Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. / Made available in DSpace on 2012-10-21T16:19:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1
202333.pdf: 3239923 bytes, checksum: 183f5c1614e5718a56e46b2b07869aa4 (MD5) / O presente estudo teve como objetivo verificar a eficácia da PCR no diagnóstico da Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) em pacientes do Estado de Santa Catarina comparando com a microscopia e intradermorreação. Duas formas de preservação das amostras e de extração de DNA foram testadas: imprinted em papel de nitrocelulose (NP) e imersão em etanol 70% (EB). A extração do imprinted em papel de nitrocelulose (NP) foi realizada por eluição e a imersão em etanol 70% (EB) pelo método do fenol-clorofórmio. As amostras foram analisadas por PCR, utilizando oligonucleotídeos direcionados a região conservada do minicírculo do DNA cinetoplástico (kDNA). A microscopia detectou a presença de Leishmania sp. 80% das 55 amostras analisadas enquanto a PCR detectou a presença de Leishmania sp. em 74,5% das 55 amostras e em 75,5% de 45 amostras de pacientes submetidos ao Teste de Montenegro. A extração de DNA pelo fenol-clorofórmio das amostras EB mostrou-se mais eficiente quando comparada com a extração por eluição das amostras NP. Além disso, a PCR-RFLP foi empregada para a identificação das espécies de Leishmania das amostras de pacientes. A maioria das amostras foi identificada como L. (Viannia) braziliensis. Este trabalho sugere o uso da PCR para a confirmação dos casos de ACL onde a microscopia ou intradermorreação sejam negativas e mostra a predominância de L. (V.) braziliensis como espécie causadora da LTA em SC.
Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufsc.br:123456789/87203 |
Date | January 2004 |
Creators | Machado, Priscilla Emmanuelle |
Contributors | Universidade Federal de Santa Catarina, Steindel, Mario, Grisard, Edmundo C. |
Publisher | Florianópolis, SC |
Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
Language | Portuguese |
Detected Language | Portuguese |
Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
Format | xiii, 65 f.| il., tabs. |
Source | reponame:Repositório Institucional da UFSC, instname:Universidade Federal de Santa Catarina, instacron:UFSC |
Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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