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Previous issue date: 2009-03-06 / In this study, Himar1 was used to obtain a total of 929 transposon mutants, of
which, 721 correspond to coding sequences (CDS) disrupted by the transposon in
551 different genes. Some mutants were evaluated regarding the effect of gene
disruption to virulence in the hamster model, and two attenuated mutants containing
the transposon into hypothetical genes were identified. Another study aimed to
develop a new genetic tool to help in the study of specific genes. Thus, an inducible
expression system for L. biflexa was developed. Such inducible expression system
employed as reporter genes the green fluorescence protein (gfp) and the gene
encoding for the flagelin B protein (flaB). Fluorescent L. biflexa (GFP) and motile
leptospires (FlaB) were observed after induction by IPTG. Finally, another study was
conducted to determine, by PCR amplification, the presence of the lig genes in
different pathogenic species. ligB appeared to be ubiquitously distributed, while ligA
and ligC were detected only in a reduced number of serovars. In addition, a 214 bp
specific ligB fragment was used to constitute a new method for pathogenic
Leptospira species classification. / Neste estudo, o Himar1 foi utilizado para a obtenção de um total de 929 mutantes,
dos quais, 721 correspondem a seqüências codificadoras (CDS) interrompidas pelo
transposon, cobrindo 551 genes diferentes. Alguns mutantes foram avaliados com
relação aos efeitos da interrupção gênica sobre a virulência em modelo animal, e
dois mutantes atenuados contendo o transposon em genes hipotéticos foram
identificados. Outro estudo realizado buscou desenvolver uma nova ferramenta
genética para auxiliar no estudo da função de genes específicos. Assim, foi
desenvolvido um sistema de expressão induzível para L. biflexa. Este sistema de
expressão empregou como repórter o gene da proteína verde fluorescente (gfp) e o
gene da proteína flagelina B (flaB). L. biflexa fluorescente foi observada, assim como
leptospiras que voltaram a ter mobilidade após a adição do agente indutor (IPTG).
Finalmente, foi conduzido um estudo para a determinação da presença dos genes
da família lig nas diversas espécies de leptospiras patogênicas, através da técnica
de PCR. O gene ligB apareceu amplamente distribuído, enquanto que ligA e ligC
foram detectados apenas em um reduzido número de sorovares. Além disso, a
sequência de um fragmento específico de 214 pb do gene ligB pode ser usada para
a constituição de um novo método para a classificação das espécies patogênicas de
Leptospira
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpel.edu.br:123456789/1265 |
| Date | 06 March 2009 |
| Creators | Cerqueira, Gustavo Maia de |
| Contributors | CPF:42251850015, http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4723107D9, Leite, Fabio Pereira Leivas, CPF:20732660025, http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4763076J5, Dellagostin, Odir Antônio |
| Publisher | Universidade Federal de Pelotas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, UFPel, BR, Biotecnologia |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPEL, instname:Universidade Federal de Pelotas, instacron:UFPEL |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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