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Distribuição de glicoproteinas no ligamento periodontal e no periodonto relacionado ao esmalte do incisivo de camundongo, em diferentes condições funcionais : estudo radioautografico pela incorporação de [3H]-Fucose

Duarte, Monica Machado 03 August 2018 (has links)
Orientador: Jose Merzel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-03T22:57:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Duarte_MonicaMachado_M.pdf: 1989817 bytes, checksum: 5a5900a55bbb2d95070f23c019f2fc91 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Para analisar se o aumento da quantidade de proteínas não colágenas no ligamento periodontal de incisivos de ratos desimpedidos (hipofuncionais) está relacionado com o aumento da velocidade de erupção que ocorre nestes dentes, utilizamos a [3H]-fucose, precursor específico para glicoproteínas, e, através da radioautografia, observamos sua incorporação nos tecidos periodontais de incisivos de camundongos. Camundongos fêmeas foram divididos em três grupos com 4 animais cada. Em dois grupos o incisivo inferior esquerdo foi cortado à altura da papila gengival,tornando-o hipofuncional enquanto o contralateral direito tornou-se hiperfuncional. No terceiro grupo os incisivos foram mantidos intactos e portanto normofuncionais. A [3H]-fucose foi injetada na veia caudal no seguinte esquema: 1) no primeiro grupo, 1 dia após a instalação da alteração funcional; 2) no 2o grupo 7 dias após a desoclusão do incisivo esquerdo (assim mantida com cortes a cada 48 horas) e 3) no grupo normofuncional no mesmo tempo que no grupo 2. Os camundongos foram perfundidos com fixador de Karnovsky, em grupos de dois, 8 e 96 horas após a injeção do precursor radioativo. As hemimandíbulas foram removidas, descalcificadas, divididas em segmentos transversais e incluídas em araldite. Cortes de 1mm das regiões relacionadas à crista alveolar, primeiro molar e região odontogênica, foram cobertos com emulsão nuclear Ilford K-5 e expostos durante 14 dias. As radiografias foram analisadas quantitativamente utilizando um sistema de análise de imagens, determinando-se a densidade de área de grãos de prata nos tecidos periodontais. O exame microscópico das radioautografias mostrou que todos os tecidos dentais e periodontais do incisivo de camundongo apresentaram incorporação de [3H]-fucose, em graus variados de intensidade. Nos tecidos periodontais houve um aumento da biossíntese de glicoproteínas fucosiladas nos dentes desimpedidos por 7 dias, comparado aos normofuncionais, hiperfuncionais e hipofuncionais de 1 dia, particularmente no periodonto relacionado ao esmalte e no ligamento periodontal relacionado ao osso alveolar. Estes resultados sugerem que o aumento da quantidade de glicoproteínas fucosiladas (entre as quais fibronectina, integrinas, receptor de EGF) nos tecidos periodontais, não está diretamente relacionado a erupção acelerada que se estabelece nos dentes hipofuncionais no 10 dia de desoclusão. Como este aumento foi mais expressivo no tecido conjuntivo perivascular dos tecidos periodontais e ocorreu também na polpa, é possível que parte desta maior quantidade seja devida ao aumento dos receptores de EGF / Abstract: The periodontal ligament of unimpeded rat incisors show an increase in the amount of non-collagens proteins. To analyse if such increase is related to the higher eruption rate shown by those hipofunctional teeth we visualized through radiautography the uptake of 3H-fucose by periodontal tissues. Female mice were divided in three groups of four animals each. In two of these groups the left mandibular incisor was cut at the level of the gingival papila rendering the tooth hipofunctional while the contralateral incisor became hiperfunctional. In the third group the incisors were kept normofunctional. [3H]-fucose was injected throug the caudal vein: 1) in the first group, 1 day after the shortening of the left incisor; 2) in the second group, 7 days after the left incisor became unimpeded (and so maintained by repeating the shortening every 48h); and 3) in the normofunctional group at same time of the second group. Two animals of each group were killed by intracardiac perfusion of Karnovsky¿s fixative at 8 and 96h after injection. The hemimandibules were removed, decalcified, divided in transversal segments and embedded in araldite. 1mm-thick sections of the regions related to the alveolar crest, first lower molar and odontogenic organ were covered with Ilford K-5 nuclear emultion and exposed for 14 days. The area density of silver grains, over periodontal tissues was determined using an image analyzing system. In different degrees of intensity all dental and periodontal tissues were labeled by 3H-fucose. At 8h after the injection the silver grain density was markedly higher in the periodontal ligament related to the alveolar bone and in the enamel related periodontium of incisors kept unimpeded for 7 days as compared with all other groups. These results suggest that the increase of fucosileted glycoproteins (among them fibronectin, integrins and EGF-receptor) in the periodontal tissues of unimpeded incisors is not related to the accelerated rate of the eruption which begins 1 day after their crown is shortened. The uptake of 3H-fucose was conspicuously increased in the perivascular regions of the periodontal tissues and also in the pulp of 7 days hipofunctional incisors, indicating that the higher content of glycoproteins in these tissues may be related to the increase of EGF-receptors / Mestrado / Histologia e Embriologia / Mestre em Biologia Buco-Dental
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Contribuição ao estudo dos efeitos da hemidescorticação sobre a tireoide e desenvolvimento de dentes e mandibula, erupção dental e incorporação de 3H-glicina no ligamento periodontal

Tse, Maria do Carmo Panhoza 22 October 1986 (has links)
Orientador: Jose Merzel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-17T13:57:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tse_MariadoCarmoPanhoza_M.pdf: 1373306 bytes, checksum: 489aacd52ac69a8a46d85e671382c7b2 (MD5) Previous issue date: 1986 / Resumo: Resultados anteriores mostraram que a hemidescorticação produziu um retardo na taxa de erupção de incisivos de ratos. Com o objetivo de estudar o metabolismo proteico no ligamento periodontal (LP), 12 ratos jovens hemidescorticados (HD) e 9 controles (C) receberam uma dose única de 2,5 uCi de 3H-glicina e sacrificados 20 minutos, 1, 2 e 4 horas após. Em outro grupo de animais (7HD e 7C) determinou-se a evolução do peso corporal, de mandíbulas, incisivos e tireóide, bem como o comprimento dos dentes e, através de radioimunoensaio, os níveis séricos de T3 e T4'. Os resultados mostraram que os animais HD tiveram um desenvolvimento menor quanto ao peso do corpo e dos órgãos e comprimento dos incisivos. Os níveis séricos particularmente T4 se mostraram diminuídos o que indica que estes animais apresentaram pelo menos um discreto hipotireoidismo por alteração do eixo hipotálamo-hipófise-tireóide provocado pela HD. A concentração de 3H-glicina no LP ,definida através de radioautografia mostrou que foi maior nos animais HD indicando um acúmulo de material proteico, 30% do qual parece ser colágeno e o restante de proteínas ligadas a mucopolissacarídeos (ácido hialuronico) da substância fundamental. Este aumento de material proteico no LP parece corresponder ao mixedema provocado pelo hipotireoidismo e pode explicar, por alteração da resistência do LP, o retardo na erupção dental. A ausência de retardo na erupção em alguns experimentos com animais HD, é discutido a luz de uma eventual alteração do modelo, devida ao "stress" frequente quando os animais são mantidos em gaiolas coletivas / Abstract: Previous resul ts have shown that hemidecortication yields a retarded eruption rate of rats incisors. To study the protein metabolism of the periodontal ligament (PL) in such a condition, 12 hemidecorticated (HD) and 9 control young male rats received a single dose of 2.5 uCi of 3H glycine and were sacrificed 20 min., 1, 2 and 4 h after the injection. In another group of rats, being 7 experimental and 7 control, the influence of hemidecortication on body weight, weight of hemimandibles, incisors and thyroid glands, as well as the lenght of incisors and the serum levels of T3 an T4 was determined. Hemidecortica ted animaIs showed a lower development of body weight and organs and the incisor lenght. These data and the decrease in the T4 levels indicated that hemidecortica tion causes a discreet hypothyroidism probably by a disturbance of the hypothalamus-hypophysis axis. The silver grain concentration in the PL, as revealed by radioautography after 3H-glycine injection, was higher in hemidecorticated rats indicating an accumulation of proteins, 30% of which seems to be collagen and 70 % probably linked to glicosaminoglicans of the ground substance. This increase in protein concentration could be explained by the myxedema, one of the effects of hypothyroidism, which in turns could explain the retarded eruption rate due to the higher viscosity of the PL. The absence of a retarded eruption rate in some experiments with HD animals was interpreted as caused by stress when the animals were kept in collective cages. Such stress would induce the liberation of more glucocorticoids which are known to promote an increase in the rate of tooth eruption / Mestrado / Biologia e Patologia Buco-Dental / Mestre em Odontologia
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Efeito da sialoadenectomia sobre a incorporação de 3H-Prolina nas celulas e matriz do esmalte jovem e dentina de incisivos de camundongos, estudados atraves de radioautografia

Kerbauy, Maria Aparecida Carmona Rosa 16 July 2018 (has links)
Orientadora: Tereza de Lourdes S. Barrichello / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-16T19:47:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kerbauy_MariaAparecidaCarmonaRosa_M.pdf: 1179974 bytes, checksum: 4e2a0e79a93e07df3ba6cd50274fe472 (MD5) Previous issue date: 1986 / Resumo: Estudaram-se os efeitos da remoção das glândulas salivares maiores sobre a incorporação de 3H~pro1ina pelos ameloiblastos e odontoblastos de incisivos de camundongos. Animais sia1lodenectomizados e controles receberam, por . via intraperitonea1, uma dose unica de 2,5 ~Ci de 3H-pro1ina/ g de peso corpora 1, e sacri ficados, aos pares, 30 min., 2 h, 12 h e 24 h ap5s, por perfusão intracardiaca com p-formoldeido a 4%, pH 7,3.. Cortes de 1 um obtidos dos incisivos inferiores inc1uidos em polybed foram radioautografados....Observação: O resumo, na integra, podera ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Mestrado / Biologia e Patologia Buco-Dental / Mestre em Odontologia
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Ameloblastos secretores : secreção, absorção e reutilização de amelogenina marcada com 3H-prolina, visualizadas atraves de radioautografia

Castro, Zenaide Silveira de 17 July 2018 (has links)
Orientador : Guilherme Blumen / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odotologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-17T01:22:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Castro_ZenaideSilveirade_M.pdf: 1643854 bytes, checksum: c46f283def94aca48a59efb6e8fdd215 (MD5) Previous issue date: 1987 / Resumo: Dois grupos de camundongos com até 12 h após o nascimento foram sacrificados nos intervalos de 1 a 144 h. O primeiro grupo (21 animais pesando em média 1,5 g), após a injeção de uma dose única de 1 ~Ci/g de peso corporal de 3H-Timidina, e o segundo (27 animais, pesando em média 1,4 g), após a administração de uma dose única de 5 ~Ci/g de peso corporal de 3H-Prolina. Em ambos os experimentos as hemimandíbulas direitas não fixadas, não descalcificadas, contendo o dente incisivo foram incluidas em cápsulas de gelatina, congeladas e cortadas transversalmente no criótomo com a espessura de 6 m, enquanto as esquerdas foram di vididas em 2 ou 3 frações, fixadas em gli1taral' deido (para o material injetado com 3H-Timidina) e paraformal : deido (para o mater.ial injetado com 3H-Prolina), incluidas em Poly bed 812 e seccionadas longitudinalmente num ultramicrótomo, om a espessura de 1 um....Observação: O resumo, na integra, podera ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Two groups of mice 12 hrs old were sacrificed from 1 to 144 hours after the injection of 3H-Thymidine or 3H-Proline. One group of 21 animaIs, each weighing on average 1,5 g.were injected with a single dose of 1 ~Ci/g body weight of 3H-Thymidine and the other group of 27 animaIs each weighing on average 1,4 g.received a single dose of 5 ~Ci/g body weight of 3H-proline. The unfixed and undecalcified right half mandibles, co taining one incisor tooth were embedded in Tissue-Teck II using gelatin capsules and were immediately frozen. Transverse sections,6 ~m in thickness, were cut on a cryotome at -27oC beginning at the incisal tip or at the odontogenic organ of the tooth. The fixed and undecalcified left half mandibles were embedded in Poly bed 812 and cut to obtain longitudinal sections of 1 ~m thickness. Radioautography was carried out using a coating technique with Ilford K5 - emulsion...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Mestre em Ciências
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Biossintese de proteinas do ligamento periodontal de incisivos de camundongos em erupção desimpedida e retardada pela vimblastina : estudo radioautografico atraves da incorporação de 3H-glicina

Tosello, Darcy de Oliveira, 1938- 07 June 1990 (has links)
Orientador: Jose Merzel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-13T23:20:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tosello_DarcydeOliveira_M.pdf: 1735692 bytes, checksum: 61984916e5572f9ce6a68d95d54752c1 (MD5) Previous issue date: 1990 / Resumo: A taxa de erupção desimpedida de incisivos inferiores foi medida diariamente por método fotográfico durante 4 dias em camundongos machos adultos dividi dos em 3 grupos, dois dos quais receberam respectivamente, por via intraperitoneal, uma dose única de 1 mg e 2 mg/Kg de peso de vimblastina o terceiro grupo, que serviu de controle, recebeu um volume equivalente de soro fisiológico. A dose de 2 mg/Kg de peso de vimblastina mostrou-se mais efetiva provocando um retardo da erupção já no 1° dia do experimento, acentuando-se no 3º e 4° dias após a administração da droga. A biossíntese de proteínas no ligamento periodontal (LPD2) foi estudada num grupo de 24 camundongos machos adultos que receberam uma única dose de 2 mg/Kg de peso de vimblastina, e num grupo analogo, foi injetado volume equivalente de soro fisiológico. Após 24, 48, 72 e 96 h da administração da droga ou do soro, os animais foram injetados , intraperitonealmente com 5 µCi de H-glicina/g de peso, sendo sacrificados em lotes de 2 tratados e 2 controles após 1, 3 e 6 horas. O sacrifício foi feito por perfusão intracardíaca com o fixador de Karnowsky, sob anestesia com éter. As hemimandíbulas esquerdas, cujos incisivos haviam sido seccionados a cada 2 dias para manter a erupção desimpedida, foram descalcificadas com EDTA, divididas em três segmentos - basal, médio e incisal incluídas em Epon.Cortes de 1 µm de espessura foram radiautografados. A concentração de grãos de prata reduzida em cada segmento foi determinada no LPD junto ao dente; junto ao osso alveolar e numa região intermediária aos dois; no segmento basal foi determinada a concentração de gratos na pré-dentina. Os resultados qualitativos, quantitativos e estatísticos mostraram que: 1) a biossíntese de proteínas, que de acordo com vários dados da literatura é alterada agudamente por drogas antimicrotubulares nos animais tratados com vimblastina 24 a 96 h após, não diferiu dos controles; 2) como após este período, a erupção continuou retardada, pelo menos duas hipóteses podem ser aventadas: a) o metabolismo das proteínas (colágenas ou não colágenas) produzido pelos fibroblastos do LPD é independente do mecanismo de retardo da erupção por vimblastina; b) a biossíntese dessas proteínas teria se alterado em tempos curtos após a administração da droga e/ou estas proteínas teriam seus processos de degradação e renovação alterados, participando, portanto, como causa ou efeito do mecanismo de erupção, como descrito na literatura. Esta última hipótese tem a seu favor o indício visualmente detectado de um acúmulo de proteínas marcadas na pré-dentina / Abstract: The unimpeded eruption rate of mandibular incisors was measured daily by a photographic method during 4 days, in male adult mice divided in 3 groups, two of which received, respectively, (i.p. v)a single dose of 1 mg and 2 mg/Kg of body weight of vinblastine, and the third one which served as control, received an equivalent volume of saline. The dose of 2 mg of vinblastine was more effective, maintaining the decreased eruption rate up to the fourth day. The biosynthesis of proteins in the periodontal ligament was studied in a group of 24 male adult mice, which received a single dose of 2 mg/Kg of body weight of vinblastine. A control group of 24 animals received an equal volume of saline; 24, 48, 72 and 96 hours after, the animals were injected intraperitoneally with 5 µCi/g of body weight of H-glycine, and sacrificed 2 in each group, 1, 3 and 6 hours after that. The sacrifice was performed by intracardiac perfusion with Karnowsky fixative under ether anestesia. The left hemimandibles, whose incisors had been ressected every two days, in order to maintain the unimpeded eruption, were decalcified in EDTA, divided in 3 segments - basal, medium and incisal and embbeded in Epon. One µm thick sections were radioautographed. The silver grains counts in each segment were made in the tooth-related, bone-related and in a middle region of the PDL. Silver grain counts were also made i n the pre-dentine of the basal segment. The results showed: 1) the biosynthesis of proteins accordingly to several data in the literature is altered by antimicrotubular drugs in animals treated with vinblastine did not differ from the controls within the experimental period ; 2) since the eruption was decreased during that time, at least two explanations could be given: a) the protein metabolism (collagen and non collagen) produced by the PDL fibroblasts is independent of the mechanism by which vinblastine decreases the eruption rate; b)the biosynthesis of these proteins would have been altered shortly after the administration of vinblastine and/or their turnover rate would be slowed down, and thus they would participate as cause or effect of the mechanism of eruption, as described in the literature. This last hypothesis was reinforced by the increased amount of labeled proteins observed in the pre-dentine / Mestrado / Biologia e Patologia Buco-Dental / Mestre em Odontologia
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Efeito da vimblastina na incorporação de 3H-Glicina em proteinas do ligamento periodontal de incisivos de camundongos em erupção normal e desimpedidas

Polacow, Maria Luiza Ozores 04 August 1992 (has links)
Orientador: Jose Merzel / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-14T05:18:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Polacow_MariaLuizaOzores_D.pdf: 1631098 bytes, checksum: 48116d9cbf637c647b8b7e88de49ce20 (MD5) Previous issue date: 1992 / Resumo: O efeito da vimblastina sobre o metabolismo das proteínas do ligamento periodontal (LP) de incisivos de camundongos foi estudado radioautograficamente, através da incorporação de ³H-glicina. Camundongos machos adultos, com os incisivos inferiores esquerdos em erupção desimpedida e os direitos em erupção normal, receberam, intraperitonealmente, dose única de vimblastina (2mg/kg de peso) , enquanto os controles pela mesma via, foram injetados com volume equivalente de soro fisiológico ¿Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The effect of vinblastine on the metabolism of proteins of the periodontal ligament (PL) of mice incisors was studied through the incorporation of ³H-glicine as revealed by radioautography. Male, adult mice, with the left inferior incisors in unimpeded eruption and the right ones in normal eruption, received intraperitoneally a single dose of vinblastine of 2mg/kg of body weight, while control animals received, through the same via, an equivalent volume of saline ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Biologia e Patologia Buco-Dental / Doutor em Ciências
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Ultracitoarquitetura dos ameloblastos de molares de cobaia (Cavia porcellus, L.) durante as varias fases do seu ciclo vital

Schiavinato, Celia Regina 16 July 2018 (has links)
Orientador: Guilherme Blumen / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-16T22:19:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Schiavinato_CeliaRegina_M.pdf: 18188221 bytes, checksum: b1f6278159cd08e1cd0e45b21bf62a46 (MD5) Previous issue date: 1979 / Resumo: Segundas molares de cobaias de dois dias de vida, fixados por perfusão com uma solução de glutaraldeido a 2,5% em tampão fosfato e pós-fixadas par imersão na mesma liquida, descalcificados em EDTA a 4,13% e pós-fixados finalmente, em tetróxido de ósmio a 1% foram incluídas em Epon para exame ao M.E. Os compartimentos (de acordo com Blumen, 1970) do órgão do esmalte das lados mesial ou distal foram selecionados, aparadas e as ameloblastos mais algumas estruturas e células das regiões limítrofes de cada um deles, foram montadas em telas de cobre de 200 a 300 "mesh" / Abstract: Not informed. / Mestrado / Histologia e Embriologia / Mestre em Biologia Buco-Dental
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Estudo radioautografico, histoquimico e ultraestrutural dos ganglios simpaticos toraco-lombares de camundongos

Munhoz, Cassio Odnei Garcia, 1935-1994 17 July 2018 (has links)
Acompanha memorial / Tese (livre-docencia) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-17T15:44:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Munhoz_CassioOdneiGarcia_LD.pdf: 3847459 bytes, checksum: b4dcb3d6aedcc03fd386eb8dd51596da (MD5) Previous issue date: 1983 / Resumo: Os gânglios simpáticos tõraco-lombares de camundongos foram descritos ao microscópio Óptico e eletrônico. Ao nível do microscópio óptico fez-se, ainda, um estudo histoquímico de carboidratos e lípides, bem como da biossíntese de macromoléculas sulfatadas através da radioautografia após i n-j e cão de Na235 SO4. A substancia de Nissl apresentou-se composta de cisternas do REr e ribossomos. Algumas cisternas apresentaram-se com extremidades livres de ribossomos e contendo constricções entre as partes lisa e rugosa, o que, sugere a liberação de vesículas e ou túbulo s envolvidos na transferência de material do REr para o Golgi. 0 aparelho de Golgi, formado de vários dictios somos ao redor do núcleo, não apresentou nenhum material eléctron-denso nos seus sáculos. Nas proximidades destes foram encontradas numerosas vesículas, de diferentes aspectos, das quais, aquelas contendo grânulos parecem ser as grandes vesículas de transporte e armazenamento de monoaminas. Corpos densos de tamanho e forma variáveis, pos sivelmente lisossomos secundários, contendo substancia de natureza lipídica complexa no seu interior encontraram-se espalhados pelo pericário. Estas estruturas parecem corresponder aos grânulos basófilos, PAS positivos e sudanófilos observados ao M.0. Células satélites formam uma única camada revestindo o corpo neural e seus prolonga mentos. Expansões digjtiformes de seu citoplasma e invaginações na superfície do neurônio subjacente sugerem a existência de troca de material entre essas células. Os dendritos e axónios foram facilmente identificados, porém, a não ser ao nível das terminações não foi possível a distinção entre axônios pre e pós-ganglionares. As fibras nervosas intraganglionares são predominantemente amielínicas. Ao lado de fibras mielinicas ocasionalmente observadas, foram, também, vistas fibras denominadas por outros autores de tunicadas e que ta i vez representem uma fase de transição entre as fibras mielínicas e amielínicas. Sinapses axodendríticas são as mais freqüentes e nenhuma terminação adrenérgica foi encontrada sobre o pericário ou seus prolongamentos. Alem das sinapses convencionais observaram-se contatos dendrodendríticos e dendro-somaticos sem vesículas no citoplasma subjacente. Estes contatos, provavelmente, são zonas de transmissão electrotônica. No tecido intersticial dos gânglios encontraram-se células fusiformes com prolongamentos longos e finos e citoplasma repleto de vesículas pinocitôticas que foram denominadas células vacuolizadas. Estas células, cujos prolongamentos se estendem na direção de pequenos vasos, possivelmente sejam um tipo de glia envolvida no transporte de substâncias através de suas vesículas. Nas superfícies livres de endoteliócitos de al guns vasos foram observadas microvilosidades envolvidas na formação de vesículas de macropinocitose, presumivelmente ligadas a processos de degradação intracitoplasmática. Não foi possível encontrar nenhuma célula SIF ou cromafin, no parênquima ganglionar. As demais estruturas dos neurônios ou do tecido intersticial não apresentaram aspectos diferentes do que tem sido descrito na literatura. A analise radioautográfica mostrou que a reação radioativa sobre o citoplasma dos neurônios era difusa,aumentando progressivamente de 0 a 6 horas para decrescer nos períodos subsequentes (24 e 48 h) quando então a reação começou a aparecer nos prolongamentos, revelando esse fato queotrans porte do material marcado pelo enxofre era lento. A natureza desse material não pode ser identificada com os métodos histoquímicos utilizados. A possível relação deste material marcado com as vesículas adrenergicas foi discutida. Grânulos basófilos difusos no pericário contendo material lipídico foram relacionados com os corpos densos observados ao M.E. / Abstract: Not informed / Tese (livre-docencia) - Univer / Histologia e Embriologia / Livre-Docente em Ciencias
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Estudo farmacológico e auto-radiográfico do complexo GABAA/Sítio benzodiazepínico, e ensaios bioquímicos da enzima Na+/K+- Atpase e de receptores glutamatérgicos em regiões encefálicas de ratos susceptíveis e não-susceptíveis às convulsões clônicas induzidas pelo DMCM, um agonista inverso benzodiazepínico / Pharmacologycal and auto-radiographical study of GABAA/benzodiazepine site, and biochemical assays of the Na+/K+-ATPase and of the glutamatergic receptors in rats susceptible and non-susceptible to clonic convulsions induced by DMCM, a benzodiazepine inverse agonist

Contó, Marcos Brandão [UNIFESP] 26 December 2008 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-12-26. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-11T03:25:54Z : No. of bitstreams: 1 Publico-11764a.pdf: 1760987 bytes, checksum: 26371946d909a5525c0bd6c7cc6d7c33 (MD5). Added 1 bitstream(s) on 2015-08-11T03:25:55Z : No. of bitstreams: 2 Publico-11764a.pdf: 1760987 bytes, checksum: 26371946d909a5525c0bd6c7cc6d7c33 (MD5) Publico-11764b.pdf: 969495 bytes, checksum: d87ae7194b036aaff67581e32d434f64 (MD5) / Objetivo: Verificar se indivíduos susceptíveis e não-susceptíveis às convulsões clônicas induzidas pelo DMCM, um agonista inverso benzodiazepínico, diferem: 1) na sensibilidade ao efeito hipnótico induzido pelo diazepam e por outros moduladores alostéricos positivos do receptor GABAA; 2) na marcação auto-radiográfica com o [3H]- flunitrazepam ao longo do encéfalo; 3) na marcação de [3H]-L-glutamato e do [3H]-MK 801 em membranas de regiões encefálicas; e 4) na atividade da enzima Na+/K+- ATPase, bem como na marcação da [3H]-ouabaína às isoenzimas Na+/K+- ATPase de alta e de baixa afinidade ao radioligante em membranas de regiões encefálicas. Métodos: Ratos Wistar, machos, adultos foram administrados intraperitonealmente duas vezes com uma DC50 de DMCM (com intervalo de uma semana entre as administrações), obtendo-se dois grupos distintos: o grupo susceptível às convulsões (SC), que apresentou convulsões clônicas em ambas as exposições à droga, e o grupo não-susceptível às convulsões (NSC), que não apresentou alterações motoras em ambas as exposições. Após cerca de 25 dias da segunda administração de DMCM, os grupos selecionados foram submetidos aos experimentos com os hipnóticos diazepam, pentobarbital e etanol, nos quais foram registrados o tempo e a latência de sono ou foram sacrificados e seus encéfalos retirados para os seguintes ensaios bioquímicos: 1) auto-radiografia com o [3H]-flunitrazepam; 2) marcação de [3H]-L-glutamato e de [3H]- MK 801 em membranas neuronais; e 3) atividade enzimática da Na+/K+- ATPase e marcação de [3H]-ouabaína em enzimas de alta e baixa afinidade em membranas neuronais. Resultados: O grupo SC apresentou menor tempo de sono induzido pelo diazepam com relação ao grupo NSC, embora não tenham se distinguindo no tempo de sono induzido pelo pentobarbital e pelo etanol. Com relação aos experimentos bioquímicos, observou-se uma menor marcação de [3H]-flunitrazepam na região CA2 ventral do hipocampo no grupo SC. Quanto à ligação de [3H]-L-glutamato foi menor no grupo SC nas regiões do córtex frontal, amígdala + córtex límbico e hipocampo, enquanto que a ligação de [3H]-MK 801 foi menor no córtex frontal, hipocampo e estriado. Embora os grupos não tenham se diferenciado na atividade enzimática da Na+/K+- ATPase, o grupo SC apresentou uma menor marcação da [3H]-ouabaína em isoenzimas de alta afinidade nas regiões do tronco encefálico, córtex frontal e hipocampo, bem como uma menor marcação de [3H]-ouabaína nas regiões do tronco encefálico e córtex frontal em isoenzimas de baixa afinidade. Conclusão: As diferenças entre os grupos quanto à sensibilidade ao efeito convulsivante do DMCM, à ansiedade observada em experimentos anteriores, bem como à sensibilidade ao efeito hipnótico do diazepam podem estar associadas a uma diferença nos sítios benzodiazepínicos da região CA2 ventral do hipocampo, na ix atividade glutamatérgica e em isoformas específicas da Na+/K+- ATPase em determinadas regiões encefálicas. / Objective: The aim of this work was to verify if rats susceptible and non-susceptible to clonic convulsions induced by DMCM, a benzodiazepine inverse agonist, differ: 1) in the sensitivity to the hypnotic effect induced by diazepam and by others positive allosteric modulators of GABAA receptors; 2) in auto-radiographical analysis of [3H]-flunitrazepam binding along the brain; 3) in the binding of [3H]-L-glutamate and of [3H]-MK 801 in membranes from discrete brain regions; and 4) in the Na+/K+-ATPase activity, as well as in the binding of [3H]-ouabain to Na+/K+-ATPase isoenzimes with high and low affinity to the radioligand in membranes from discrete brain regions. Methods: Adult, male, Wistar rats were administered with two intraperitoneal injections of a convulsant dose 50% (CD50) of DMCM (one-week interval between them), resulting in two distinct groups: the group susceptible to clonic convulsions (SC), which presented clonic convulsions in both the expositions to the drug, and the group nonsusceptible to clonic convulsions (NSC), which did not present any motor disturbance in both the expositions. After 25 days from the second exposition to DMCM, the selected groups were submitted to the experiments with the hypnotics diazepam, pentobarbital and ethanol, in which were registered the latency and the time of sleep or they were sacrified and their brains were removed to carry out the following assays: 1) autoradiography with [3H]-flunitrazepam; 2) binding with the [3H]-L-glutamate and with the [3H]-MK 801 in neuronal membranes; 3) enzymatic activity of Na+/K+-ATPase and binding of [3H]-ouabain to the isoenzimes with high and low affinity in neuronal membranes. Results: The SC group presented a lower sleeping time induced by diazepam compared to the NSC group, and did not differ in the sleeping time induced by pentobarbital and ethanol. Concearning the biochemical experiments, it was observed a lower binding of [3H]-flunitrazepam in the CA2 subregion of ventral hippocampus in the SC group. A lower binding of [3H]-L-glutamate was also observed in the SC group in the frontal cortex, amygdala plus limbic cortex and hippocampus, whereas the binding of [3H]-MK 801 was lower in the frontal cortex, hippocampus and striatum compared to the NSC group. Althougt the groups did not differ in the enzymatic activity of Na+/K+- ATPase, the SC group presented a lower binding of [3H]-ouabain to the high-affinity isoenzimes in the brainstem, frontal cortex and hippocampus, as well as a lower binding of [3H]-ouabain to the low-affinity isoenzimes in the brainstem and in the frontal cortex compared to the NSC group. Conclusion: The differences between the groups concerning the sensitivity to the convulsant effect of DMCM, the level of anxiety previously observed, as well as the sensitivity to the hypnotic effect of diazepam may be associated with the GABAA/benzodiazepine site in CA2 subregion of ventral hippocampus, with glutamatergic activity and with specific isoforms of Na+/K+-ATPase in rat brain regions. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

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