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Produção de lipases por leveduras isoladas do bagaço de caju utilizando fontes alternativas de Carbono e Nitrogênio

FREITAS, M. F. M. Produção de lipases por leveduras isoladas do bagaço de caju utilizando fontes alternativas de Carbono e Nitrogênio. 2017. 103 f. Tese (Doutorado em Engenharia Química)-Centro de Tecnologia, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by pgeq ufc (pgeq@ufc.br) on 2017-11-21T19:19:47Z
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2017_tese_mfmfsales.pdf: 1907549 bytes, checksum: 22fee806e690e6f63b1598b0a1542349 (MD5) / Rejected by Marlene Sousa (mmarlene@ufc.br), reason: Prezada Fátima: Vc realizou muitas alterações sugeridas, mas faltam ainda algumas para vc corrigir. Por esse motivo, sugerimos consultar o modelo de template, para ajudá-la nesta tarefa, disponível em: http://www.biblioteca.ufc.br/educacao-de-usuarios/templates/
Vamos agora as correções sempre de acordo com o template:
1. Na capa, na parte inferior da folha coloque a informação da cidade e o ano em negrito.
3. Na ficha Catalográfica, o seu nome deve estar de acordo com a folha de rosto e capa. Voce suprimiu o ultimo nome. Sendo assim a entrada: Sales, Maria de Fátima Matos de Freitas (Não de Freitas) No corpo da ficha coloque seu nome completo por extenso.
4. Retire os hifens de separação na LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS.
7. No sumário na seção terciária (3 dígitos) a partir do 4.2.1 os numerais não estão em itálico. Favor colocar em toda a lista. A palavra CONCLUSÃO Por ser seção primária deve ser toda maiúscula. Retire o numeral 7 da palavra REFERÊNCIAS
8. Na lista de referencias, A palavra que deve ser usada é REFERÊNCIAS (sem o numeral 7), em negrito e centralizada na folha.
9. Na lista de REFERENCIAS, dê uma revisada em toda a lista para colocar o espaço depois do ponto de abreviação (v. n. p. ) nos artigos de revistas. Ex; v.2, n. 3, 2012. Coloque espaço após v. 2, n. 3, 2012
Reenvie novo arquivo para a secretaria com as correções que enviaremos o nada consta por e-mail.
Att. Marlene
mmarlene@ufc.br
3366-9620
on 2017-11-22T11:23:36Z (GMT) / Submitted by pgeq ufc (pgeq@ufc.br) on 2017-11-24T19:13:19Z
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2017_tese_mfmfsales.pdf: 1891030 bytes, checksum: b360634c75b70dda334f156745c6be57 (MD5) / Rejected by Marlene Sousa (mmarlene@ufc.br), reason: Alteração de Maria de Fátima Matos de Freitas Sales
Prezada Fátima: Vc realizou muitas alterações sugeridas, mas faltam ainda algumas para vc corrigir. Por esse motivo, sugerimos consultar o modelo de template, para ajudá-la nesta tarefa, disponível em: http://www.biblioteca.ufc.br/educacao-de-usuarios/templates/
Vamos agora as correções sempre de acordo com o template:

3. Verifiquei que houve alteração no seu nome em relação ao arquivo passado, portanto vc tem que alterar em todas as folhas em que é citada. Faltou alterar na folha de aprovação, pois seu nome ainda permanece com SALES. Na ficha então deve ficar: Freitas, Maria de Fátima Matos de (Não de Freitas). No corpo da ficha coloque seu nome completo por extenso.

7. No sumário na seção terciária (3 dígitos) a partir do 4.2.1 os numerais não estão todos em itálico. Favor colocar em toda a lista. Faltou vc colocar em itálico:
5.9.1 Efeito da temperatura e pH na atividade da enzima produzida.
5.9.2 Eletroforese.
5.9.3 Processo de purificação

9. Na lista de REFERENCIAS, dê uma revisada em toda a lista para colocar o espaço depois do ponto de abreviação (v. n. p. ) nos artigos de revistas. Ex; v.2, n. 3, 2012. Coloque espaço após v. 2, n. 3, p. 513-523, 2012 . Vc ainda não corrigiu o espaçamento solicitado em toda a lista.
Reenvie novo arquivo para a secretaria com as correções que enviaremos o nada consta por e-mail.
Att. Marlene
mmarlene@ufc.br
3366-9620
on 2017-11-27T13:25:15Z (GMT) / Submitted by pgeq ufc (pgeq@ufc.br) on 2017-11-30T11:40:13Z
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Depois me envie novamente.
Marlene on 2017-11-30T12:52:03Z (GMT) / Submitted by pgeq ufc (pgeq@ufc.br) on 2017-11-30T12:58:25Z
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2017_tese_mfmfreitas.pdf: 1894579 bytes, checksum: 225db412b0fb510a23717698c92cd485 (MD5) / Approved for entry into archive by Marlene Sousa (mmarlene@ufc.br) on 2017-11-30T14:20:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1
2017_tese_mfmfreitas.pdf: 1894579 bytes, checksum: 225db412b0fb510a23717698c92cd485 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-30T14:20:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1
2017_tese_mfmfreitas.pdf: 1894579 bytes, checksum: 225db412b0fb510a23717698c92cd485 (MD5)
Previous issue date: 2017-06-13 / Lipolytic enzymes can catalyse a wide variety of reactions and are highly specific. For biotechnology, the need arises for the search for new microrganisms for this production. The objective of this work was to evaluate lipase production by two yeasts isolated from cashew bagasse, Candida tropicalis URM 7057 and Meyerozyma caribbica LABIOTEC 4 and to compare it with C. rugosa yeast NRRL Y-95. Synthetic culture media were initially tested for production of the enzyme. Synthetic medium C (containing glucose, KH2PO4, yeast extract, MgSO4 .7H2O, peptone and oleic acid) showed the best intracellular activity results (282 ± 14 in 48 h of cultive). Then, alternative medium culture was formulated with residues, in addition to ammonium sulfate and peptone, and evaluated the production of the enzymes of interest. Medium culture 01 contained molasses, medium culture 02, corn steep liquor (CSL), medium culture 03, olive mill wastewater (OMW) and medium culture 04, all of them. Medium 04 was better because it allowed the production of larger amounts of lipase, probably because it had a higher amount of nutrients for yeast. An experimental design was conducted to verify the influence of the concentrations of residues on lipase production. Corn steep liquor (CSL) had a positive effect on this production, providing extracellular lipase activity of 587 ± 5 U/L, in 24 h of cultive. The use of stirred tank bioreactors favored the production of lipases, since the activities of the lipase produced by C. rugosa in bioreactor were higher than those produced in flasks (600 U/L in bioreactor and 400 U/L in flasks, after 48 h of cultive) and for yeast C. tropicalis the enzymatic activity also presented in a larger quantity (close to 500 U/L, compared to 400 U/L in flasks). Biomass growth of yeast biomass C. tropicalis, in flasks and in bioreactor, was similar up to 48 h. The enzyme produced by C. rugosa has a molar mass close to 60 KDa, with an optimum pH of 7.0 and an optimum temperature of 40 °C. The partial biochemical characterization of the lipase produced by C. tropicalis showed that it presents an optimum temperature of 60 °C for the intracellular extract and 70 °C for the extracellular extract, optimum pH equal to 7.0. After adsorption of the enzyme in octyl-agarose, it was possible to identify, by zymogram analysis and by electrophoresis, bands close to those obtained for C. rugosa commercial lipase (60 KDa, 45 KDa and 22 KDa). / As enzimas lipolíticas são capazes de catalisar uma grande variedade de reações e são altamente específicas. Para a biotecnologia surge a necessidade da busca de novos micro-organismos para essa produção. O objetivo desse trabalho foi avaliar a produção de lipases por duas leveduras isoladas do bagaço de caju, Candida tropicalis URM 7057 e Meyerozyma caribbica LABIOTEC 4 e comparar pela levedura C. rugosa NRRL Y-95. Inicialmente foram testados meios de cultura sintéticos para a produção da enzima. O meio sintético C (contendo glicose, KH2PO4, extrato de levedura, MgSO4.7H2O, peptona e ácido oleico) foi o que apresentou melhor resultados de atividade intracelular (282 ± 14 U/L em 48 horas de cultivo). Em seguida, 4 meios de cultura alternativos foram formulados com resíduos, além de sulfato de amônia e peptona, e avaliados na produção da enzima de interesse. O meio 01 continha melaço, o meio 02, milhocina (CSL - corn steep liquor), o meio 03, águas residuais da produção do azeite (olive mill wastewater - OMW) e o meio 04, todos eles. O meio 04 se mostrou melhor por permitir a produção de maiores quantidades da enzima lipolítica, provavelmente por apresentar uma quantidade maior de nutrientes para levedura. Um planejamento fatorial fracionado foi conduzido para se verificar a influência das concentrações dos resíduos na produção da lipase. A milhocina apresentou efeito positivo nessa produção, propiciando atividade extracelular de lipase de 587 ± 5 U/L, em 24 horas de cultivo. O uso de biorreator tipo tanque agitado favoreceu a produção de lipases, visto que as atividades da lipase produzida por C. rugosa em biorreator foram maiores que as produzidas em frascos (600 U/L em biorreator e 400 U/L em frascos, após 48 horas de cultivo), e para levedura C. tropicalis a atividade enzimática também se apresentou em quantidade maior (próximo a 500 U/L, comparado a 400 U/L em frascos). O crescimento da biomassa da levedura C. tropicalis em frascos e em biorreator foi similar até 48 horas. A enzima produzida por C. rugosa tem massa molar próxima a 60 KDa, com pH ótimo em torno de 7,0 e temperatura ótima de 40 °C. A caracterização bioquímica parcial da lipase produzida por C. tropicalis mostrou que ela apresenta temperatura ótima de 60 ºC para o extrato intracelular e 70 °C para o extracelular, pH ótimo igual a 7.0. Após adsorção da enzima em octil-agarose, foi possível identificar, por análise de zimograma e por eletroforese, bandas próximas às obtidas para a lipase de C. rugosa comercial (60 KDa, 45 KDa e 22 KDa).

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.repositorio.ufc.br:riufc/28232
Date13 June 2017
CreatorsFreitas, Maria de Fátima Matos de
ContributorsRodrigues, Lígia, Gonçalves, Luciana Rocha Barros
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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