Orientador: Paulo Pinto Joazeiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-29T00:27:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moraes_SuzanaGuimaraes_M.pdf: 7379393 bytes, checksum: 81d96ac157f0966b8e36ef547c5d2b7d (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A sínfise púbica é um tipo de articulação ligeiramente móvel localizada na confluência dos ossos pubianos, unindo-os através de coxins de cartilagem hialina. A estabilidade apresentada por essa articulação é alterada durante a gestação, período em que tanto a cérvix uterina como toda a cavidade pélvica, inclusive a sínfise, devem se adaptar proporcionando um parto normal. A separação da sínfise púbica fibrocartilaginosa do camundongo na prenhez depende de sua transformação em um ligamento extensível, processo este que envolve o aumento da biossíntese da matriz extracelular (MEC), principalmente colágeno, proteoglicanos e glicosaminoglicanos e a mudança na relação entre síntese e degradação dos mesmos. Na sínfise de camundongo o tumover destes componentes foram estimados por estudos bioquímicos e de microscopia de luz; porém pouca atenção tem sido dada aos aspectos ultra-estruturais e histoquímicos, tão pouco encontramos relatos sobre os componentes do sistema elástico e a plasticidade celular. O presente trabalho teve por objetivo conhecer a distribuição das fibras do sistema elástico e caracterizar o imunofenótipo e aspectos ultra-estruturais de células envolvidas na formação e involução do ligamento interpúbico na sínfise púbica de camundongos, durante prenhez, parto e pós-parto. O estudo foi realizado por meio de métodos seletivos de coloração para sistema elástico, imunohistoquímica para identificação das células (utilizando anticorpos específicos anti-a-actina de músculo liso (a-SMA), desmina e vimentina) e análise ultra-estrutural para ambos. Os resultados obtidos mostraram variação de tipos e de distribuição das fibras do sistema elástico, assim como um aumento de diâmetro e de comprimento aparente das mesmas, durante a prenhez. Estas observações indicam que o sistema elástico deve desempenhar importante papel, tanto impedindo o rompimento do ligamento interpúbico durante a evolução do mesmo, quanto recuperando a organização dessa estrutura após o parto. Com relação ao compartimento celular, foi observada uma intensa imunomarcação para anti-a-SMA durante todos os períodos observados, enquanto vimentina e desmina apresentaram uma expressão transitória (entre o 15° dia de gestação e 24 horas pós-parto). A análise ultra-estrutural mostrou ainda que estas células passam por algumas alterações morfológicas durante a formação do ligamento interpúbico, adquirindo características descritas anteriormente para miofibroblastos, como núcleo indentado e presença de fibronexus e geralmente são vistas próximas às fibras elásticas. Os dados morfológicos e ultra-estruturais sugerem que essas células possuem um aparato de contração formando uma rede entre célula e MEC capaz de transmitir a força gerada pela movimentação dos ossos púbicos durante a prenhez, tanto para células adjacentes como para outros componentes da MEC, a exemplo das fibras do sistema elástico. Portanto, a presença de células e fibras com essas características particulares na sínfise púbica pode contribuir para integridade estrutural e mecânica dessa articulação / Abstract: Pubie symphysis is a type of slightly mobile joint, formed with a fibroeartilaginous dise Iying between the hyaline cartilage-eovered mediar borders of the pubie bones. The stability presented for this joint is modified during the pregnaney, period where as mueh eervix uterine as the entire pelvie eavity, ineluded symphysis, must be adapted to providing a normal labor. The spreading apart of mouse pubie symphysis in pregnaney depends on its transformation in an extensible ligament, proeess this that involves the inerease of biosynthesis of the extraeellular matrix (ECM), mainly eollagen, proteoglycans and glyeosaminoglyeans and the ehange in the relationbetween synthesis and degradation of the same ones. In mouse symphysis the fumaver of these eompanents had been estimated by bioehemieal studies and light microscopy, however little attention has been given to the ultrastruetural and histoehemieal aspeets, so little we find reports about the elastie system components and the eellular .plasíic.i.ty. The aims of the present work were to know the distribution of the elastie system fibers and to ehal acterize the immunophenotype and ultrastrueturaJ aspe.cts of mvolved eells in the formation and involution of the interpubie ligament in mouse pubie symphysis, during pregnaney, parturition and post-partum. The study ap-pJjeds_leetive stainingmethods for elastie system, Immunohistoehemistry (using speeifie antibodies anti-a-actin of smooth musele (aSMA), desmin and vimentin) and ultrastructural analysis. Our results showed variation of types and distribution of the elastie sy_stem fibers, as well as an inerease of diameter and apparent length of the same ones, during the.pregnaney. These observations indieate that the elastie system must play important roles, preventing the disruption of interpubie ligament during it evolution, as well as reeov.erjng1he organization of this strueture after the parturition. With eoneem to the eellular eompartment, it was observed an intense immunoreaetivity for anti-a-SMA during ali the observed periods, while vimentin and desmin presented a transient expression (from 15° day of pregnaney until 24 hours postpartum). The ultrastruetural analysis still showed that these eells pass for some morphologie alterations during the interpubie ligament formation, aequiring eharaeteristie deseribed previously for myofibroblasts, as indentated nueleus and presenee of fibronexus and generally are seen elose to elastie fibers. The morphologie and ultrastruetural data suggest that these eells possess a eontraetion apparatus eonstituting a network between cell and ECM capable to transmit the force generatedbythe movement of the pubjc bones during the pregnancy, as much for adjacent cells as for other components of the ECM, such elastic system fibers. Therefore, the presenceof _ceJJs and fibers wjth these particular features in pubic symphysis can contribute for structural and mechanical integrity of this joint / Mestrado / Histologia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Maria do Carmo Alberto-Rincon / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T20:38:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MelloNeto_Juliode_M.pdf: 6097352 bytes, checksum: b14d67245f444831f3c75bf67798e5ea (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: A finalidade deste projeto foi analisar o comprometimento de gotículas lipídicas e dos fosfolípides como precursores de prostaglandina nas células deciduais. Para tanto, 40~1 de 25mg de indometacina solubilizado em óleo de gergelim foram injetados intraperitonealmente em fêmeas no quinto dia de gestação (DDG). Animais-controle receberam o mesmo volume de óleo de gergelim. Os animais foram sacrificados no sétimo DDG. As amostras foram subdivididas e parte delas foi fixada em solução de formalina contendo 3% de HgCI2 ou em formalina contendo CaCI2. Cortes de congelação foram processados para reação histoquímica para detecção de fosfolípides contendo colina (FCC) ou para Sudan Black. Outra parte dos sítios de implantação embrionária, foi fixada com glutaraldeído a 2% em tampão fosfato salina (PBS) O,lM, pH 7,4 , pós-fixado em tetróxido de ósmio a 1% sob tratamento em microondas e processados para inclusão em resmaepoxl. As análises morfométricas realizadas em sítios de implantação embrionária fixados em Bouin e corados com HE mostraram que o tamanho dos úteros tratados com indometacina é menor do que os não tratados. Ao microscópio óptico a reação decidual foi menos proeminente no endométrio dos animaIS tratados. A histoquímica para FCC mostrou forte reação nas células deciduais e menor intensidade nas células pré-deciduais. Resultado semelhante foi observado com a reação para Sudan Black. Quando comparadas as intensidades de reação dos animais não-tratados e tratados, estes mostraram reação mais intensa para FCC e para Sudan Black. As análises ultra-estruturais mostraram maior quantidade de "gotículas lipídicas no citoplasma de células deciduais dos animais tratados com indometacina do' que nos controles. Estes resultados sugerem efetiva ação da indometacina na reação decidual e alteração do metabolismo lipídico. O grande acúmulo de lípides nas células deciduais sugerem que o conteúdo lipídico poderia estar envolvido na biossíntese de prostaglandinas / Abstract: ln the aim to analyze the commitment of lipid droplets and their phopholipds contents in the decidual cells as prostaglandin precursors, it was i,!oculated intraperitoneal!>" 40lAL of 25mg indomethacin, a powerful inhibitor of prostaglandin-synthase, solubi!>,zed in. sesame oil, in the female mice on the fifth days of pregnancy. Controls animais received the same volume of sesame oil. Ali animais were sacrificed on the 7° dop. One group of embryo implantation sites. was collected and fixed in 3% HgCl2-formalin solution. Frozen sections (14lAm thick) were processed for phospholipids containing choline and Sudan Black histochemistry . Another group of lndomethacin treated and untreated animais were fixed with glutaraldehyde under - microwave treatment, postfixed, in OS04 (1%) and processed for usual epoxy resin embedding. The morphometric analysis showed the volume of lndomethacin treated uterus smaller than untreated one. At microscopic levei the decidual reaction was less proeminent in the endometrium of treated animal. TheP hosp holi pid-conta i n i n g-chol i ne and Sudan Black histochemistry showed strong reaction in fully differentiated decidual cel / Mestrado / Morfologia / Mestre em Ciências Biológicas

Acompanha memorial / Tese (livre-docencia) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-17T15:44:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Munhoz_CassioOdneiGarcia_LD.pdf: 3847459 bytes, checksum: b4dcb3d6aedcc03fd386eb8dd51596da (MD5) Previous issue date: 1983 / Resumo: Os gânglios simpáticos tõraco-lombares de camundongos foram descritos ao microscópio Óptico e eletrônico. Ao nível do microscópio óptico fez-se, ainda, um estudo histoquímico de carboidratos e lípides, bem como da biossíntese de macromoléculas sulfatadas através da radioautografia após i n-j e cão de Na235 SO4. A substancia de Nissl apresentou-se composta de cisternas do REr e ribossomos. Algumas cisternas apresentaram-se com extremidades livres de ribossomos e contendo constricções entre as partes lisa e rugosa, o que, sugere a liberação de vesículas e ou túbulo s envolvidos na transferência de material do REr para o Golgi. 0 aparelho de Golgi, formado de vários dictios somos ao redor do núcleo, não apresentou nenhum material eléctron-denso nos seus sáculos. Nas proximidades destes foram encontradas numerosas vesículas, de diferentes aspectos, das quais, aquelas contendo grânulos parecem ser as grandes vesículas de transporte e armazenamento de monoaminas. Corpos densos de tamanho e forma variáveis, pos sivelmente lisossomos secundários, contendo substancia de natureza lipídica complexa no seu interior encontraram-se espalhados pelo pericário. Estas estruturas parecem corresponder aos grânulos basófilos, PAS positivos e sudanófilos observados ao M.0. Células satélites formam uma única camada revestindo o corpo neural e seus prolonga mentos. Expansões digjtiformes de seu citoplasma e invaginações na superfície do neurônio subjacente sugerem a existência de troca de material entre essas células. Os dendritos e axónios foram facilmente identificados, porém, a não ser ao nível das terminações não foi possível a distinção entre axônios pre e pós-ganglionares. As fibras nervosas intraganglionares são predominantemente amielínicas. Ao lado de fibras mielinicas ocasionalmente observadas, foram, também, vistas fibras denominadas por outros autores de tunicadas e que ta i vez representem uma fase de transição entre as fibras mielínicas e amielínicas. Sinapses axodendríticas são as mais freqüentes e nenhuma terminação adrenérgica foi encontrada sobre o pericário ou seus prolongamentos. Alem das sinapses convencionais observaram-se contatos dendrodendríticos e dendro-somaticos sem vesículas no citoplasma subjacente. Estes contatos, provavelmente, são zonas de transmissão electrotônica. No tecido intersticial dos gânglios encontraram-se células fusiformes com prolongamentos longos e finos e citoplasma repleto de vesículas pinocitôticas que foram denominadas células vacuolizadas. Estas células, cujos prolongamentos se estendem na direção de pequenos vasos, possivelmente sejam um tipo de glia envolvida no transporte de substâncias através de suas vesículas. Nas superfícies livres de endoteliócitos de al guns vasos foram observadas microvilosidades envolvidas na formação de vesículas de macropinocitose, presumivelmente ligadas a processos de degradação intracitoplasmática. Não foi possível encontrar nenhuma célula SIF ou cromafin, no parênquima ganglionar. As demais estruturas dos neurônios ou do tecido intersticial não apresentaram aspectos diferentes do que tem sido descrito na literatura. A analise radioautográfica mostrou que a reação radioativa sobre o citoplasma dos neurônios era difusa,aumentando progressivamente de 0 a 6 horas para decrescer nos períodos subsequentes (24 e 48 h) quando então a reação começou a aparecer nos prolongamentos, revelando esse fato queotrans porte do material marcado pelo enxofre era lento. A natureza desse material não pode ser identificada com os métodos histoquímicos utilizados. A possível relação deste material marcado com as vesículas adrenergicas foi discutida. Grânulos basófilos difusos no pericário contendo material lipídico foram relacionados com os corpos densos observados ao M.E. / Abstract: Not informed / Tese (livre-docencia) - Univer / Histologia e Embriologia / Livre-Docente em Ciencias

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2016 / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:51:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 340469.pdf: 849677 bytes, checksum: 6cf8a207f8849b5f4a14a7b536084af6 (MD5) Previous issue date: 2016 / Buscando diminuir o número de animais utilizados em pesquisa, surge a necessidade de novos testes para predição de efeitos farmacológicos bem como o refinamento e atualização dos testes já existentes. O teste do nado forçado proposto por Porsolt é um modelo animal utilizado para detecção de efeitos antidepressivos em roedores e tem sofrido mudanças no seu protocolo desde a sua criação. O teste do nado forçado repetido (TNF-r) em camundongos é uma das modificações do teste de Porsolt. O TNF-r consiste em submeter os camundongos a uma sessão de nado forçado de 6 minutos (teste) que é repetida aos 7 (reteste 1) e 14 (reteste 2) dias após o teste. Neste trabalho buscamos avaliar os comportamentos dos animais e como reagem as sessões do TNF-r. O Grupo controle mostrou que a repetição por si só aumenta o tempo de imobilidade e que logo no primeiro minuto do reteste 2 já chega quase no teto. Buscando então a menor dose efetiva usamos as doses de 1, 3, 10 e 30 mg/kg de Fluoxetina (FLX), Bupropiona (BUP), Desipramina (DESI) e Butirato de sódio (BS). Interessantemente nenhuma das drogas em nenhuma das doses foi efetiva para reduzir o tempo de imobilidade na sessão teste e nem a repetição com a administração crônica reverteu este quadro. Por fim buscaremos entender o comportamento animal e quais os possíveis motivos desta falta de efetividade para estes animais no teste. <br> / Abstract : Reduction in the number of animals used in biomedical research is an ethical requirement for the current stage of this science. The updating of existing animal models may contribute to creation of new animal tests with more validity. The forced swimming test (FST) proposed by Porsolt is an animal model used to detect effects of acute treatment with antidepressants in rodents. FST has undergone changes in its protocol since it was proposed. The repeated FST (r-FST) in one Porsolt test modifications validated for rats. The aim in this work is to standardize r-FST for Swiss mice. The protocol of r-FST for Swiss mice consisted in subjecting the mice to a forced swim session of 6 minutes (test) that was repeated at 7 (retest 1) and 14 (retest 2) days after the test. As observed in male rats, untreated male Swiss mice respond with increased immobility to the repetition of forced swimming. To investigate the effects of antidepressants on immobility of Swiss mice in r-FST, mice received oral treatment with fluoxetine (FLX), bupropion (BUP), desipramine (DESI) and sodium butyrate (BS) in the doses of 1, 3, 10 and 30 mg/kg. Interestingly, none of the drugs in any dose reduced the immobility time in the test session as expected according to the literature. In addition, the chronic administration with antidepressants also failed to reduce immobility. When T-test was used to compare experimental group to the control group, BUP (10 mg/kg) reduced immobility significantly in the test and BS (10 mg/kg) did it in the retest 1. When mice were split into low immobility (LI) and high immobility (HI) categories, the anti-immobility effects of BUP (10 mg/kg) and BS (10 mg/kg) appeared in the test of LI groups. Discussion brings bibliography to understand why Swiss mice were more resistant to antidepressant treatment than anticipated by the current literature. Together data indicate that, in our conditions, Swiss mice may represent a new model to detect antidepressants with atypical mechanisms of action in the FST.

Orientador: Irineu Jose Barsanti de Camargo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-22T07:13:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nagamatsu_RoselyYukiko_M.pdf: 14747556 bytes, checksum: 774a8d03fd93c514b223bc33693a8bb0 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Foram estudadas respostas imunológicas apresentadas por diferentes linhagens de camundongos à infecção por estoques de Tripanosoma cruzi, cepa Y, mantidos em in vitro (TC) ou in vivo (TS). Foi observado que a manutenção do parasita em cultura celular atenua a virulência, refletida em menor mortalidade. As linhagens também apresentaram diferentes graus de resistência. Entretanto a linhagem BALBI/cJ, de mortalidade intermediária à linhagem AI J e C57Bl61 J, apresentou uma cinética parasitêmica maior, e portanto a parasitemia nem sempre correlaciona com a taxa de mortalidade. A imunização com o TC seguido de desafio após 72hs com o TS provocou uma proteção parcial à letalidade desse estoque. Análises imunohistoquímicas na fase precoce da infecção demonstraram uma hipertrofia do linfonodo poplíteo, do baço e das respectivas áreas povoadas por linfócitos, entretanto sem diferença entre localização das células T CD4 e T CD8. A análise percentual mostrou que na fase inicial da infecção existe zuna variação do número de linfócitos T CD4 e T CD8 dependente do estoque utilizado, que pode refletir a proteção induzida por TC / Abstract: Imune responses from differents strains of mice were studied after infection by stocks of Trypanosoma cruzi, Y strain, with in vitro (TC) or in vivo (TS) maintance. It was observed that maintance of parasite in celullar culture reduces virulence, reflected by smaller parasitemia. The strains of mice present differents levels of resistance to mortality. However, the BALBI cJ strain, of intermediated level of mortality between AI J and C57Bl61 J strains, presented greatest parasitemic kinectic, and therefore the parasitemia may not always correlacionate with mortality. The imunization with TC following challenge 72hs after with TS partially protected the lethal action of this stock. Imunohistoquimics analysis of early phase of infection demonstred hypertrophy in spleen, poplite linphonode and respectives limphocyte populated areas, however without difference between T CD4 or T CD8 lymphocyte localization. The percentual analysis showed that exist a variation of T CD4 and T CD8 lymphocyte subpopulations quantity in initial phase of infection depended of stock utilizated, which may reflect the protection induced by TC / Mestrado / Mestre em Imunologia

Orientador: Francesco Langone / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-26T12:53:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vilella_ConceicaoAparecida_M.pdf: 6029111 bytes, checksum: fbb25fa141e862ecffbfee0f99810d92 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: O diabetes mellitus tipo 1 auto-imune (DM-l) é uma doença resultante da disfunção e destruição das células _ pancreáticas. Este processo, conhecido como insulite, é dependente da presença de infiltrados mononucleares nas ilhotas de Langerhans. O camundongo NOD (non obese diabetic) é modelo experimental do Diabetes Mellitus auto-imune espontâneo, que se desenvolve entre o 4° e o 6° mês de vida, semelhante à doença no humano. O propósito do presente estudo foi a verificação dos efeitos do tratamento com gangliosídeos na incidência do Diabetes Mellitus espontâneo e acelerado pela Ciclofosfamida (CI-DM). no camundongo NOD. Os animais foram tratados diariamente com a mistura de gangliosídeos GMl(21 %),GDla (40%), GDlb(16%),GTlb(19%) (150 mg/kg) entre 43, 173 ou 253 semanas de vida e o desenvolvimento do DM foi monitorizado através de glicosúria e glicemia. Após o sacrifício foram realizadas análises morfológicas, incluindo quantificação e qualificação dos graus de insulite. Os resultados mostram que a prevalência do DM foi menor nos animais tratados com gangliosídeos, mesmo naqueles submetidos à Ciclofosfamida (CI-DM). Estes achados estão compatíveis com a análise morfológica que demonstrou menor grau de insulite nos animais tratados, tanto no modelo espontâneo como no modelo CI-DM, estes resultados podem ser observados ainda 8 semanas após a interrupção do tratamento. Reforçando a hipótese da ação imunomodulatória dos gangliosídeos, provavelmente relacionada à inibição da proliferação de linfócitos T ou sinalização celular. Em conclusão, o tratamento do camundongo NOD com gangliosídeos pode diminuir o grau de insulite e a incidência do DM neste modelo experimental. Contudo, novos estudos, direcionados para análise dos mecanismos moleculares envolvidos neste processo são necessários para elucidação dos mecanismos específicos da ação imunomodulatória dos gangliosídeos / Abstract: Diabetes mellitus type l(DM-l) is an autoimmune disease that results ITom destruction and dysfunction of pancreatic _-cells. This process, known as insulitis, is dependent on the presence of a mononuc1ear cells infiltrate in islets of Langerhans. Non obese diabetic (NOD) mouse is an experimental model of DM-l that develops spontaneous diabetes between the 4th and 6th month of life, similar to human disease. The aim of the present study was to verify the effects of the treatment with gangliosides on the incidence of spontaneous and cyc1ophosphamide accelerated diabetes model (CY-DM) in NOD mice. The animaIs were treated daily with a mixture of gangliosides GMl(21 %),GDla (40%), GDlb(16%),GTlb(19%) (150 mg/kg) between 4th and 17th or 24th week oflife and monitorized for the development of DM-l with urinary and blood glucose concentration. After sacrifice, morphologic analysis, inc1uding quantification and c1assification of insulitis degree was performed. The results show that the prevalence of diabetes was lower in gangliosides treated animaIs, even in those submitted to cyc1ophosphamide (CY-DM-l). These findings are in accordance with morphologic analysis that demonstrates that treated animaIs present lower degrees ofinsulitis in both spontaneous and CY-DM-l, results that could be also observed 8 weeks after the interruption of treatment. These findings reinforce the hypothesis of the immunomodulatory action of gangliosides, probably related to the inhibition of T cells proliferation or cellular signaling. In conc1usion, treatment of NOD mice with gangliosides could decrease insulitis degree and the prevalence of DM in this experimental model. However, new studies, directed to analyze the molecular mechanisms involved in these processes are needed in order to elucidate the specific mechanisms of immunomodulatory action of gangliosides / Mestrado / Histologia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Maria Julia Marques / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-01T11:47:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Minatel_Elaine_D.pdf: 2866714 bytes, checksum: 4b1a22830600fc8a3f80c2e327e07ce0 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: As junções neuromusculares (JNM) dos vertebrados, inicialmente polinervadas, tomam-se monoinervadas em um processo denominado eliminação sináptica. Os mecanismos envolvidos neste processo ainda são pouco conhecidos, sendo uma das possibilidades a de que mudanças no nível das moléculas da membrana pós-sináptica poderiam levar a remoção dos terminais nervosos em excesso. Neste sentido, a JNM distrófica se toma um modelo interessante para o estudo dos mecanismos envolvidos na eliminação sináptica, uma vez que as fibras distróficas não expressam distrofina e apresentam redução de moléculas do complexo distrofina-glicoproteina, complexo este que faz parte do citoesqueleto pós-sináptico e que possivelmente está envolvido na estabilização dos receptores de acetilcolina (AChRs). Desta forma, no presente trabalho verificamos se a eliminação sináptica e a distribuição dos receptores de acetilcolina, observados durante o desenvolvimento pós-natal, estão alterados na fibra deficiente de distrofina. Os AChRs e os terminais nervosos do músculo estemomastóide de camundongos mdx e controle (C57BL/1O) foram marcados, respectivamente, com rodamina-a.-bungarotoxina e anticorpo anti-neurofilamento. Através da microscopia confocal, observamos que 7 dias após o nascimento a maioria das JNMs do camundongo mdx se encontravam monoinervadas (86,7% - n=200), enquanto a mesma observação foi feita em 41,4% no controle (n=200). Consistente com este fato, no mesmo período, a presença de placas perfuradas é mais fTequente no mdx (18,6%) do que no controle (7,3%). No final da segunda semana pósnatal, todas as JNMs se encontravam monoinervadas (100% mdx e 94,7% controle, n=200 para cada grupo) e os AChRs apresentavam o padrão de distribuição adulto. No camundongo mdx, a presença de AChRs distribuídos em pequenas ilhas foi observada no período de 21 dias pós-natal em 13,3% das JNM, indicando a presença de fibras musculares regeneradas. Nossos resultados demonstram que a eliminação sináptica ocorre mais cedo nas fibras musculares distróficas quando comparada ao de um animal controle, sugerindo assim que a estabilização da fibra muscular pela distrofina ou pelo complexo distrofinaglicoproteínas normal é necessário para o curso da eliminação sináptica em tempo normal / Abstract: The vertebrate neuromuscular junction goes trom multiple to monoinervated during early postnatal life in a process calIed synapse elimination. The mechanisms underlying this process are unknown but one possibility would be that changes at in the molecular level in the postsynaptic cell lead to the removal of the overlying nerve terminal. The mdx mice show a deficiency of dystrophin and associated proteins, which are part of the postsynaptic cytoskeleton and possibly involved in acetylcholine receptors (AChRs) stabilization. In the study, we used rhodamine-a-bungarotoxin and anti-neurofilament-IgG-FITC to stain AChRs and nerve terminals of the sternomastoid muscle, during early postnatal development of mdx and control C57BL/lO mice. Using fluorescence confocal microscopy, we observed that 7 days after birth, 86,7% of the mdx endplates were monoinervated (n=200) while the same observation was made in 41,4% of the controls (n=200). Consistent with this is the fact that, at this time, perforated plaques were seen more trequent1y in mdx (18,6%) than controls (7,3%). By the end of the second postnatal week, all the endplates were monoinervated (100% mdx and 94,7% controls, n=200 for each group) and AchRs had attained the branched-pattern distribution of adults. In mdx mice, breaking down of receptors into islands, as observed in adult mdx, were seen 21 days after birth in 13,3% of the junctions, indicating the presence of regenerated muscle fibers. These results show that synapse elimination takes place earlier in dystrophin-deficient muscle fibers of the mdx mice, suggesting that stabilization of muscle fiber by dystrophin or a nonnal cytoskeleton complex is required for the nonnal time course of synapse elimination / Doutorado / Anatomia / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientadores : Olga Maria de Toledo Correa, Paulo Pinto Joazeiro / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T04:42:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pinheiro_MonicadeCampos_D.pdf: 13257834 bytes, checksum: 646512b7dd6dc4d93d59b0c98063ce48 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A sínfise púbica é uma articulação não sinovial, do tipo anfiartrose, que conecta os dois ossos púbicos através de um disco fibrocartilaginoso. Durante a prenhez, a sínfise púbica de camundongos passa por numerosas modificações estruturais, facilitadas por hormônios, a fim de permitir a passagem dos fetos pelo canal de parto. Essas modificações incluem um aumento da flexibilidade dessa articulação e a transformação do disco fibrocartilaginoso em um ligamento interpúbico flexível e elástico. O desenvolvimento do ligamento interpúbico envolve o aumento da biossíntese dos componentes da matriz extracelular, principalmente colágeno, proteoglicanos e glicosaminoglicanos e a mudança na relação entre síntese e degradação dos mesmos. Levando-se em consideração que o tumover destes componentes na sínfise de camundongos foi caracterizado por estudos bioquímicos e de microscopia de luz, pouco se sabe a respeito dos aspectos ultra-estruturais e histoquímicos de componentes da matriz extracelular, tais como os proteoglicanos e o colágeno tipo VI, bem como das interações entre as diferentes macromoléculas extracelulares. Esses aspectos são importantes porque podem ajudar a entender as relações entre os diferentes componentes da matriz extracelular nesse modelo. Nesse sentido, o objetivo desse trabalho foi caracterizar os glicosaminoglicanos, proteoglicanos e colágeno tipo VI na articulação interpúbica de camundongos nos diferentes estágios da prenhez. Atenção especial foi dada para as interações entre proteoglicanos e colágeno VI com outras macromoléculas da matriz. Para isso, foram empregadas análises citoquímica, imunohistoquímica, uso de sonda para detecção de ácido hialurônico, além de análises bioquímica e ultra-estrutural. Os resultados obtidos demonstraram que: 1) os proteoglicanos presentes na sínfise púbica de animais virgens são tecido-específicos e refletem as funções mecânicas de cada um dos tecidos no papel biológico global da sínfise púbica. 2) existe uma variação na quantidade e distribuição dos glicosaminoglicanos e proteoglicanos, como, por exemplo, o aumento de condroitim sulfato e o ácido hialurônico, durante a prenhez. Essas observações indicam que os proteoglicanos e glicosaminoglicanos devem ter um papel importante na formação do ligamento interpúbico e no aumento da extensibilidade desse ligamento no final da prenhez de camundongos. Estas macromoléculas podem ter um efeito importante nas propriedades de tensão do tecido. 3) A distribuição do colágeno tipo VI na sínfise púbica de camundongos virgens e prenhes é diferente nos vários tecidos que compõem essa articulação. Essa diferença pode refletir exigências funcionais diferentes para esse tipo de colágeno. A localização pericelular sugere um papel na regulação da interação célula-matriz, protegendo a célula contra estresse mecânico. Entretanto, a interação do colágeno tipo VI com outros componentes da matriz extracelular tais como colágenos fibrilares pode ter um importante papel na organização do espaço interfibrilar, provavelmente associado às propriedades elásticas do tecido / Abstract: Pubic symphysis is a nonsynovial amphiarthrodial joint that connects the two pubic bones by a fibrocartilaginous disk. During pregnancy, the mouse pubic symphysis undergoes a number of hormonally facilitated structural modifications to enable the passage of the fetuses through the birth canal. These modifications include an enhanced flexibility of the joint and the transformation of the fibrocartilaginous disk into a flexible and elastic interpubic ligament. The development of the interpubic ligament involves an increase of biosynthesis of the extracellular matrix components, mainly collagen, proteoglycans and glycosaminoglycans, in addition to a change in the relation between the synthesis and degradation of such components. The tu mover of these components in mouse symphysis has been well characterized by biochemical studies and light microscopy. H oweve r, relatively little is known about the ultrastructural and histochemical aspects of the extracellular matrix components, such as proteoglycans and type VI collagen, as well as the interactions between different extracellular macromolecules. These aspects are important since they can help in the understanding of the relationship between the different extracellular matrix components in this model. Hence the aim of this study was to characterize the glycosaminoglycans, proteoglycans and type VI collagen in the mouse interpubic joint through the different stages of pregnancy. Special attention was given to the interactions between proteoglycan and type VI collagen with other matrix macromolecules. The methodology used involved cytochemical analysis, immunohystochemistry, hyaluronic acid probes, biochemical and ultrastructural analysis. The results showed the following: 1) Proteoglycans present in virgin pubic symphysis were tissue specific and reflected the mechanical functions of each tissue in the overall biological role of the pubic symphysis. 2) There is a variation in the amount and distribution of the glycosaminoglycans and proteoglycans during pregnancy as, for example, a greater presence of GAGs, such as chondroitin sulphate and hyaluronic acid. These observations indicate that proteoglycans and glycosaminoglycans must play an important role in the formation of the interpubic ligament along with its increased extensibility during Iate pregnancy in the mouse. These macromolecules may have important effect on tensile properties of this tissue. 3) The distribution of type VI collagen in virgin and pregnant mice pubic symphysis is different in various tissues that compose this joint. This may reflect the different functional demands for this collagen. The pericellular localization suggests a role in the regulation of cell-matrix interaction, protecting the cell against mechanical stress. However, the interaction of type VI collagen with other ECM components, such as fibrillar collagens, may also play an important role in the organization of the interfibrillar space, probably associated with elastic properties of the tissue / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientadores: Anibal E. Vercesi, Helena Coutinho F. de Oliveira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:06:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alberici_LucianeCarla_M.pdf: 3634932 bytes, checksum: 7f2907392bf75e9d1b5a14672e665945 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Elevados níveis de triglicérides são uma característica comum na aterosclerose, obesidade, diabetes, alcoolismo, estresse e infecções. Uma vez que a mitocôndria tem sido implicada na morte celular diante de uma variedade de desordens metabólicas, neste trabalho examinamos as funções mitocondriais em camundongos transgênicos hipertrigliceridêmicos. A hipertrigliceridemia aumentou a respiração de repouso e aumentou a predisposição à transição de permeabilidade mitocondrial (TPM). A terapia com ciprofibrato reduziu os níveis plasmáticos de triglicérides, normalizou a respiração e a TPM. A respiração de repouso na mitocôndria do animal transgênico permaneceu elevada na presença de carboxitractilozídeo (inibidor do translocador de nucleotídeos de adenina), BSA (quelante de ácidos graxos) e de GDP (inibidor de UCPs). O conteúdo de UCPs foi similar em ambas as mitocôndrias de animais controles e transgênicos. Nós propomos que a rápida respiração de repouso representa uma adaptação regulada para oxidar o excesso de AGL em mitocôndrias dos camundongos transgênicos / Abstract: High plasma leveI of triglycerides is a common feature in atherosclerosis, obesity, diabetes, alcoholism, stress and infection. Since mitochondria have been implicated in cell death under a variety of metabolic disorders, we examined liver mitochondrial functions in hypertriglyceridemic transgenic mice. Hypertriglyceridemia increased resting respiration and predisposed to mitochondrial permeability transition (MPT). Ciprofibrate therapy reduced plasma triglyceride levels, normalized respiration and prevented MPT. The higher resting respiration in transgenic mitochondria remained in the presence of the adenine nucleotide carrier inhibitor, carboxyatractyloside, BSA and the UCPs inhibitor, GDP. UCP2 content was similar in both control and transgenic mitochondria. We propose that faster resting respiration represents a regulated adaptation to oxidize excess ftee fatty acid in the transgenic mice / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Jose Murilo Robilotta Zeitune / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:44:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Goncalves_ElizabethMariaAfonsoRabelo_M.pdf: 28511929 bytes, checksum: e43e4c0faa98f0ed13f4510819f82891 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: O H. pylori é uma bactéria espiralada, gram-negativa e microaerofílica que coloniza a mucosa gástrica humana. A infecção crônica causada pelo organismo é associada ao desenvolvimento de gastrite, úlcera péptica e câncer gástrico. Considerando que os mecanismos patogênicos da infecção não estão totalmente esclarecidos e os estudos utilizando modelos experimentais para o estudo da infecção são escassos no Brasil, o objetivo do presente estudo foi estabelecer um modelo experimental murino para a infecção pelo H. pylori, utilizando uma cepa patogênica da bactéria. Foram utilizados 126 camundongos BALB/c machos, com 6 a 8 semanas de idade, divididos em três grupos: GA: onde 42 animais foram inoculados com l ml de suspensão preparada com bactérias frescas contendo IO8 UFC/ml; GB: onde 42 animais foram inoculados com l ml de suspensão preparada com bactérias congeladas contendo IO8 UFC/ml e GC: onde 42 animais foram inoculados com 1 ml de caldo brucella, constituindo o grupo controle. Os animais foram inoculados por via oral durante dois dias consecutivos. Lotes de 6 a 7 animais de cada grupo foram sacrificados aos 7, 14, 21, 28, 35 e 60 dias pi e fragmentos do estômago e duodeno foram coletados. Metade dos fragmentos foi submetida à cultura. Os fragmentos restantes foram submetidos aos procedimentos rotineiros para inclusão em parafina, microtomia e colorações H&E e Giemsa modificado. Os resultados obtidos demonstraram que, embora o H. pylori não tenha sido isolado do trato gastrintestinal murino, os animais inoculados exibiram duodenite e infiltrado inflamatório no estômago. A presença da bactéria foi confirmada nos fragmentos corados pelo Giemsa na maioria dos animais infectados; o número de organismos diminuiu durante a infecção. No duodeno, independentemente da condição da cepa utilizada, a infiltração exibiu-se discreta a moderada nas vilosidades e mucosa. Nos animais do grupo GA, o infiltrado foi linfoplasmocitário até o 35° dia pi; entretanto, no grupo GB, o infiltrado demonstrou-se linfomonocitário durante os 60 dias pi. No estômago, o H. pylori induziu o desenvolvimento de infiltrado linfomonocitário no antro e corpo dos animais infectados. Embora não foram observadas diferenças quanto à intensidade e a natureza do infiltrado nos grupos GA e GB, verificou-se que a cepa fresca foi capaz de induzir a inflamação gástrica desde os períodos iniciais da infecção. No grupo GA, observou-se ainda que o infiltrado inflamatório foi mais persistente, permeando o estômago durante os 60 dias pi. Tanto no estômago quanto no duodeno, o pico da infecção foi visualizado aos 21 dias pi. Os dados observados no grupo GB sugeriram ainda que o processo de congelamento provavelmente inibiu a expressão de antígenos bacterianos, suprimindo a resposta plasmocitária observada no duodeno dos animais do grupo GA. Embora o congelamento não tenha interferido na natureza da infiltração gástrica, constatou-se a alteração no potencial patogênico da cepa e, consequentemente, no estabelecimento e manutenção da infecção. Em conjunto, os dados aqui descritos demonstraram que o camundongo BALB/c, apesar de ter desenvolvido duodenite e infiltrado inflamatório no estômago, demonstrou-se uma linhagem pouco suscetível à gastrite e ulcerogènese induzidas pela inoculação experimental do H. pylorí / Abstract: Helicobacter pylori is a gram-negative, spiral shaped and microaerophilic bacterium that colonizes human gastric mucosa. Chronic infection caused by H. pylori is associated with gastritis, peptic ulcer and gastric cancer. Considering that pathogenic mechanisms of infection has not been fully clarified and studies employing experimental H. pylori infection are scarce in Brazil, the aim of present study was to establish an experimental murine model for H. pylori infection. One hundred twenty-six male BALB/c mice, 6-8 weeks old. were divided in three groups: G A: 42 animals were challenged with l ml of suspension prepared with fresh clinical isolate adjusted to 108 CFU/ml; GB: 42 animals were challenged with 1 ml of suspension prepared with frozen bacteria adjusted to 108 CFU/ml and GC: 42 animals were inoculated with 1ml of brucella broth; they composed the control group. Mice were challenged by the oral route for two consecutive days. Six to seven animals from each group were killed at 7, 14, 21, 28, 35 and 60 days pi and fragments of stomach and duodenum were collected. One half of fragments was destinated to culture. The other half was paraffin imbibed and stained by Hematoxylin- Eosin (HE) and Giemsa. The results showed that, although H. pylori has not been isolated from gastrointestinal murine tract, challenged mice exhibited duodenitis and inflammatory infiltration in the stomach. The presence of bacteria was confirmed by Giemsa in the majority of infected animals and the number of organisms decreased during infection. At duodenum, the infiltration was mild to moderate in the villi and mucosa in the groups GA and GB. In group GA, the infiltration was lymphoplasmacytic until 35th day; however, in the group GB, the infiltration was h/mphomonocytic during 60 days pi. In the stomach, H. pylori induced h/mphomonocytic infiltration in the antrum and corpus of infected animals. Although there were not differences in relation to intensity and nature of infiltration in the groups GA and GB, the fresh clinical isolate was able to induce gastric inflammation since initials periods of infection. In the group GA the inflammatory infiltrate was persistent, permeating stomach during 60 days. In the stomach and duodenum, the peak of infection was visualized at 21 day. Data observed in the group GB suggest that freezing probably inhibited expression of bacterial antigens, suppressing the plasmacytic response observed at duodenum of mice in group GA. Although freezing did not interfere in the nature of gastric infiltration, it had altered pathogenic properties of H. pylori strain, and consequently, the establishment and maintenance of infection. In conclusion, data described here demonstrated that, in spite of mice ad developed duodenitis and gastric inflammatory infiltration, BALB/c mouse is not susceptible to development of gastritis and peptic ulcer during H. pylori experimental infection / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica