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Previous issue date: 2008 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Sistemas de expressão heteróloga em Saccharomyces cerevisiae têm sido descritos, porém
apresentam algumas desvantagens quando utilizados em linhagens industriais: (1) a marca de
seleção é baseada em supressão de auxotrofia ou resistência a compostos químicos; (2) a
marca de seleção nem sempre é excisável; (3) o alvo de integração geralmente não é multicópia;
(4) os vetores ainda possuem seqüência bacteriana. Neste trabalho, construímos um
novo sistema para modificação de linhagens industriais de S. cerevisiae que obedecem aos
requisitos para utilização de OGM s na indústria: linhagem modificada sem marca de
resistência a antibióticos, não portadora de seqüências de origem bacteriana e seqüências
integradas derivadas de organismos GRAS (Generally recognized as safe). Este sistema pFB,
composto por dois vetores pFB-LAC4 e pFB-LAC12, combina o método de seleção por
complementação metabólica para lactose com a utilização do DNA ribossomal como alvo de
integração por recombinação homóloga resultando num sistema de modificação com seleção
limpa (ecologicamente correta), de integrações estáveis e re-utilizável numa mesma
linhagem. Este sistema permite a modificação genética de linhagens industriais de S.
cerevisiae para expressão heteróloga e/ou modificações de vias metabólicas permitindo o
melhoramento ou introdução de vias bioquímicas nestas linhagens.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/6279 |
| Date | 31 January 2008 |
| Creators | LEITE, Fernanda Cristina Bezerra |
| Contributors | MORAIS JÚNIOR, Marcos Antônio de |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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