Memoria para optar al título de Bioquímico / Durante la inflamación de las mucosas, las células epiteliales y los macrófagos expresan el receptor de tipo Toll 4 (TLR4) y secretan citoquinas, las que potencian el cuadro. Sin embargo, hasta ahora existe escasa información acerca de la regulación de la expresión de TLR4 por la combinación de moléculas pro-inflamatorias y antiinflamatorias.
Utilizando la línea celular de epitelio pulmonar, las células A549, se evaluó la expresión del TLR4 a nivel de transcrito, proteína y actividad transcripcional de mutantes con deleciones en la región promotora del receptor, posterior a la exposición al factor de necrosis tumoral á (TNFα) en presencia o ausencia del glucocorticoide sintético Dexametasona (Dex), mediante PCR en tiempo real, inmunoblot o citometría de flujo, y ensayos del gen reportero luciferasa, respectivamente.
El aumento de la expresión de TLR4 inducido por TNFα, tanto a nivel del mRNA como de la proteína, es revertido por la adición de Dex. La regulación de la actividad transcripcional del promotor de TLR4 por estas moléculas fue similar a la observada a nivel de proteína, y el efecto inhibitorio de Dex estaría comandado por al menos un elemento de respuesta del receptor de glucocorticoides, GR (GRE).
En conjunto, estos resultados demuestran un efecto antagónico de Dexametasona sobre la expresión de TLR4 inducida por TNFα, aparentemente por un mecanismo que involucra al menos la regulación de GR a nivel del promotor de TLR4. Se evidenció claramente en estas células los fuertes efectos antagónicos que ejercen sobre la expresión de TLR4, moléculas pro-inflamatorias como es TNFα y antiinflamatorias como los glucocorticoides
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/105256 |
| Date | January 2008 |
| Creators | Pérez Núñez, Ramón Daniel |
| Contributors | Puente Piccardo, Javier, Hermoso Ramello, Marcela, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacéuticas, Departamento de Bioquímica y Biología Molecular |
| Publisher | Universidad de Chile, Programa Cybertesis |
| Source Sets | Universidad de Chile |
| Language | Spanish |
| Detected Language | Spanish |
| Type | Tesis |
| Rights | Pérez Núñez, Ramón Daniel |
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