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Avaliação da resposta imune em cães após imunização com dois antígenos recombinantes de Leishmania Chagasi

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Dissertação_ICS_Patrícia Oliveira Meira Santos.pdf: 1780569 bytes, checksum: 07577642b382657dbf6d08692335e772 (MD5) / Visando contribuir para o desenvolvimento de uma vacina contra leishmaniose visceral
canina, no presente trabalho, foi avaliada a resposta imune de cães após a imunização com
dois antígenos recombinantes de L. chagasi/L. infantum (denominados Lc9 e Lc13)
misturados a saponina em associação ou não com plasmídeo codificando IL-12 canina de
cadeia única (pcDNA3.1-scca-IL-12). Os antígenos foram injetados por via subcutânea e o
plasmídeo pcDNA3.1-scca-IL-12 foi administrado diretamente no linfonodo poplíteo
drenante, nos dias 0, 21, 42 e 170 do experimento. Nos animais, a geração de anticorpos
séricos da classe IgG anti-Leishmania, a proliferação e a produção de interferon gama (IFN-γ)
por células mononucleares de sangue periférico, após estimulação específica in vitro, foram
avaliadas. Os cães imunizados com Lc9 e Lc13, associados ou não a pcDNA3.1-scca-IL-12,
produziram anticorpos específicos da classe IgG reativos com o extrato total de antígenos de
L. chagasi/L. infantum e com cada antígeno recombinante separadamente. Contudo, tais
animais, não apresentaram resposta proliferativa e tampouco revelaram produção de IFN-γ,
após estimulação com extrato total de antígenos de L. chagasi/L. infantum, indicando que
pcDNA3.1-scca-IL-12 falhou em induzir resposta imune do tipo TH1 a antígenos coadministrados.
Por causa disso, experimentos adicionais foram realizados visando à definição,
em caráter preliminar, de condições apropriadas para uso de plasmídeo codificando IL-12,
capazes de promover resposta imune TH1 a antígenos co-administrados, na ausência de efeitos
tóxicos. Para isso, camundongos da linhagem C3H/Hej e C57Bl/6 foram injetados duas vezes
(50 μg / dose) com plasmídeo codificando IL-12 murina de cadeia única (pcDNA3.1-scmu-
IL-12) e eletroporação local foi realizada. Os camundongos C3H/Hej revelaram aumento na
concentração plasmática de IFN-γ, esplenomegalia, aumento do linfonodo inguinal e aumento
do índice de proliferação dos esplenócitos frente a estímulo in vitro por concanavalina A.
Além disso, os camundongos C3H/Hej apresentaram, histologicamente, expansão da polpa
vermelha associada a grande pleomorfismo celular, aumento no número de macrófagos
vacuolados, de megacariócitos e de células apoptóticas. Os camundongos C57Bl/6 exibiram
aumento na concentração plasmática de IFN-γ, esplenomegalia e aumento dos linfonodos
inguinal e poplíteo. Esses dados sugerem que as quantidades de pcDNA3.1-scmu-IL-12
utilizadas promovem efeitos tóxicos e menores doses do plasmídeo devem ser avaliadas em
experimentos para modificação da resposta imune em camundongos.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:192.168.11:11:ri/21116
Date January 2007
CreatorsSantos, Patrícia Oliveira Meira
ContributorsOliveira, Geraldo Gileno de Sá,, de Carvalho., Lain Carlos Pontes, Atta, Ajax Mercês, Ramos, Eduardo Antônio Gonçalves, Oliveira, Geraldo Gileno de Sá
PublisherInstituo de Ciências da Saúde, em Imunologia, UFBA, brasil
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFBA, instname:Universidade Federal da Bahia, instacron:UFBA
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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