involvement of nitric oxide in the development of experimental endometriosis. TNF-alfa modulating drugs proved to reduce the mean weights of endometrial implants, obtained at day 15 of endometriosis induction with pentoxifylline (30 mg/Kg), thalidomide (5mg/Kg) and dexamethasone (0.2mg/Kg) treated rats (control: 0.595  0.085g%; pentoxifylline: 0.06  0.008g%; thalidomide: 0.206  0.049g% and dexamethasone: 0.145  0.02g%). The results of the present study suggest the involvement of TNF-alfa in the pathophysiology of experimental endometriosis. The peritoneal levels of TNF-alfa evaluated in intact rats showed 28.95  1.18ng of TNF-alfa/ml. The levels of TNF-alfa increased in the peritoneal fluid in a time dependent way after the peritoneal implant (endometriotic rat). These drugs also attenuated pain and increased fertility.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:416 |
| Date | 03 February 2005 |
| Creators | Francisco das Chagas Medeiros |
| Contributors | Ronaldo de Albuquerque Ribeiro, Ana Maria Sampaio Assereuy, Fernando de Queiroz Cunha, Francisco Valdeci de Almeida Ferreira |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Farmacologia, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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