Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / The royal jelly (RJ), a secretion produced by the hipopharingeal and
mandibular glands of the nurse honeybees, have a variety of pharmacological
activities, aside of being necessary for the castes differentiation and the queen
Apis mellifera longevity. To identify the N-glycoproteins of two samples of RJ
provinient from distinct origin and conditions, we used the concanavalin A affinity
chromatography (ConA) associated to the mass spectrometry. The investigated
samples of RJ were the brazilian RJ (GRB), produced experimentally in local
apiary, and the Chinese RJ (GRC), mattered from China and commercially
available. The protein profile in SDS-PAGE 1D was characteristic for GRB and
GRC. The N-glycoproteins fractions eluted from the ConA column had presented
nine polypeptides for GRB and 12 for GRC, with relative molecular mass (Mr)
varying between 130 and 15 kDa. It was observed that the immediately aftercollects
freezing of the GRB did not inhibited the appearance of bands with Mr
lesser than 49 kDa. A total of 21 bands was excised from gel and digested with
tripisin for analysis in MALDI-TOF MS. The bioinformatic analysis revealed that all
the 16 proteins identified in the GRB and GRC samples belong to the A. mellifera
apalbumins family (Apa-1, Apa-2 and Apa-3). The Apa-2 was the protein that had
greater prevalence between the N-glycoproteins of the RJ, presenting Mr varying
between 110 and 25 kDa. The fact that the Apa-2 had been identified with distinct
Mrs can be related to glycosilation, oligomerization or degradation of this
apalbumin. Therefore, the ConA affinity chromatography associated with the
proteomic analysis made possible the identification of three members of the family
of RJ main proteins (Apa-1, Apa-2 and Apa-3). Moreover, the comparative study of
the GRB and GRC glycoprotein composition suggests similar standard between
these samples and can be useful in future studies that evaluate the biological
functions of the apalbumins pos-translational modifications. / A geléia real (GR), uma secreção produzida pelas glândulas hipofaringeal e
mandibular das abelhas operárias, possui uma variedade de atividades
farmacológicas, além de ser fundamental para a diferenciação das castas e
longevidade da rainha de Apis mellifera. Com o objetivo de identificar alguns dos
componentes bioativos deste produto da colméia, utilizou-se a cromatografia de
afinidade de concanavalina A (ConA) associada à espectrometria de massa para
identificar as N-glicoproteínas de duas amostras de GR obtidas de origem e
condições distintas. As amostras de GR investigadas foram a GR brasileira
(GRB), produzida experimentalmente em apiário local, e a GR chinesa (GRC),
importada da China e disponível comercialmente. O perfil de proteínas em SDSPAGE
1D foi característico para GRB e GRC, com um maior número de
polipeptídeos para GRC. As frações das N-glicoproteínas eluídas da coluna de
ConA apresentaram nove polipeptídeos para GRB e 12 para GRC, com massa
molecular variando entre 130 e 15 kDa. Observou-se que o congelamento
imediatamente pós-coleta da GRB não impediu o aparecimento de polipeptídeos
com Mr menor que 49 kDa. Um total de 21 bandas foi excisado do gel e digerido
por tripsina para análise em MALDI-TOF MS. Para cada perfil de massa dos
peptídeos (PMF) obtido, realizou-se a busca em banco de dados utilizando-se o
software Mascot. Esta análise revelou que as 16 proteínas identificadas nas
amostras de GRB e GRC pertencem à família das apalbuminas (Apa-1, Apa-2 e
Apa-3) da abelha A. mellifera. A Apa-2 foi a proteína que teve maior prevalência
entre as N-glicoproteínas da GR, apresentando Mr variando entre 110 e 25 kDa.
O fato da Apa-2 ter sido identificada com Mrs distintas pode estar relacionado a
fenômenos de glicosilação, oligomerização ou degradação desta apalbumina.
Portanto, a cromatografia de afinidade de ConA associada a análise proteômica
possibilitou a identificação de três membros da família das principais proteínas da
GR (Apa-1, -2 e -3). Além disso, o estudo comparativo da composição de
glicoproteínas da GRB e GRC sugere padrão similar entre estas amostras e pode
ser útil em estudos futuros que avaliem as funções biológicas das modificações
pós-traducionais das apalbuminas. / Mestre em Genética e Bioquímica
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/urn:repox.ist.utl.pt:RI_UFU:oai:repositorio.ufu.br:123456789/15902 |
| Date | 28 February 2007 |
| Creators | Teixeira, Renata Roland |
| Contributors | Espindola, Foued Salmen, Pimenta, Adriano Monteiro de Castro, Palma, Mario Sergio |
| Publisher | Universidade Federal de Uberlândia, Programa de Pós-graduação em Genética e Bioquímica, UFU, BR, Ciências Biológicas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFU, instname:Universidade Federal de Uberlândia, instacron:UFU |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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