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Previous issue date: 2016-01-13 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / O envenenamento por serpentes é uma condição de saúde negligenciada que registra altas taxas anuais de mortalidade e morbidade. A administração do soro antiofídico, quando apropriada, é eficaz na neutralização dos efeitos sistêmicos do envenenamento, mas novas abordagens terapêuticas são necessárias para a redução dos índices de morbidade. A resistência natural da serpente Bothrops jararaca ao seu próprio veneno é atribuída parcialmente à presença de uma glicoproteína sérica, BJ46a, que atua como um inibidor natural de metaloproteinases de venenos de serpentes (SVMP). O objetivo principal do trabalho foi caracterizar a porção glicídica de BJ46a e sua relevância para a atividade biológica do inibidor. As análises demonstraram que a porção glicídica de BJ46a é composta primariamente por N-glicosilações complexas e sialiladas, ancoradas nas posições Asn76, Asn185, Asn263 and Asn274. Após incubação prolongada (72h) de BJ46a com exoglicosidases e PNGase F, foi possível remover substancialmente a parte glicídica do inibidor
BJ46a extensivamente desglicosilada foi capaz de interagir com a metaloproteinase jararagina (SVMP de classe P-III) e inibir efetivamente sua atividade proteolítica sobre azocaseína. Além disso, também analisamos a interação de BJ46a com diferentes metaloproteinases isoladas de venenos de serpentes. O inibidor foi capaz de interagir com as SVMP (classe P-I) BaP1, atroxlisina-I e leucurolisina-a, inibindo sua atividade fibrinogenolítica. O entendimento estrutural da inibição de metaloproteinases por BJ46a pode levar ao desenho racional de peptídeos inibitórios que venham a ser utilizados tanto na terapia antiofídica quanto em outras patologias / Snake bite en
venoming is a neglected health condition
that inflicts high rates of
mortality and morbidity every
year. The antivenom treatment, when properly
administered, is effective in ne
utralizing the systemic effects
but new approaches are
needed to address the issue of morbidity. The resistance of the venomous snake
Bothrops jararaca
against its own venom is pa
rtly attributed to a serum glycoprotei
n,
BJ46a
,
that acts as a natural snake venom metalloproteinase inhibitor. Our main
goal was to characterize the glycan moiety of BJ46a and its releva
nce to its
biological activity. The analyses have shown that the glyc
an portion of BJ46a is
composed primarily by sialylated, complex
-
type N
-
glycans attached in the positions
Asn76, Asn185, Asn263 and Asn274. Substantial glycan removal from BJ46a in
native conditions was attained by prolonged incubation (72h) with exoglycos
idases
and PNGase F. Extensively deglycosylated BJ46a was able to interact with the class
PIII metalloproteinase jararhagin and effectively inhibit its proteolytic activity upon
azocasein.
Also, we
analyzed
the interaction of BJ46a with different
metallop
roteinases isolated from snake venoms. The inhibitor was able to interact
with the
class P
-
I
metalloproteinases BaP1, atroxlysin
-
I
and leucurolysin
-
a
inhibiting
their fibrinogenolytic
activities.
The understanding of the structural requirements for
the met
alloproteinase inhibition by BJ46a could lead to the rational design
of
synthetic peptides that
could be used in
antiophidic therapy as well in other
pathologies
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/13344 |
| Date | January 2014 |
| Creators | Bastos, Viviane de Almeida |
| Contributors | Kalume, Dario Eluan, Nogueira, Fábio César Sousa, Fuly, André Lopes, Ferreira, André Teixeira da Silva, Freire, Denise Maria Guimarães, Valente, Richard Hemmi |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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